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蛋白質(zhì)的性質(zhì)實驗二——蛋白質(zhì)的等電點測定和沉淀反應(yīng)-文庫吧

2025-04-24 04:15 本頁面


【正文】 蛋白質(zhì)的沉淀可分為兩類: ( 1) 可逆的沉淀反應(yīng) :蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)尚未發(fā)生顯著變化,除去引起沉淀的因素后,蛋白質(zhì)的沉淀仍能溶解于原來的溶劑中,并保持其天然性質(zhì)而不變性。如大多數(shù)蛋白質(zhì)的鹽析作用或低溫下用乙醇(或丙酮)短時間作用于蛋白質(zhì) ( 2) 不可逆的沉淀反應(yīng) :蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生重大改變,蛋白質(zhì)常變性而沉淀,不再溶于原來溶劑中。如加熱引起的蛋白質(zhì)沉淀與凝固,蛋白質(zhì)與重金屬離子或某些有機酸的反應(yīng) ? 注意 :蛋白質(zhì)變性后,有時由于維持溶液穩(wěn)定的條件仍然存在(如電荷),并不析出,因此 變性的蛋白質(zhì)并不一定都表現(xiàn)為沉淀,而沉淀的蛋白質(zhì)也未必都已變性 ? 沉淀蛋白質(zhì)的方法 ? 鹽析法 :向蛋白質(zhì)溶液中加入大量的中性鹽(如硫酸銨,硫酸鈉或氯化鈉),使蛋白質(zhì)脫去水化層而聚集沉淀。鹽的濃度不同,析出的蛋白質(zhì)也不同。如球蛋白可在半飽和硫酸銨溶液中析出,而清蛋白則在飽和硫酸銨溶液中析出。 鹽析沉淀一般不引起蛋白質(zhì)變性 ,當(dāng)除去鹽后,即可溶解 ? 重金屬鹽沉淀法 :當(dāng)溶液 pH大于蛋白質(zhì)等電點時,蛋白質(zhì)顆粒帶負(fù)電荷,容易與重金屬離子( Hg2+、 Pb2+、 Cu2+或 Ag+) 結(jié)合成不溶性鹽而沉淀。誤服重金屬鹽的病人可口服大量牛乳或豆?jié){等蛋白質(zhì)進行解救就是因為它能和重金屬離子形成不溶性鹽,然后再用催吐劑排
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