影響體外受精效果的因素-文庫(kù)吧
2025-04-23 04:29 本頁面
【正文】 獲能的主要方法 1) 高滲溶液處理法： 受精前用 360mOm的高滲溶液處理精子 30分鐘，然后進(jìn)行受精。 2) 肝素處理法： 用含 100mg/ml肝素的受精液。 3) 用 Ca2+載體 A23187提高精子內(nèi)部 Ca2+的濃度。 4) 與血清白蛋白 的溶液長(zhǎng)時(shí)間孵育 5) 與含有 卵泡液 的培養(yǎng)液進(jìn)行孵育 體外受精的培養(yǎng)系統(tǒng) 目前通常采用的受精系統(tǒng)由微滴法和微孔板法。 1. 微滴法： 液滴體積通常為 30～ 50ml，上覆石蠟油。該法的優(yōu)點(diǎn)是受精效果好，精子利用率高；缺點(diǎn)是需用石蠟油，比較麻煩。 2. 微孔板法： 受精液體積通常為 ～ ，上覆石蠟油或不加石蠟油。該法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，一次可受精大量的卵子；缺點(diǎn)是精子的利用率相對(duì)較低，受精后的胚胎發(fā)育率也不如微滴法好。 卵母細(xì)胞體外受精的評(píng)定 體外培養(yǎng)： 受精后 48小時(shí)可檢查其受精分裂率，體外培養(yǎng) 7天后檢查囊胚發(fā)育率，培養(yǎng) 9天后，檢查囊胚的孵化率 。 卵子體外受精的影響因素 精子的來源 1. 取自附睪的精子比體外采集的精子容易在體外誘發(fā)獲能，故通?？色@得較高的受精率。 2. 來自不同公畜的精液在活力、獲能及頂體反應(yīng)的難易程度上均存在明顯差異。 3. 不同公畜個(gè)體精子的受精分裂率有差異，但其胚胎發(fā)育率的差異則更為明顯。 4. 同一公畜個(gè)體在不同季節(jié)采集的精液，其體外受精效果無明顯差異。 受精滴中精子不同平衡時(shí)間 以加入精子時(shí)間為 0h(對(duì)照組 ),分別在0h,1h,2h,4h隨機(jī)加入等數(shù)卵母細(xì)胞到各受精滴 ,結(jié)果顯示 :0h,較高 ,分別為 %、 %,與其他組相比差異顯著 (P)。高 ,為 %,與對(duì)照組的 %比較差異顯著 (P)。 結(jié)果表明 ,受精滴中精子經(jīng)過 ,弱精及死精粘聚沉淀 ,余下活力強(qiáng)的健壯精子 ,此時(shí)加入牛卵母細(xì)胞受精 ,可獲得較高卵裂率及囊胚率。 (文國(guó)藝 ,陽年生 。1999年月 11月 ) 受精液及其成分 受精液必須有利于精子的獲能和卵子第二次成熟分裂的完成。故通常為成分較為簡(jiǎn)單的生理鹽溶液。 最為常用受精液通常為 TALP和 BO，其滲透壓一般為 285～ 295mosm，內(nèi)含 10mM的乳酸鈉、1mM的丙酮酸鈉和 2mM的 Ca2+，其中 Ca2+ 起關(guān)鍵作用。 BO液中的 NaHCO3濃度高達(dá) mM，不含 Hepes，主要用于用 A23187作為獲能劑的受精液。 TALP的 NaHCO3濃度通常為 25～ 30 mM，內(nèi)含 5～ 10mM的 Hepes，主要用于用肝素作為獲能劑的受精液。 受精用液種類的影響 應(yīng)
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