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《基礎微生物學》ppt課件-文庫吧

2025-04-19 18:09 本頁面


【正文】 所以使后者成為一個 遺傳性狀穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導子 。 感染復數(shù)( , multiplicity of infection) : 感染復數(shù) ——由于每一宿主細胞表面的特異性受體有限,因此所能吸附的噬菌體數(shù)目也有一個限量。每一敏感細胞所能吸附的噬菌體的數(shù)量 ,,可達 250~360。 由于超 、不能產(chǎn)生子代噬菌體的裂解,稱為 自外裂解( lysis from without) 。 噬菌體裂解第一個宿主時可能有三種情況: 1)包入的完全是噬菌體的 DNA( 正常噬菌體 ) 2)包入的完全是細菌 DNA( 完全缺陷噬菌體 ) 3)部分帶有噬菌體基因的 DNA( 部分缺陷噬菌體 ) 轉(zhuǎn)導分別是由后兩種噬菌體參與進行的。 噬菌體裂解第一個宿主 一個穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導子的形成 1. 第一次交換 2. 第二次交換 3. 交換完成,外源 DNA摻入染色體組中 ? ( abortive transduction) 概念: 受體菌經(jīng)轉(zhuǎn)導獲得的供體 DNA片段在受體菌中不發(fā)生配對 、 交換和整合 , 也不迅速消失 , 而只是進行轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯( 性狀表達 ) , 這種現(xiàn)象就稱為 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導 。 現(xiàn)象: 發(fā)生流產(chǎn)轉(zhuǎn)導的細胞在其進行細胞分裂后 , 只能將這段外源 DNA分配給一個子細胞 , 而另一子細胞僅獲得供體基因的產(chǎn)物 ——酶 , 在表型上表現(xiàn)出輕微的供體菌特征 , 每經(jīng)過一次分裂 , 就受到一次稀釋 , 所以,能在選擇性培養(yǎng)基平板上形成微小菌落就是流產(chǎn)轉(zhuǎn)導的特點。 2. 局限性轉(zhuǎn)導 定義 :通過 部分缺陷的溫和噬菌體 把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中 , 并獲得表達的轉(zhuǎn)導現(xiàn)象 。 特點 : ● 噬菌體對供體菌和受體菌都是溫和噬菌體 ● 只能轉(zhuǎn)導供體菌的個別特定基因 ( 一般為噬菌體整合位點兩側(cè)的基因 ) ● 該特定基因由 部分缺陷的噬菌體 攜帶 缺陷噬菌體使由于其在形成過程中所發(fā)生的低頻率 ( 約10 – 5) “ 誤切 ” , 或由于 雙重溶源菌 的裂解而形成( 約形成 50%缺陷噬菌體 ) 分類 :低頻轉(zhuǎn)導與高頻轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)導的過程 ?該溶源菌被誘導裂解時,有極少數(shù)( ~ 10 – 5)的前噬菌體( prophage)發(fā)生不正常切離( abnormal excesion),其結(jié)果會將插入位點兩側(cè)之一的少數(shù)宿主基因(如 ?前噬菌體的兩側(cè)分別為發(fā)酵半乳糖的 gal基因或合成生物素的 bio基因 )連接到噬菌體 DNA上(而噬菌體也將相應的一段 DNA遺留在宿主的染色體組上),通過衣殼的“誤包”,就形成了一種特殊的噬菌體 ——缺陷噬菌體( defective phage)。它們沒有將宿主溶源化的能力,而是使宿主成為一個局限轉(zhuǎn)導子,對 ?噬菌體沒有免疫性。 ?溫和噬菌體感染受體菌后,其 DNA會開環(huán),以線狀形式整合到宿主染色體的特定位點上,從而使宿主細胞發(fā)生溶源化,并獲得對相同溫和噬菌體的免疫性。 一般的轉(zhuǎn)導現(xiàn)象中 , 從宿主染色體上切離時發(fā)生不正常切離的頻率極低 , 故這種裂解物中的部分缺陷噬菌體的比例是極低的 ( 10 – 4 ~ 10 – 6) 。 把這種裂解物稱為 LFT( 低頻轉(zhuǎn)導 ) 裂解物 。 用 LFT裂解物以 低 m. o. i( 感染復數(shù) ) 感染宿主 ,就可獲得極少量的局
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