【正文】 目前,由于紫杉醇的市場價格高得嚇人,國內(nèi)消費水平低下,據(jù)各個醫(yī)院統(tǒng)計,全國每年總用量30毫克/支的紫杉醇針劑不足10萬支,大約可滿足1500個患者。1公斤99%紫杉醇可制造33333瓶注射液(30毫克/瓶),由此可推算國內(nèi)實際用量大約在1公斤——,據(jù)業(yè)內(nèi)專家市場調(diào)查推測,國內(nèi)紫杉醇的消費量是非常大,——40萬,則需用量在500公斤——1000公斤.(說明:每個患者大約需要60——80瓶,按70瓶平均計算,30毫克/瓶,即:每個患者共計需要2100毫克。1公斤=1 000 000毫克=500個患者(2100毫克/個患者)?！?000公斤紫杉醇才可以基本滿足25萬——40萬個患者.) 曼地亞紅豆杉到栽植后,從第8年開始干枝葉每年畝產(chǎn)量開始穩(wěn)定,年畝產(chǎn)量為:500公斤干枝葉,20畝可采收10噸干枝葉,%.據(jù)初步調(diào)查,如果發(fā)展正常,5年后,國內(nèi)紅豆杉原料基本可以滿足生產(chǎn)需要. 5000畝的正常產(chǎn)量:到第8年后,畝產(chǎn)500公斤干枝葉,5000畝可采2500噸干枝葉,10噸干枝葉可提取1公斤99%紫杉醇,則5000畝的原料可提取250公斤99%紫杉醇,而根據(jù)目前的市場需要還應(yīng)擴大5000畝的種植基地,10年后,基本能滿足國內(nèi)市場需求. 紅豆杉的投入,產(chǎn)出時間相對較長,但它同時又是效益較大,不在于需求,市場,提取及制藥技術(shù),而在于原料資源的限制,誰擁有了紅豆杉資源,誰就擁有了財富.小發(fā)展,大困難。大發(fā)展,. 曼地亞紅豆杉的產(chǎn)業(yè)化,必須首先實現(xiàn)曼地亞紅豆杉種植的產(chǎn)業(yè)化,國際曼地亞紅豆杉發(fā)展論壇會議召開以后,各地政府,瀕危辦紛紛出臺各種支持人工種植曼地亞紅豆杉的政策,比如:積極支持曼地亞紅豆杉種植辦證,將紫杉醇藥品系列納入醫(yī)療保險報銷范圍等!根據(jù)現(xiàn)在全國各地的紅豆杉發(fā)展情況,以及國家的大力支持,預(yù)計5——10年后我國的紫杉醇生產(chǎn)原料基本不用進口,生產(chǎn)廠家也會隨之而擴增,既時誰擁有了資源,誰就擁有了財富.紅豆杉產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,在紫杉醇非常高臨床治愈率的證明下,以及國家的大力支持和引導(dǎo)下,從2006年起將進入一個良性發(fā)展的高峰期!——摘錄《2005版 紫杉醇原料藥研究市場報告》 紅豆杉相關(guān)領(lǐng)域國內(nèi)外發(fā)展形狀與趨勢： 紅豆杉作為具有巨大經(jīng)濟效益和研究價值的藥用植物，在國內(nèi)外已大量的栽培，但其系統(tǒng)的質(zhì)量評價及指紋圖譜研究目前仍是空白。 在紫杉的含量測定方面的研究雖然很多，但大部分都集中測定紫杉醇的含量，而忽略了其他有效成分或可用做合成中間體的成分，而本項目將建立同時測定多個成分的定量分析方法,實現(xiàn)多組分的含量控制。 紫杉醇的分離純化工作開展較早，最早的分離工藝是1996年采用逆流分配色譜法，其歷時兩年，這種工藝十分煩瑣，分離工藝也獲得了很大的改進，收率大為提高,分離時間大大縮短。國外由于占有一定的資源優(yōu)勢，其提取，分離方法較為先進，主要有固相萃取法，超臨界流體萃取法，鮮法勻漿高效提取方法及高效液相色譜法，超臨界流體色譜法，電泳色譜法等提取，分離方法。但這些工藝大都存在的缺點是，收率低，工藝流程長，生產(chǎn)能力小，無法適應(yīng)工業(yè)化生產(chǎn)等特點。國內(nèi)因受資源限制，目前仍處于經(jīng)典溶媒萃取和色譜分離，且大部分提取方法只能應(yīng)用于對樹皮的提取，從枝葉中提取，分離，除雜仍停留在傳統(tǒng)方法，特別是對曼地亞紅豆杉中紫杉烷類和其它成分的分離尚未見報道。因此開發(fā)新的高效特異性的分離方法,對于紫杉醇的提取純化有重要意義。 目前以紫杉醇為原料作為抗癌藥的制劑主要為注射劑和靜脈輸液，如紫杉醇注射液和多西紫杉醇注射液，目前國外已完成的和正在研究的制劑有紫杉醇注射液，多西紫杉醇注射液，紫杉醇粉針劑，紫杉醇脂質(zhì)體注射液，注射用紫杉醇納米粒，納米粒膠體注射液，紫杉醇支架，聚谷氨酸紫杉醇，PEG紫杉醇，紫杉醇DHA，維生素E型紫杉醇乳劑，微膠囊化紫杉醇，紫杉醇吸入劑，紫杉醇植入劑，紫杉醇凝膠劑等多種制劑，國內(nèi)已完成的和正在研究的制劑有紫杉醇注射液，多西紫杉醇注射液，紫杉醇粉針劑，紫杉醇脂質(zhì)體注射液，注射用紫杉醇納米粒以及注射用紫杉肽。從國內(nèi)外研發(fā)狀況來看，國外紫杉類制劑的開發(fā)品種多，并且給藥途徑多樣，除了注射給藥外，正在開發(fā)的有外用制劑，口服制劑以及吸入劑，而國內(nèi)研發(fā)還停留在注射給藥上，對口服給藥以及局部外用透皮給藥制劑的研發(fā)未見報道。因此從制劑角度上來講國內(nèi)對紫杉類相關(guān)制劑的研發(fā)與國外還存在較大的差距。 六、我省現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ) 蘭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院、蘭州大學(xué)化工科學(xué)學(xué)院國家重點實驗室開展了紫杉醇,紫杉烷的提取,分離純化研究；開展了紫杉醇，紫杉烷提取及質(zhì)量評價的部分工作。七、立題必要性 曼地亞紅豆杉基地目前國內(nèi)約近十家，通過對各基地不同采收期，生長環(huán)境植株的抽樣，其結(jié)果顯示紫杉醇含量和其它組分的批間差異非常大,顯然單純采用紫杉醇或某幾個化合物的含量來評價紅豆杉的優(yōu)劣是不合理的。在尋求綜合評價紅豆杉質(zhì)量的過程中，我們自然想到了指紋圖譜技術(shù)。雖然指紋圖譜不能取代含量測定，但是對紅豆杉而言它提供的有關(guān)質(zhì)量的信息卻比單一成分(紫杉醇)的含量更為豐富和更有應(yīng)用價值。指紋圖譜分析作為一種鑒別中藥真?zhèn)渭霸u價質(zhì)量一致性和產(chǎn)品穩(wěn)定性的實際可行的模式，已成為國際上公認(rèn)的控制中藥和天然藥物質(zhì)量的最有效手段。紅豆杉中紫杉烷類化合物標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立將為生產(chǎn)企業(yè)及研究單位評價紅豆杉的質(zhì)量提供全面可靠的依據(jù)，同時也為以紅豆杉為原料的中藥新制劑的研究開發(fā)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定奠定基礎(chǔ)。 隨著研究不斷深入，人們已經(jīng)從各種紅豆杉中分離得到200多種紫杉烷類化合物，而且發(fā)現(xiàn)紅豆杉中除紫杉醇及幾個半合成前體外，還有多個結(jié)構(gòu)相似的紫杉烷類化合物也具有抗癌作用。國內(nèi)已有文獻報道了東北紅豆杉提取物(有效部位)的抗腫瘤活性。在這類有效部位中，各種活性成分相輔相成，有可能產(chǎn)生比任何單一成分更強的作用。為了綜合利用紅豆杉資源，我們也將研制開發(fā)以活性部位制成的各種制劑。此外，紅豆杉中的其他物質(zhì)如紫杉堿具有很好的降血糖作用，可見，將紫杉醇外的其他活性成分棄之不用，是對寶貴的紅豆杉資源的大大浪費。如果對其進行綜合開發(fā)利用，將產(chǎn)生巨大經(jīng)濟效益,具有重大的實際意義。我們針對紫杉醇產(chǎn)業(yè)面臨的產(chǎn)品質(zhì)量差和技術(shù)水平落后，無成熟的提取分離技術(shù)及相應(yīng)工藝標(biāo)準(zhǔn)等問題，開發(fā)了紫杉醇制備工藝。該工藝集成模擬移動床技術(shù)，超聲提取技術(shù)，固相萃取除雜技術(shù)等，突破了限制紫杉醇收率提高的關(guān)鍵單元技術(shù)，簡化了工業(yè)制備步驟，實現(xiàn)了工藝技術(shù)和生產(chǎn)方式創(chuàng)新。采用此分離系統(tǒng)，%。與現(xiàn)有公開的國內(nèi)外專利工藝相比，紫杉醇的回收率，產(chǎn)率明顯提高，且工藝穩(wěn)定,質(zhì)量可控，各種原料耗材等成本比國內(nèi)現(xiàn)有工藝下降1/3～1/，可綜合利用資源，提高經(jīng)濟效益，將為我國成為全球紫杉醇類原料藥生產(chǎn)基地奠定基礎(chǔ)。 在制劑研究方面我們以曼地亞紅豆杉提取所得紫杉烷類成分為原料,開發(fā)各種適用于臨床的劑型如注射液，凍干粉針等，以滿足市場需求，同時為了縮小與國外制劑上的差距，本項目以曼地亞紅豆杉提取的紫杉醇為原料進行紫杉醇外用制劑的研究與開發(fā),用來治療皮膚癌,銀屑病,該制劑在國外已進入Ⅱ期臨床研究，在國內(nèi)尚無該制劑的研發(fā)，因此開發(fā)此制劑是可行的。另外針對紫杉醇的抗癌作用機制，擬篩選和開發(fā)不同配比紫杉醇：紫杉烷類新的活性部位的復(fù)方制劑，以降低紫杉醇毒性，提高其生物利用度。 總之，建立紅豆杉中紫杉醇及紫杉烷類化合物質(zhì)量評價體系，如何更好地利用紅豆杉資源，開發(fā)新的紅豆杉的制劑品種，開發(fā)新用途，已變得急為緊迫。通過本項目的研究,采用指紋圖譜的方式來表征紅豆杉中的紫杉烷類整體抗癌活性成分，會使其更加的直觀和量化，采用新的提取，分離，,有可能開發(fā)比單一成分活性更強的抗癌藥物或其他用途的藥物，也將帶來巨大的經(jīng)濟效益。該項目研究建立的紫杉烷類化合物指紋圖譜，將廣泛地應(yīng)用于紅豆杉質(zhì)量評價彌補了我國在紫杉研究方面的一個空白，并且對于保證紅豆杉GAP基地的藥材質(zhì)量,擴大曼地亞紅豆杉資源以及合理綜合利用紅豆杉資源都有著十分重要的意義,將會產(chǎn)生重大的經(jīng)濟效益和社會效益。 八、項目研究的技術(shù)路線: 提取技術(shù)路線: 紅豆杉—超聲提取—固相萃取除雜—常規(guī)分離—模擬移動床—半合成(或酶解)模擬移動床(或常規(guī)分離)紫杉醇,多烯紫杉醇,紫杉烷類單體成分,紫杉烷組分。 制劑技術(shù)路線: 資料檢索,方案設(shè)計—制劑工藝配比研究(小試研究。中試放大及穩(wěn)定性考察)—動物藥理,毒理研究—臨床研究 質(zhì)量評價技術(shù)路線:資料檢索樣品采集研究方法制定(紅豆杉樣品提取分離,紫杉醇及紫杉烷類化合物含量測定方法和高效液相色譜指紋圖譜檢測方法的建立)方法學(xué)驗證樣品檢測相應(yīng)信息進行數(shù)字化處理—繪制標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜—制定樣品的農(nóng)殘,重金屬檢測方法—實驗整體復(fù)核實驗總結(jié)成果申報。 九、實施進度初步計劃: 我公司將從2006年3月起對此項目進行實施，預(yù)計在2008年11月底完成，2009年夏秋季即可陸續(xù)回收符合質(zhì)量要求的紅豆杉枝葉。2006年春季，我公司完成了與當(dāng)?shù)劓?zhèn)政府的土地租賃工作，同時，完成了當(dāng)?shù)亓謽I(yè)部門的立項工作、完成當(dāng)?shù)亓謽I(yè)部門逐級上報省級林業(yè)部門和國家林業(yè)局的工作。2006年秋季，在基地門口通向基地的路進行拓寬、平整，把基地里面大面積進行平整。我公司有花費了大量的財力對野生紅豆杉扦插育苗進行試驗。2007年春季，我公司申報的紅豆杉項目及采集野生紅豆杉枝條經(jīng)國家林業(yè)局和中國林科院專家來甘肅考察后批準(zhǔn)，并頒發(fā)了甘肅省建國以來第一個野生珍稀植物采集證。經(jīng)過一年多的等待和努力后，甘肅省天水紅豆杉示范基地項目終于正式上馬。為了保證將來的紅豆杉產(chǎn)業(yè)能夠良性地進入一個發(fā)展階段，甘肅綠瑩環(huán)境技術(shù)工程有限公司高層領(lǐng)導(dǎo)早已把紅豆杉種植與生物工程緊緊聯(lián)系起來，因為紅豆杉本身除了現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)有神奇的治療癌癥之外，還有治療許多種頑固病方法有待研究開發(fā)。從2005年到2007初，公司種植技術(shù)人員發(fā)現(xiàn)紅豆杉枝葉經(jīng)過浸泡和煎熬，對治療頑性咽炎治療效果非常好，在過去的兩年的時間里，公司總送出約300例配好的藥方，治愈率達90%