《smarter技術(shù)介紹》ppt課件-文庫吧
2025-01-04 19:31 本頁面
【正文】 SMARTTM 技術(shù)SMARTTemplateRNASwitchingMechanismAt the end ofMay 15, 2022 10 末端轉(zhuǎn)移酶活性自動轉(zhuǎn)換模板功能 SMARTScribeTM 反 轉(zhuǎn)錄酶?SMARTerTM (SMARTTM)技術(shù)介紹11 ?SMARTerTM 技術(shù)概要? 獲得更長的第一鏈 cDNA? 靈敏性更高? 提高 PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量SMARTScribeTM 逆轉(zhuǎn)錄酶? 可進行 poly A— RNA的 5’RACE實驗升級版SMARTer II A oligoSMARTer RACE Kits包含隨機引物May 15, 2022 11 ?SMARTerTM (SMARTTM)技術(shù)介紹12 ?圖 1. SMARTScribeTM RT 獲得更長的第一鏈 cDNA 。polyA+ RNA 為模板。SMARTScribeTM RT— 合成更長的第一鏈 cDNAMay 15, 2022 12 ?SMARTerTM (SMARTTM)技術(shù)介紹13 ?SMARTScribeTM RT— 獲得最長 kb的片段May 15, 2022 13 ?SMARTerTM (SMARTTM)技術(shù)介紹14 ?圖 2. 利用 SMARTScribe RT 和合成的 RNA 為模板進行 RTPCR分析。合成的 RNA模板進行一系列的梯度稀釋后，樣品中含有 105 10RNA的拷貝。在的 RNA模板中添加 50 ng 的HeLa 細胞總 RNA，以增加模板的復(fù)雜度。使用 Advantage174。 2 DNA Polymerase Mix合成第二鏈 。 36個循環(huán)后獲得 350bp片段。SMARTScribeTM RT— 靈敏度高Lane M: 100bp DNA size marker.SMARTScribe RT可以從低至 10個 RNA拷貝中合成第一鏈 cDNA。May 15, 2022 14 ?SMARTerTM (SMARTTM)技術(shù)介紹15 ?May 15, 2022Title of the Presentation can go here15 SMARTer RACE1. 步驟簡單（就是 RT+PCR）。2. 不用純化核酸 ，降低降解幾率，獲得更長序列3. 起始模板量小， 50ng total RNA即可，低至 10ng。也無需用 DNase來處理 RNA。4. 抑制性 PCR設(shè)計 ，有效抑制非特異性擴增及單引物擴增。5. 應(yīng)用 SMART技術(shù)，發(fā)高因子 paper。6. 5’RACE、 3’RACE都能做。富集 5’端，產(chǎn)物更好分析。7. 可以對 無 polyA尾 的樣品進行 RACE。SMARTerTM 技術(shù) 優(yōu)勢?SMARTerTM (SMARTTM)技術(shù)介紹16 ?May 15, 2022 16 3 Clontech試劑盒?SMARTerTM (SMARTTM)技術(shù)介紹17 ? SMARTerTM技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品SMARTerTMRACE合成更長 cDNA合成芯片用熒光探針新一代測序線性擴增mRNA構(gòu)建cDNA文庫May 15, 2022 17 ?SMARTerTM (SMART
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