抗原或抗體檢測-在線瀏覽
2024-08-17 16:33本頁面
【正文】 高，樣品中所含待檢成分越多。二、抗原或抗體檢測的實(shí)用意義1．抗體檢測的意義檢測抗體可用于評價(jià)人和動物免疫功能的指標(biāo)。臨床上檢測病人的抗病原生物的抗體、抗過敏原的抗體、抗HLA抗原的抗體、血型抗體及各種自身抗體，對有關(guān)疾病的診斷有重要意義。（2）生物體內(nèi)各種大分子物質(zhì)：包括各種血清蛋白（如各類免疫球蛋白、補(bǔ)體的各種成分）、可溶性血型物質(zhì)、多肽類激素、細(xì)胞因子及癌胚抗原等均可做為抗原進(jìn)行檢測。（3）人和動物細(xì)胞的表面分子：包括細(xì)胞表面各種分化抗原（如CD抗原）、同種異型抗原（血型抗原或MHC抗原）、病毒相關(guān)抗原和腫瘤相關(guān)性情抗原等。（4）各種半抗原物質(zhì)：某些藥物、激素和炎癥介質(zhì)等屬于小分子的半抗原，可以分別將它們偶聯(lián)到大分子的載體上，組成人工結(jié)合的完全抗原。對運(yùn)動員進(jìn)行服用違禁藥品的檢測，都是應(yīng)用半抗原檢測的方法。最廣泛應(yīng)用方法有下述幾種：（一）沉淀反應(yīng)可溶性抗原與抗體結(jié)合，在兩者比例合適時，可形成較大的不溶性免疫復(fù)合物。1．。2．單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（single immunodiffusion）是在凝膠中進(jìn)行的沉淀反應(yīng)。當(dāng)復(fù)合物體積增加到一定程度時停止擴(kuò)散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正相關(guān)。免疫比濁法（immunonephelomytry）就是在一定的抗體濃度下，加入一定體積的樣品，經(jīng)過一段時間，用光散射濁度計(jì)（nephelometry）測量反應(yīng)液體的濁度，來推算樣品中的抗原含量。4，雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn) 雙免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（double immunodiffusion）是在瓊脂板上按一定距離打數(shù)個小孔，在相鄰的兩孔內(nèi)分別放入抗原和抗體材料。圖2 雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)示意圖5．對流免疫電泳 對流電泳（counterimmunoelectrophoresis）是一敏感快速的檢測方法，即在電場作用下的雙向免疫擴(kuò)散。只需1小時左右即可觀察結(jié)果。先將樣品加入瓊脂中電泳，將抗原各成分依電泳速度不同而分散開。常用此法進(jìn)行血清的蛋白種類分析。圖3 免疫電泳法基本步示決圖7．免疫印跡法免疫印跡法（immunoblotting）又稱為Western印跡法，用于AIDS的血清抗體檢測。第二步，將電泳分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上（電印跡），然后將印跡有病毒抗原的硝酸纖維膜浸濕于病人血清中。在洗去未沉淀的抗原和抗體后，在膜上加標(biāo)記的抗人免疫球蛋白的抗體，此抗體可以和病毒抗原與人抗體形成的免疫復(fù)合物發(fā)生反應(yīng)，最后加入顯色底物（如果抗人Ig是用酶標(biāo)記的）或做放射自顯影（抗人Ig用125Ⅰ標(biāo)記）以顯示結(jié)果（圖4）。1．直接凝集 直接凝集（direct agglutination）是將細(xì)菌或紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體結(jié)合產(chǎn)生的細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象?；蚶醚?xì)胞凝集現(xiàn)象檢查血型。如用γ球蛋白包乳膠顆粒檢測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人血清中的類風(fēng)濕因子，用甲狀腺球蛋白包被乳膠顆粒用于檢測甲狀腺球蛋的抗體。故凝集反應(yīng)即可測定抗原，也可測抗體，方法簡便、敏感。例如應(yīng)用于診斷自身免疫溶血性貧血癥時，Rh+紅細(xì)胞與抗Rh血清間的反應(yīng)。如果加入抗IgG的抗體，就可幫助抗Rh的IgG的抗體凝集紅細(xì)胞。（三）補(bǔ)體參與抗原抗體反應(yīng)這一類反應(yīng)主要包括溶血反應(yīng)（hemolytic assay）、補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)（plement mediated cytotoxicuty test）及補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（plement fixation test）。溶血反應(yīng)也是用于抗體分泌細(xì)胞即空斑形成細(xì)胞（PFC）檢測的原理。此方法可用于帶各種抗原的細(xì)胞的檢測，如進(jìn)行細(xì)胞MHC抗原的鑒定，和進(jìn)行淋巴細(xì)胞中T細(xì)胞總數(shù)或其亞類的計(jì)數(shù)。3．補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)當(dāng)抗原（可
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