【正文】 的研究和生產(chǎn)，促進(jìn)我國生物制藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，提高國際競爭力。 生物技術(shù)是四大高新技術(shù)之一，二十一世紀(jì)將是生命科學(xué)的世紀(jì)，而生物技術(shù)則是生命科學(xué)的核心。以生物技術(shù)為手段的生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)是二十一世紀(jì)的朝陽產(chǎn)業(yè)，具有廣闊的發(fā)展前景。許多國家把發(fā)展生物技術(shù)作為重大的國家需求，從戰(zhàn)略的 高度積極促進(jìn)其發(fā)展。如美國對(duì)生物技術(shù)的研發(fā)投入已達(dá)到國內(nèi)總產(chǎn)值的 %，生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的產(chǎn)值在國內(nèi)總產(chǎn)值中的比重也迅速上升。 隨著中國加入 WTO，國外制藥企業(yè)將大量涌入中國藥品市場，中國民族制藥工業(yè)面臨新的挑戰(zhàn)。經(jīng)濟(jì)領(lǐng)域的競爭最終歸結(jié)于科學(xué)技術(shù)的競爭，因此，創(chuàng)新產(chǎn)品的研制及產(chǎn)業(yè)化開發(fā)已經(jīng)成為中國生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)及其他高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展的當(dāng)務(wù)之急和必然趨勢(shì)。開發(fā)并生產(chǎn)創(chuàng)新藥物是一個(gè)國家醫(yī)藥創(chuàng)新能力和水平的體現(xiàn)，也是知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)、醫(yī)藥產(chǎn)品市場國際化和發(fā)展民族醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的需要。 生物醫(yī)藥是當(dāng)今高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域中最具發(fā)展前 景的產(chǎn)業(yè)之一，產(chǎn)品涉及預(yù)防、醫(yī)療、診斷等領(lǐng)域。一批具有重要生理功能和藥理作用的生物技術(shù)產(chǎn)品癥逐步成為藥品進(jìn)入市場，形成一個(gè)新興的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)。本項(xiàng)目技術(shù)已達(dá)到國際先進(jìn)水平，在臨床方面更是處于國際領(lǐng)先水平。因此，實(shí)施本項(xiàng)目搶占生物制藥行業(yè)的制高點(diǎn)，將有助于提升我國的生物制藥行業(yè)的國際競爭力。 . 為患者提供療效顯著、安全可靠的藥物，促進(jìn)人類健康 第 13 頁 共 53 頁 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子是一種很強(qiáng)的絲裂原，具有促進(jìn)各種軟組織損傷修復(fù)的作用，可用于創(chuàng)傷、燒傷、潰瘍等的治療，能明顯縮短療程和改善與和質(zhì)量；他可以促進(jìn)毛細(xì)血管的生長分 化和側(cè)枝循環(huán)的建立，有利于改善局部血液循環(huán)，參與胃潰瘍的愈合過程以及參與心肌缺血與心肌梗塞的修復(fù)過程；他可以促進(jìn)神經(jīng)組織再生，加速神經(jīng)損傷修復(fù)。因此，本項(xiàng)目的建設(shè)實(shí)施將為擴(kuò)大燒傷、創(chuàng)傷及潰瘍患者提供療效顯著、安全可靠的治療藥物，促進(jìn)人類的健康水平。 . 加快高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)化和產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整及優(yōu)化 本項(xiàng)目所在的廣東省佛山市地處珠江三角洲平原核心地帶，具有明顯的區(qū)位優(yōu)勢(shì)。改革開放以來，佛山市迅速完成了工業(yè)化所需的資本原始積累，并形成了多個(gè)極具特色的產(chǎn)業(yè)族群，由此帶動(dòng)了地方經(jīng)濟(jì)的快速增長。但毋庸置疑的是，這個(gè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)以輕 型、勞動(dòng)密集型為主，同時(shí)面臨附加值不高、市場競爭激烈和發(fā)展后勁不足等問題。 產(chǎn)業(yè)結(jié)果狀況是一個(gè)地區(qū)經(jīng)濟(jì)實(shí)力和總體競爭力的重要載體。要促進(jìn)經(jīng)濟(jì)更加快速有效的發(fā)展，必須這里抓好產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整。這是佛山打造廣東第三大城市，實(shí)現(xiàn)經(jīng)濟(jì)騰飛的關(guān)鍵。從產(chǎn)業(yè)基礎(chǔ)和市場情景看，重點(diǎn)發(fā)展電子信息、新材料、光機(jī)電一體化、生物醫(yī)藥和機(jī)械裝備等高增長、高帶動(dòng)的產(chǎn)業(yè)，將可以在較短的時(shí)間內(nèi)建立起產(chǎn)業(yè)規(guī)模和競爭能力。 本產(chǎn)業(yè)化項(xiàng)目集科研、開發(fā)、生產(chǎn)于一體，將填補(bǔ)該地區(qū)生物制藥產(chǎn)業(yè)的空白，并為廣東省或省外高校、研究機(jī)構(gòu)和企業(yè)進(jìn)行基因藥物的研究 和實(shí)施產(chǎn)業(yè)化提供技術(shù)平臺(tái)。同時(shí)促進(jìn)國內(nèi)生物技術(shù)創(chuàng)新性藥物的研究開發(fā)，加快生物工程藥物產(chǎn)業(yè)化，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)優(yōu)化調(diào)整。 第 14 頁 共 53 頁 綜上所述，將這一成熟、先進(jìn)的高新技術(shù)成果應(yīng)用到規(guī)模生產(chǎn)中，時(shí)非常重要的。 3. 項(xiàng)目具體內(nèi)容及研究方案 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）產(chǎn)業(yè)化主要研究內(nèi)容、擬解決的技術(shù)難點(diǎn) bFGF 是一種多功能細(xì)胞生長因子，能刺激中胚層和神經(jīng)外胚層來源細(xì)胞的增殖，并具有促進(jìn)修復(fù)和再生的作用。十多年來 bFGF 在臨床上應(yīng)用于治療創(chuàng)傷、燒傷、慢性潰瘍等方面起到非常好的治療作用。本項(xiàng)目來源于國家 863 計(jì)劃，已經(jīng) 完成臨床和中試，并獲得國家一類新藥證書及藥品生產(chǎn)文號(hào)，生產(chǎn)技術(shù)與工藝比較成熟，產(chǎn)業(yè)化研究的內(nèi)容主要是大規(guī)模生產(chǎn)的工藝穩(wěn)定性、成本控制、質(zhì)量控制，重點(diǎn)需解決的問題如下： . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）與其他細(xì)胞生長因子相比，發(fā)酵條件比較難以控制，常因 pH值等變化導(dǎo)致細(xì)菌不生長或無表達(dá)，本項(xiàng)目的重點(diǎn)工作之一是摸索大規(guī)模發(fā)酵的條件，如細(xì)菌接種量、溶氧、攪拌轉(zhuǎn)速等工藝參數(shù)，建立細(xì)菌 OD 值、誘導(dǎo)時(shí)間與目的蛋白表達(dá)量的關(guān)系曲線，確定最優(yōu)發(fā)酵的條件。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）是相對(duì)不穩(wěn)定 蛋白，分離純化及稀釋過濾過程中容易出現(xiàn)聚合或者降解，導(dǎo)致純度或活性等不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，所以在制備過程中重點(diǎn)提高目的蛋白穩(wěn)定性。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）的活性受溫度和水分含量的影響較大，因此，在凍干過程中重點(diǎn)需要考察不同溫度與凍干時(shí)間對(duì)水分含量與活性的影響，以選擇最適當(dāng)?shù)臏囟群蛢龈蓵r(shí)間，使凍干粉的水分含量低于 3%， 第 15 頁 共 53 頁 且活性受到的影響降到最低。 由于重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）屬于不穩(wěn)定活性多肽，容易聚合和降解而導(dǎo)致生物活性降低，解決上述問題之后將為這一類蛋白的制備提供參考，建 立解決蛋白類藥物普遍存在的“瓶頸”技術(shù)平臺(tái)。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）系列制劑的研究內(nèi)容、擬解決的技術(shù)難點(diǎn) 由于重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）是多功能刺激因子，對(duì)與創(chuàng)傷修復(fù)有關(guān)治病有廣泛治療作用，但由于其生物活性受多種因素的影響而不穩(wěn)定。凍干粉劑能夠使其活性長期保存，在 2~8℃保存時(shí)有效期為 24 個(gè)月；但是凍干粉劑在臨床應(yīng)用上存在使用不方便等問題，迫切需要其他劑型來取代；因此，開發(fā)經(jīng)過改構(gòu)或化學(xué)修飾的生物活性穩(wěn)定的重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）并用之于新劑型的開 發(fā)極為必要。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）凝膠劑的研究內(nèi)容、擬解決的技術(shù)難點(diǎn) 凝膠劑是近幾年局部外用制劑研發(fā)的熱點(diǎn)， 凝膠劑作為新的藥物劑型在臨床上應(yīng)用已經(jīng)得到肯定，但由于技術(shù)原因蛋白質(zhì)類凝膠劑并不多見， 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）凝膠劑 尚未上市。 . 主要研究開發(fā)內(nèi)容 . 凝膠劑處方、穩(wěn)定性、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 . 凝膠劑 300 例 Ⅲ 期臨床試驗(yàn)，重點(diǎn)與凍干粉比較觀察對(duì)新鮮創(chuàng)面的療效。 . 脂質(zhì)體配方；凝膠劑生物活性保護(hù)劑與 bFGF 的穩(wěn)定性和生物活性的研 第 16 頁 共 53 頁 究；多種藥效成分的協(xié)同性研究。 . 脂質(zhì)體凝 膠劑的制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制，凝膠劑的生產(chǎn)工藝，樣品的制備和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的控制，穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。 . 脂質(zhì)體凝膠劑的臨床前藥理毒理實(shí)驗(yàn) 。 . 技術(shù)創(chuàng)新點(diǎn) . 凝膠劑加入可與 bFGF 特異結(jié)合的肝素，以增強(qiáng) bFGF 與受體的結(jié)合能力，并增強(qiáng)對(duì)酸、堿、熱等因素的抗性，加入肝素后，生物學(xué)活性提高至少 2倍，提高了產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 . 凝膠劑處方中的卡波姆和透明質(zhì)酸的合理配比使其兼具緩釋和保濕功能。 . 脂質(zhì)體主要由天然磷脂和膽固醇組成，進(jìn)入體內(nèi)后可被生物降解，不會(huì)積累在體內(nèi)，且免疫原性小。重組人 bFGF 包埋在脂質(zhì)體內(nèi)，從脂質(zhì)體中緩慢釋放，使藥效持續(xù)較 長時(shí)間。通過細(xì)胞內(nèi)吞和融合作用，脂質(zhì)體可直接將藥物送入細(xì)胞內(nèi)，避免使用高濃度游離藥物。 . 凝膠劑作為脂質(zhì)體局部給藥的載體，可在脂質(zhì)體周圍形成一道屏障控制脂質(zhì)體中藥物釋放的速率，避免藥物的突釋效應(yīng)，同時(shí)凝膠劑手感細(xì)膩，易清洗。 . 擬解決的技術(shù)難點(diǎn) . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）與肝素的結(jié)合比例將影響到其生物活性，因此，通過實(shí)驗(yàn)摸索其與肝素結(jié)合的最佳比例將成為該劑型開發(fā)的重點(diǎn)工作之一。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）通過包埋于脂質(zhì)體中，將 第 17 頁 共 53 頁 極大的提高其穩(wěn)定性，同時(shí)延長其給藥時(shí)間，提高療效。 因此，脂質(zhì)體包埋技術(shù)將是該劑型開發(fā)的另一重點(diǎn)難點(diǎn)技術(shù)。 . 該劑型目前研究進(jìn)展 . 已經(jīng)完成了臨床前的研究，初步確定了該劑型的處方和生產(chǎn)工藝，確定了與肝素的結(jié)合比例，解決了其脂質(zhì)體包埋技術(shù)。 . 已經(jīng)獲得了臨床批件，已經(jīng)完成了Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)，目前正在進(jìn)行Ⅲ期臨床試驗(yàn)。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）滴眼劑的研究內(nèi)容、擬解決的技術(shù)難點(diǎn) 眼表疾病是我國最主要和最常見的致盲眼病之一，該病病因復(fù)雜，治療棘手，常因診治延誤導(dǎo)致愈合延遲或者不愈合，甚至致盲。重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）作用于眼表病變 部位，可激活調(diào)控與修復(fù)有關(guān)細(xì)胞的增殖、移行，促進(jìn)細(xì)胞代謝、改善營養(yǎng)，主動(dòng)促進(jìn)修復(fù)，加速愈合。 . 主要研究開發(fā)內(nèi)容 . 滴眼劑的處方： 采用 MTT 法分別考察所用輔料對(duì) bFGF 穩(wěn)定性和生物活性的影響；采用正交試驗(yàn)考察藥效成分與輔料之間的協(xié)同性研究。 . 滴眼液的制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制： 通過試驗(yàn)確定常規(guī)制備方法是否能滿足滴眼劑外觀形狀的要求；采用澄明度檢測儀檢測澄明度，并進(jìn)行無菌檢測；參照凍干粉劑的檢定規(guī)程，摸索滴眼劑的活性測定方法。 . 滴眼劑的臨床前研究： 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)；毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)；藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。 . 擬解決的技術(shù)難點(diǎn) . 重組人堿性成纖維細(xì) 胞生長因子（ rhbFGF）是不穩(wěn)定的活性多肽，需 第 18 頁 共 53 頁 要通過大量的結(jié)構(gòu)和功能研究確定突變點(diǎn)，構(gòu)建一株高效表達(dá)的工程菌。 . 尋找新型的賦形劑、保護(hù)劑、以解決滴眼劑的活性穩(wěn)定性及刺激性問題。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）外用溶液的研究內(nèi)容、擬解決的技術(shù)難點(diǎn) . 主要研究內(nèi)容 . 外用溶液的處方： 采用 MTT 法分別考察所用輔料、試劑對(duì) rhbFGF 的穩(wěn)定性和生物活性的影響；采用正交及均勻設(shè)計(jì)考察藥效成分與輔料之間的協(xié)同性研究。 . 外用溶液的制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制： 通過驗(yàn)證確定常規(guī)制備方法是否能夠滿足外用溶液外觀形狀的要求； 采用澄明度檢測儀檢測澄明度，并進(jìn)行無菌檢測；參照 rhbFGF 凍干制劑的檢定規(guī)程，摸索外用溶液的活性測定方法。 . 外用溶液臨床前研究： 根據(jù)現(xiàn)行的藥品注冊(cè)管理辦法，可免做藥理毒理實(shí)驗(yàn)，需按要求整理相關(guān)資料。 . 臨床試驗(yàn)： 根據(jù)現(xiàn)行的藥品注冊(cè)管理辦法，按治療用生物制品 13 類新藥進(jìn)行總例數(shù) 480 例的Ⅲ期臨床試驗(yàn)。 . 重點(diǎn)解決的技術(shù)關(guān)鍵問題 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）新劑型開發(fā)中若保護(hù)劑選擇不當(dāng)，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)主藥活性喪失或無法檢測或刺激性大等問題，所以蛋白活性保護(hù)、檢測方法靈敏度與特異性問題尚需優(yōu)化。上述問題 已經(jīng)解決。 . 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ rhbFGF）是不穩(wěn)定蛋白，生產(chǎn)制備過程中若操作不當(dāng)或保護(hù)劑選擇不當(dāng)，易出現(xiàn)聚合、 N 端降解、活性喪失等問題，從而導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量不合格，所以制備過程中重點(diǎn)提高蛋白穩(wěn)定性，并進(jìn)行 第 19 頁 共 53 頁 長期穩(wěn)定性的考察。 . 臨床試驗(yàn)研究中摸索最合理的使用劑量、時(shí)間、療程，觀察不良反應(yīng)。 4. 項(xiàng)目的技術(shù)特色和水平 . 成果來源及知識(shí)產(chǎn)權(quán)情況 重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子是國家一類新藥，由北京雙鷺?biāo)帢I(yè)股份有限公司和暨南大學(xué)醫(yī)藥生物技術(shù)研發(fā)中心共同研制，并取得多項(xiàng)國家專利和國際專利。南海朗肽制藥有限公司于 2021 年 4 月通過技術(shù)轉(zhuǎn)讓方式取得新藥重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子技術(shù)。 南海朗肽制藥有限公司在取得重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子技術(shù)之后，于 2021 年建立中試車間，進(jìn)行外用重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子凍干制劑的生產(chǎn)和銷售。連續(xù) 5 年的生產(chǎn)和銷售，證明產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝穩(wěn)定、質(zhì)量可控，生產(chǎn)技術(shù)日日成熟；在小規(guī)模取得成功的基礎(chǔ)上，于 2021 年建立新的生產(chǎn)基地，引進(jìn)全自動(dòng)的灌裝設(shè)備，實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化生產(chǎn)，大大提高了產(chǎn)能。同時(shí)，在實(shí)現(xiàn)外用重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子產(chǎn)業(yè)化的過程中，以外用重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子為核心，研究開發(fā) 出一系列的新劑型，為本項(xiàng)目的后續(xù)發(fā)展奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 以外用重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子為核心研制的一系列新劑型，包括如重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子外用凝膠劑、外用溶液劑、滴眼液等均為南海朗肽制藥有限公司擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，并且全部申請(qǐng)發(fā)明專利。 . 國外技術(shù)現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì) 1940 年， Hoffman 等在牛腦垂體提取物中發(fā)現(xiàn)一種能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長的物質(zhì)， 70 年代部分純化這些提取物，發(fā)現(xiàn)它是成纖維細(xì)胞的一種有絲分裂 第 20 頁 共 53 頁 原 (mitogen)， 1975 年定名為成纖維細(xì)胞生長因子（ Fibroblast growth factor ，F(xiàn)GF），并初步確定了它的理化性質(zhì)。 1984 年 Bohlen 等人高度純化這種細(xì)胞因子。 1985 年 Esch， 1986 年 GimenezGallego 分別確定堿性成纖維細(xì)胞生長因子（ bFGF）和酸性成纖維細(xì)胞生長因子（ aFGF）的氨基酸順序。兩者不是同一基因產(chǎn)物， aFGF 基因位于人的第 5 對(duì)染色體， bFGF 基因位于第 4 對(duì)染色體， bFGF活性比 aFGF 大 10100 倍。 Abraham 等人在 1986 年獲得 bFGF 的 cDNA 克隆，從此 bFGF 的研究進(jìn)入分子生物學(xué)階段。 bFGF 是中胚層和神經(jīng)外胚層的致裂原， 它對(duì)多種軟組織和神經(jīng)系統(tǒng)的損傷具有快速修復(fù)作用，同時(shí)它又是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子。 bFGF 對(duì)血管的形成、分化具有重要的誘導(dǎo)作用，因此它又可開發(fā)為保健品添加劑。美國 SCIOS 公司已投入 億美元開發(fā) bFGF 藥物，已批準(zhǔn) bFGF 注射劑進(jìn)入 II 期臨床研究；日本武田制藥已經(jīng)