紫外可見(jiàn)吸光光度法及分子熒光分析法-文庫(kù)吧
2025-01-02 13:06 本頁(yè)面
【正文】 光的偏振 光的干涉 光電效應(yīng) 一定 波長(zhǎng) （頻率）的 光 具有一定的 能量 E=hv=hc/ ? 3 物質(zhì)對(duì)光選擇吸收 11 物質(zhì)對(duì)光選擇吸收的實(shí)質(zhì)： 物質(zhì)原子或分子 的 核外電子能級(jí) 不同，只能 吸收 能量 與其能級(jí)差相匹配 的 波長(zhǎng)的光 。 原子 對(duì)光的吸收 物質(zhì)對(duì)光的吸收滿足條件： ??hchEEE ?????02h? S2 S1 S0 S3 E2 E0 E1 E3 12 吸收光譜 Absorption Spectrum 原子 純 電子能態(tài) 間躍遷 S2 S1 S0 S3 h? E2 E0 E1 E3 S2 S1 S0 h? A ? 分子 核外電子躍遷 帶狀光譜 銳線光譜 ? A 吸光度 紫外 可見(jiàn)光區(qū)產(chǎn)生吸收的 分子結(jié)構(gòu) 中必須有 共軛 π鍵或雜原子（生色團(tuán)和助色團(tuán)） 14 300 400 500 600 700 ?/nm 350 525 545 Cr2O72 MnO4 Absorbance 350 最大吸收波長(zhǎng) λmax： 最大吸收峰對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng) Cr2O7 MnO4的特征 吸收光譜 15 吸收光譜法 定性分析與定量分析的基礎(chǔ) 定性 分析基礎(chǔ) 定量 分析基礎(chǔ) 物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收 A B A ? )(max A? )(max B?在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，物質(zhì)對(duì)光的吸收與物質(zhì)的濃度成正比。 A ? C 增大 ?0 16 4 溶液的吸光定律 透 光率 （透射比） Transmittance 透光率定義： 0IIT t?T 取值為 % ~ % 全部吸收 T = % 全部透射 T = % 入射光 I0 透射光 It 17 Lambert – Beer 光 吸收定律： 當(dāng)一束平行單色光通過(guò)均勻的樣品時(shí)，其吸光度與吸光組分的濃度、吸收池的厚度乘積成正比 . CLIIAt??? 0lgCLAT ???? lgCLtIIT ???? 100入射光 I0 透射光 It 如何測(cè)定吸光度（光強(qiáng)）？ L C 思考：如何獲得單色光？單色光的 波長(zhǎng) 如何選擇？ 或 18 吸光度 （ Absorbance） 與透光率的關(guān)系 ACLT ??? ?lgT ： 透光率 A： 吸光度 0 A C A 100 50 0 T % T CLAT ??? ?? 1010T = % A = ∞ T = % A = A = T = % 吸光度適宜的取值范圍： ~ 19 吸光系數(shù) ε CLA ??L ：吸光液層的厚度，光程， cm C： 吸光物質(zhì)的濃度， g / L, mol / L ε ：比例常數(shù) 入射光波長(zhǎng) 物質(zhì)的性質(zhì) 溫度 取值與濃度的單位相關(guān) c： mol / L 摩爾吸收系數(shù)， L mol –1 cm 1 c： g / L 質(zhì)量吸收系數(shù)， L g –1 cm 1 CLA ??a C LA ?aM??相互關(guān)系： M為摩爾質(zhì)量 ? 越大 , 靈敏度越高 : ? 104 為低靈敏度 。 104～ 105 為中等靈敏度 。 ? 1
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