crisprcas9技術(shù)的原理及應(yīng)用-文庫(kù)吧
2025-09-08 16:05 本頁(yè)面
【正文】 R associated）： ? 存在于 CRISPR位點(diǎn)附近，是一種雙鏈 DNA核酸酶，能在 guide RNA引導(dǎo)下對(duì)靶位點(diǎn)進(jìn)行切割。它與 Folk酶功能類似，但是它并不需要形成二聚體才能發(fā)揮作用。 Cas9 CRISPRCas系統(tǒng)靶向要求 最主要的要求： PAM（ protospaceradjacent motif）為 NGG。 人類基因組中，平均 8bp即可出現(xiàn)一個(gè) PAM Cas9技術(shù)的應(yīng)用 ? 基因打靶 ? 激活表達(dá) ? 抑制表達(dá) 基因打靶 通過特異性 RNA序列（ gRNA for Cas9） ,引導(dǎo)核酸內(nèi)切（ endonuclease）在靶基因處切割，引起靶基因產(chǎn)生 DSB（雙鏈缺口），機(jī)體修復(fù) DSB的方式有兩種 :NHEJ， HDR。 NHEJ用于 Cas9 KO項(xiàng)目， HDR用于 Cas9CKO,KI項(xiàng)目 基因敲除 Knockout 基因敲除 Knockout 通過 sgRNA引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶 Cas9在靶基因處產(chǎn)生 DSB（雙鏈缺口），機(jī)體以NHEJ修復(fù) DSB損傷，修復(fù)會(huì)產(chǎn)生 indel，從而使目的基因移碼造成基因功能缺失。 基因敲除新技術(shù)： Cas9 ? 經(jīng)典敲除（ Kn
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1