檢驗儀器分析技術(shù)及應(yīng)用講義-文庫吧
2025-06-02 16:40 本頁面
【正文】 計數(shù)池的敏感區(qū)，在10~70176。時對每一個細胞進行掃描分析，提供了細胞結(jié)構(gòu)，形態(tài)的光散射信息。：、單核、粒細胞（中性、嗜堿性、嗜酸性）。測量正常標本時，可以從這4個角度（0176。110176。7190176。垂直光散射70110對白細胞進行測量。同一種特定的程序自動存儲和分析數(shù)據(jù)，將白細胞分為嗜酸性粒、中性粒、嗜堿性粒、淋巴和單核五種。（大題）血紅蛋白測量原理：血紅蛋白的單位是g／100m1(新制是g／L)，臨床檢驗時因難以從血液中將其分離出來而采用相對比色法進行間接測量。用溶血劑將經(jīng)過稀釋的血液中的紅細胞破壞，血紅蛋白便溶解出來，再加入轉(zhuǎn)化試劑進而轉(zhuǎn)化為顏色穩(wěn)定的氰化血紅蛋白。血紅蛋白含量越高，它的顏色就越深，透光性就越差(或吸光性越強)。用光電器件檢測透射光強度，并與已定標的血紅蛋白值相比較，即可得出血紅蛋白含量。常用的光路系統(tǒng)為了防止光散射和外來光干擾，均采用雙波長法測量。在血液樣品中加入氰化鉀，將生成氰化血紅蛋白，這是一種顏色很穩(wěn)定的物質(zhì)。它的光密度曲線在540nm處有一個吸收峰。（填空）血樣分析一般包括吸樣、稀釋、送樣等過程。三．流式細胞分析技術(shù)（簡答題）流式細胞儀（FCM）：主要功能：可進行細胞多參量分析，包括細胞大小、形狀、蛋白熒光、氧化還原狀態(tài)、膜的結(jié)構(gòu)、流動性、微黏性、膜電位、酶活性、鈣離子含量、pH、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA合成、堿基比例等；進行細胞表型分析；細胞分選、DNA含量分析以及細胞分化周期分析等。FCM工作原理：將待測細胞染色后制成單細胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室，不含細胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣，鞘液就能夠包圍著樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細胞在鞘液的包被下單行排列，依次通過監(jiān)測區(qū)域。流式細胞儀通常以激光作為激發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激光熒光。光散射信號在前向小角度進行檢測，這種信號基本上反映了細胞體積的大小。這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號。細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現(xiàn)的。流式細胞儀中所用的濾片有中性濾片、帶通濾片、帶阻濾片、長波通濾片、短波通濾片、長波通雙色性反射片（填空題）影響流式細胞術(shù)分析的因素：細胞的熒光染色、激光光源的穩(wěn)定性、細胞流速的穩(wěn)定性、細胞懸液樣品的影響（細胞黏連，團塊常造成管道阻塞，重疊細胞可造成分析誤差。）流式細胞儀的組成：光學(xué)系統(tǒng)，液流系統(tǒng)，電子系統(tǒng)，計算機系統(tǒng)和數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換處理系統(tǒng)。（大題）流式細胞儀的臨床應(yīng)用：在免疫學(xué)中的應(yīng)用（外周血T淋巴細胞亞群的測定，T淋巴細胞亞群用于器官移植后排斥反應(yīng)的監(jiān)測，肺泡灌洗液中T淋巴細胞亞群的測定，在艾滋病監(jiān)測中的應(yīng)用，細胞內(nèi)染色和細胞因子的測定）；在血液病學(xué)中的應(yīng)用。四．血凝分析技術(shù)生物學(xué)方法：凝固法，即將凝血因子激活劑加入到待檢血漿中，使血漿發(fā)生體外凝固，凝血儀連續(xù)記錄血漿凝固過程中的一系列變化，并將這些變化信號轉(zhuǎn)變成數(shù)據(jù)，用計算機收集、處理數(shù)據(jù)后得出檢測結(jié)果。（填空題）可分為三類：電流法、黏度法、光學(xué)法。（判斷題）凝血儀根據(jù)這種由于血液凝固而導(dǎo)致光強度的變化來判斷凝固終點的方法稱之為光學(xué)法。（填空或判斷題）散射比濁法：根據(jù)待檢樣品在凝固過程中散射光的變化來確定凝固終點的檢測方法。透射比濁法：根據(jù)待檢樣品在凝固過程中吸光度的變化來確定凝固終點的檢測方法。黏度法：在待檢樣品中加入小鐵珠，利用變化的磁場使小鐵珠產(chǎn)生運動，隨著血漿的凝固，血漿粘稠度增加，小鐵珠的運動強度逐漸減弱，儀器根據(jù)小鐵珠運動強度的變化來確定凝固終點。生物化學(xué)方法是以酶學(xué)方法為基礎(chǔ)的直接定量法，其優(yōu)點是用酶學(xué)方法直接定量；測定結(jié)果準確；重復(fù)性好；便于自動化；標準化；所需樣品量小。五．血液流變學(xué)分析技術(shù)影響血液流變特性因素：紅細胞的特性、白細胞的變形性、血小板的聚集性、纖維蛋白原濃度等血液流變特性：紅細胞聚集性，紅細胞變形性，血液黏度（全血黏度與流變場中切變率有一定關(guān)系、運動黏度、相對黏度、比黏度、還原黏度）。血液黏度的測量是其中最重要的指標。測量血液黏度的儀器目前普遍應(yīng)用的是毛細管黏度計及回轉(zhuǎn)錐板式黏度計。毛細管法測血黏度的理論依據(jù)是泊肅葉定律。血液黏度的影響因素：血液中細胞因素的影響紅細胞對血液黏度的影響（紅細胞壓積是主要影響因素），白細胞對血液黏度的影響，血小板對血液黏度的影響；血漿血清黏度
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