dna的生物合成復制-文庫吧
2024-12-22 14:23 本頁面
【正文】 解鏈方向連續(xù)延長，稱為 隨從鏈 。 復制中不連續(xù)片段稱為 岡崎片段 (okazaki fragment)。 領頭鏈連續(xù)復制而隨從鏈不連續(xù)復制，就是復制的 半不連續(xù)性 。 A： DNApol的外切酶活性切除錯配堿基；并用其聚合活性摻入正確配對的底物。 B：堿基配對正確， DNApol不表現(xiàn)活性。 DNApolⅠ 外切活性 聚合活性 A G A: C G B: 5/ 3/ 5/ 3/ 無活性 (五 )復制的高保真性 a) DNA聚合酶靠其大分子結構協(xié)調非共價 (氫鍵 )與共價鍵 (磷酸二酯鍵 ) 的有序形成。 b) 嘌呤的化學結構能形成順式和反式構型，與相應的嘧啶形成氫鍵配對，嘌呤應處于 反式構型 。 a) 遵守嚴格的堿基配對規(guī)律。 b) 聚合酶在復制延長時對堿基的選擇功能。 c) 復制出錯時 DNApol的及時校讀功能。 N N 9 PR N H H N N 6 順式 N N 9 RP N H H N N 6 反式 二、 DNA復制的體系 (一 ) 底物 (substrate) dATP, dGTP, dCTP, dTTP。 (二 ) 模板 (template) 解開成單鏈的 DNA母鏈。 (三 ) 引物 (primer) 提供 3?OH末端使 dNTP可以依次聚合的 RNA(DNA)片斷。 (四 ) 酶和蛋白因子 全稱為 依賴 DNA的 DNA聚合酶 (DNAdependent DNA polymerase)， 簡稱 DNApol。 (1)活性： 5??3? 的聚合活性 ； 3? ? 5?外切酶活性 能辨認錯配的堿基對，并將其水解； 5? ? 3?外切酶活性 能切除突變的 DNA片段。 5180。 A G C T T C A G G A T A ? 3180。 | | | | | | | | | | | 3180。 T C G A A G T C C T A G C G A C 5180。 ? 大腸桿菌 DNA聚合酶 分類 DNA聚合酶 I DNA聚合酶 II DNA聚合酶 III 分子量 (KD) 109 120 900 聚合速率 (核苷酸 /分 ) 1 000 — 60 000 5ˊ → 3 ˊ 聚合酶活性 + + + 3ˊ → 5 ˊ 外切酶活性 + + + 5ˊ → 3 ˊ 外切酶活性 + — — 生物學功能 切除引物 延長岡崎片段 DNA損傷修復 延長子鏈 校讀作用 校讀作用 DNA損傷修復 (2)原核生物的 DNA聚合酶 DNApol Ⅰ DNApol Ⅱ DNApol Ⅲ ① DNApolⅠ (109kD) 小片段 5? ? ??核酸外切酶活性 大片段 /Klenow 片段 DNA聚合酶活性 ， ?? ? 5? 核酸外切酶活性 N 端 C 端 木瓜蛋白酶 DNApol Ⅰ Klenow片段是實驗室合成 DNA的常用工具酶。 功能 :對復制中的錯誤進行校讀，對復制和修復中出現(xiàn)的空隙進行填補。 ② DNApol Ⅱ (120kD) DNApol II基因發(fā)生突變，細菌依然能存活。它參與 DNA損傷的應急狀態(tài)修復。 功能： 是原核生物復制延長中真正起催化作用的酶 。 ③ DNApol Ⅲ (250kD) (3)真核生物的 DNA聚合酶 填補引物 空隙，切 除修復， 重組 延長子
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