動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果分析-文庫(kù)吧
2024-12-23 23:05 本頁(yè)面
【正文】 提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確度，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果能在同一個(gè)體或不同個(gè)體中穩(wěn)定地重復(fù)出來(lái)。 9 （四）一致性原則 一致性原則是指在實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組除了處理因素不同外 ， 非處理因素基本保證均衡一致 。 均衡一致是處理因素具有可比性的基礎(chǔ) 。 非處理因素： 實(shí)驗(yàn)對(duì)象：動(dòng)物品系 、 體重 、 年齡 、 性別 、 實(shí)驗(yàn)條件：飼料和飼養(yǎng)方式 、 實(shí)驗(yàn)環(huán)境：實(shí)驗(yàn)室溫度 、 濕度 、 氣壓 、 季節(jié) 實(shí)驗(yàn)時(shí)間： 藥品：藥物廠商 、 批號(hào) 、 純度 、 劑型 、 劑量 、 注射容量和速度 、 酸堿度 、 溫度 、 給藥途徑和給藥順序 儀器 、 設(shè)備：儀器種類 、 型號(hào) 、 靈敏度 、 精確度 、 零點(diǎn)漂移 、 電壓穩(wěn)定性 操作人員：操作步驟熟練程度 10 (五 )客觀性原則 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中要力戒主觀偏性干擾，選擇觀察指標(biāo)時(shí)，不用或盡量少用帶主觀成分的指標(biāo)。結(jié)果判斷要客觀，更不能以主觀的意愿對(duì)結(jié)果或數(shù)據(jù)作任意的改動(dòng)和取舍。 如中醫(yī)辨證“氣虛”癥狀為面色晃白，頭暈?zāi)垦＃贇鈶醒?，神疲乏力，甚則暈厥。在大小鼠辯證中可用自發(fā)活動(dòng)儀記錄小鼠的自發(fā)活動(dòng)情況、舌苔顏色可用拍照和與標(biāo)準(zhǔn)色卡對(duì)比記錄，并與正常對(duì)照組比較。 11 三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容 （一）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)前應(yīng)考慮的問(wèn)題 1．動(dòng)物福利和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理問(wèn)題 在進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)前，實(shí)驗(yàn)者必須思考： ① 這個(gè)實(shí)驗(yàn)是否一定要用動(dòng)物才能達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康模渴欠窨捎闷渌囼?yàn)方法來(lái)代替？ ② 如果實(shí)驗(yàn)必須要在動(dòng)物身上進(jìn)行，那么應(yīng)該如何善待動(dòng)物，在實(shí)驗(yàn)中減輕動(dòng)物的痛苦和不安？ 實(shí)驗(yàn)者必須提出令人信服的理由證明這個(gè)實(shí)驗(yàn)必須要用動(dòng)物做，而且在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中采取了善待動(dòng)物和減輕動(dòng)物痛苦的具體措施，并承諾本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法和目的符合人類的道德倫理標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)際慣例，在動(dòng)物試驗(yàn)期間遵守有關(guān)的法規(guī)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理福利原則和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度。 12 2．實(shí)驗(yàn)條件問(wèn)題 實(shí)驗(yàn)者必須了解進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)的所有條件是否均已具備，如相應(yīng)的動(dòng)物設(shè)施、動(dòng)物來(lái)源、儀器設(shè)備、試劑、人員、技術(shù)熟練程度等，這些實(shí)驗(yàn)條件的描述將充分體現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)方案中。 3．經(jīng)費(fèi)預(yù)算問(wèn)題 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是需要經(jīng)費(fèi)支持的，一般來(lái)說(shuō)，同一課題經(jīng)費(fèi)不同，所選擇的實(shí)驗(yàn)條件會(huì)不同，研究的層次也會(huì)不同。本著節(jié)約經(jīng)費(fèi)的原則，有多少經(jīng)費(fèi)做多少事情，量入為出。特別注意的是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)發(fā)生很多不可預(yù)見(jiàn)的意外，增加額外的經(jīng)費(fèi)。充分估計(jì)到各種情況就能保證實(shí)驗(yàn)方案的順利實(shí)施。 13 （二）實(shí)驗(yàn)方案的制定 一個(gè)完整的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案應(yīng)包括以下內(nèi)容： 1．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬、品種品系、性別、年齡（體重）的選擇 2．實(shí)驗(yàn)組數(shù)的確定 3．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì)的基本類型 ① 單組比較設(shè)計(jì) ② 完全隨機(jī)化設(shè)計(jì) ③ 隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì) ④ 配對(duì)設(shè)計(jì) 14 4．每組樣本量的確定 每組的樣本量反映了同一處理的重復(fù)個(gè)數(shù)。樣本量過(guò)小，抽樣誤差大，不易發(fā)現(xiàn)實(shí)際存在的差異，得不出統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的結(jié)論；樣本量過(guò)大，不符合動(dòng)物福利的原則，也浪費(fèi)人力、物力和財(cái)力。一般情況下嚙齒類大小鼠實(shí)驗(yàn)分組每組 1020只，雌雄各半即可滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的要求。大動(dòng)物如兔、犬和豬的實(shí)驗(yàn)一般每組 610只。 一般來(lái)說(shuō)，各組樣本量相等時(shí)，統(tǒng)計(jì)效率最高。在實(shí)際工作中，因一批動(dòng)物中個(gè)別不均一性而剔出、實(shí)驗(yàn)人員操作技術(shù)不熟練或技術(shù)復(fù)雜、高劑量組因毒性的不確定等而在實(shí)驗(yàn)中致動(dòng)物死亡等的情況屢有發(fā)生，因而實(shí)際使用的動(dòng)物數(shù)量應(yīng)比理論計(jì)算的樣本量要適當(dāng)增加。 15 5．實(shí)驗(yàn)處理方法和指標(biāo)的選定 實(shí)驗(yàn)處理包括處理因素、處理時(shí)間、次數(shù)、強(qiáng)度（劑量）、途徑等，這些都要在實(shí)驗(yàn)方案中確定下來(lái)。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指標(biāo)一般包括兩部分：試驗(yàn)期間活體觀察指標(biāo)和實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死解剖觀察取材測(cè)試指標(biāo)。 試驗(yàn)期間活體觀察指標(biāo) 包括一般觀察、無(wú)創(chuàng)傷性測(cè)定指標(biāo)和創(chuàng)傷性測(cè)定指標(biāo)。一般觀察包括動(dòng)物的精神、行為、營(yíng)養(yǎng)、被毛、攝食情況、大小便及口鼻耳陰部分泌物等 ,一般無(wú)需驚動(dòng)動(dòng)物；無(wú)創(chuàng)傷性測(cè)定指標(biāo)包括心電圖、血壓、呼吸、自主活動(dòng)等測(cè)試，有的需要無(wú)線遙控設(shè)備。無(wú)線遙控?zé)o創(chuàng)傷觀察測(cè)試可避免干擾動(dòng)物，減少動(dòng)物應(yīng)激，因而測(cè)試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠。創(chuàng)傷性測(cè)定指標(biāo)包括手術(shù)、取血取材等，對(duì)動(dòng)物長(zhǎng)期觀察忽多忽少產(chǎn)生影響。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要考慮研究團(tuán)隊(duì)有無(wú)技術(shù)基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)條件，以及評(píng)估創(chuàng)傷性試驗(yàn)對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死解剖觀察取材 測(cè)試涉及到麻醉、取全血 /血漿 /血清、臟器稱重、病理組織取材及固定等一系列步驟，可依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測(cè)指標(biāo)選擇部分或全部進(jìn)行。 16 由于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)幾乎涉及到基礎(chǔ)和臨床各個(gè)學(xué)科，不同的研究有不同的目的和要求，所用的試驗(yàn)方法、儀器設(shè)備和指標(biāo)也各不相同，但無(wú)論選擇何種實(shí)驗(yàn)方法，均應(yīng)力求做到以下幾點(diǎn)： (1) 可靠性 ：
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