【正文】 或少數(shù)幾個堿基插入或缺失 ， 從而使該部位后面全部遺傳密碼發(fā)生轉錄錯誤的一類突變 。 ? 吖啶類化合物的誘變機制目前還不很清楚 。 染色體畸變 ? 染色體畸變是指由誘變劑引起 DNA 分子的大損傷 ， 它包括染色體結構上的缺失 、 重復 、 易位及倒位等 。 ? 紫外線主要通過在同鏈 DNA 相鄰的嘧啶間或在互補雙鏈間形成以共價鍵結合的胸腺嘧啶二聚體 ， ? 微生物能以多種方式去修復被紫外線損作后的 DNA， 主要方式有兩種： ? （ 1） 光復活作用 。 ? （ 2） 暗修復作用 。 ? X 射線和 ? 射線為電離輻射，含有很高的能量，能產(chǎn)生電離作用，因而能直接或間接地改變 DNA 結構。 ? 重組是分子水平上的概念 ， 可以理解成是遺傳物質分子水平上的雜交 ， 而一般所說的雜交是細胞水平上的概念 。 真核微生物中的有性雜交 ， 準性生殖以及原核微生物中的轉化 、 轉導 、 接合和溶原轉變等都是基因重組在細胞水平上的反映 。 轉化后的受體菌 ，稱為轉化子 。 ? 只有處于感受態(tài)的細菌才能接受轉化因子 ， 進行轉化作用 。 ?④ 進入受體細胞的 DNA 單鏈與受體菌染色體組上同源區(qū)段配對，而受體菌染色體組的相應單鏈片段被切除，并被進入受體細胞的 DNA 單鏈所取代，于是形成了雜種 DNA 區(qū)段； ?⑤ 受體菌染色體進行復制，其中雜種區(qū)段被分離成兩個，一個恢復，一個形成一個轉化子。 ? 根據(jù)媒介噬菌體的不同 ， 轉導分普遍性轉導和局限性轉導兩類 。它的轉導頻率為 105～ 108。 一、原核微生物的基因重組（三）接合（ conjugation ） ? 通過供體細菌和受體細菌完整細胞間的直接接觸而傳遞大段 DNA 的過程，稱為接合（有時也稱雜交）。發(fā)現(xiàn)能夠進行接合現(xiàn)象的大腸桿菌有雄性與雌性之分，而決定它們性別的是由是否存在 F 因子所決定。 我們將這種含有游離存在的但又帶有一小段細胞核 DNA 的 F 因子的細菌稱為 F′ 菌株 。 ? 這是一種與轉導相似但又有本質不同的現(xiàn)象 。 ? 溶 源 轉 變 的 典 型 例 子 是 不 產(chǎn) 毒 素 的 白 喉 棒 狀 桿 菌（ Lorynebatcerium diphthariac） 菌株被噬菌體侵染而發(fā)生溶源化時 ， 會變成產(chǎn)毒素的致病菌株 。 二、真核微生物的基因重組（一）有性雜交 ? 在微生物的有性繁殖過程中 ， 不同的性細胞間的接合 ， 并隨之發(fā)生染色體的重組 ， 從而產(chǎn)生新遺傳型后代的現(xiàn)象 ， 稱有性雜交 。 ? 有性雜交在生產(chǎn)實踐中被廣泛用于優(yōu)良品種的培育 。 通過兩者的雜交 ， 就得到了既能生產(chǎn)酒精 ， 又能將其殘余菌體用作面包廠和家用發(fā)面酵母的優(yōu)良菌種 。是由兩個非異配型核的細胞接合后 ， 形成異核體細胞 ， 兩核能發(fā)生低頻率的接合與交換 ， 產(chǎn)生具有新性狀的個體 。 ? 2． 形成異核體 兩個單倍體細胞經(jīng)聯(lián)結后 ， 使原有的兩個單倍體核集中到同一個細胞中 ， 形成雙相的異核體 。 ? 3． 核融合 在異核體中的雙核融合 ， 產(chǎn)生雙倍體雜合子核 。 ? 4． 體細胞重組和單倍體化 雙倍體的雜合子極不穩(wěn)定 ， 在進行有絲分裂過程中 ， 極少數(shù)核中的染色體會發(fā)生染色體交換和單倍體化 ， 從而形成了極個別的具有新遺傳性狀的單倍體雜合子 。 ? ② 菌種培育： 改良已有菌種的生產(chǎn)性能 ， 使產(chǎn)品的質和量不斷提高 ， 或使它更適應于工藝的要求 ， 這是育種工作的任務 。 ? ④ 退化菌種的復壯： 如果發(fā)現(xiàn)菌種的生產(chǎn)性能下降 ， 就要設法使它恢復 ， 這便是菌種復壯工作的任務 。 （三）營養(yǎng)缺陷型突變體的篩選及其應用 二、微生物的誘變育種 2． 營養(yǎng)缺陷型菌株篩選的一般方法 （ 1） 誘變劑處理 （ 2） 淘汰野生型菌株 ① 抗生素法 ② 菌絲過濾法 （ 3） 檢出營養(yǎng)缺陷型 （ 4） 鑒定營養(yǎng)缺陷型 檢出營養(yǎng)缺陷型 ① 夾 層 培 養(yǎng) 法 ② 限量補充培養(yǎng)法 ③ 影 印 接 種 法 ④ 逐個檢出法 鑒定營養(yǎng)缺陷型 ① 含營養(yǎng)缺陷型菌株的基本培養(yǎng)基平板的制備 。 ? ③ 缺陷型菌株單一營養(yǎng)因素的鑒定。 ? 2． 處理目的基因 根據(jù)基因工程的 “ 設計藍圖 ” 的要求 ， 在從供體細胞中提取出的目的基因中加入專一性很強的限制性核酸內切酶進行處理 ， 從而獲得帶有特定基因并暴露出粘性末端的DNA單鏈部分 。 ? 對作為載體的細菌質?；蚴删w DNA可采用與處理目的基因同一種類的限制性核酸內切酶進行處理 ， 使其形成并暴露出與目的基因相應的粘性末端 。 由于這兩種 DNA是用同一種限制性核酸內切酶進行處理 ， 具有相同的粘性末端 ， 因此相互之間能夠形成氫鍵 ， 這就是所謂 “ 退火 ” 。 ? 4． 載體傳遞 即通過載體將供體生物中的遺傳基因導入到受體細胞內 。 ? 5． 復制 、 表達 在理想情況下 ， 進入受體細胞內的雜種質粒 （ 或雜種噬菌體 ） ， 可通過自我復制到擴增 ， 并使受體細胞表達出作為供體細胞所固有的部分遺傳性狀 ， 成為 “ 工程菌 ” 。 第五節(jié) 微生物菌種的保藏和復壯 一、菌種的保藏 ? 1． 低溫保藏法 斜面菌種直接放入 0～ 4℃ 冰箱中保藏 ， 保存時間不宜過長 ， 一般為 3～ 6個月； 用 20℃ 以下的超低溫冰箱或干冰 、 液氮 （ 195℃ ） 凍結保藏 ， 長達數(shù)年 。 這種保藏方法主要適合于細菌的芽胞和霉菌的孢子 。 ? 3． 隔絕空氣保藏法 用固體石蠟密封試管口以隔絕空氣 ， ? 4． 真空冷凍干燥保藏法 其基本過程是：培養(yǎng)菌種 → 加菌種保護劑 （ 一般食品工業(yè)用菌種多用牛乳作保護劑 ） → 分裝 、 預凍 → 真空凍干 → 真空封口 。 ? 第五節(jié) 微生物菌種的保藏和復壯 二、菌種的退化與復壯 （一） 常見的菌種退化現(xiàn)象 （ 二 ） 菌種退化的原因 菌種退化的主要原因是有關基因的負突