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基因表達設計ppt課件-在線瀏覽

2025-06-21 22:05本頁面
  

【正文】 (弱起動子 ): ( 1)原核細胞-- 【 - 10區(qū)域,- 35區(qū)域 】 保守,與之越接近,啟動子越強。 三、 SD序列及其后面堿基的成分; 四、轉錄終止區(qū); 五、質??截悢?shù)及穩(wěn)定性 ( 1) Par區(qū)---類似染色體的著絲粒;起分配功能; ( 2)無 Par區(qū),通過抗性篩選,保持質粒穩(wěn)定存在。 【 真核表達也類似,但序列、位置與原核不同,更復雜 】 原核表達系統(tǒng)常用啟動子 (promotor) ? T7 噬菌體啟動子 ? SP6噬菌體啟動子 ? Lac 啟動子 ? Trp啟動子 ? Tac 啟動子 (Trp啟動子與 Lac 啟動子雜合成,比兩者都強) ? PL和 PR啟動子(噬菌體早期左 /右向啟動子,受 λ噬菌體 CI基因負調(diào)控。 【 BL21(DE3)】 ? 所以含有 T7 噬菌體啟動子的質粒,只有在改造的工程菌中才能表達外源蛋白。 表達質粒中遺傳信息傳遞的幾個起點 ? 復制: ori ? 轉錄: Promoter (T7) ? 翻譯: SD 【 合成從 ATG開始 】 表達載體的類型 ? 融合型表達載體: 融合蛋白 ? 非融合型表達載體: 天然完整蛋白 ? 分泌型表達載體: 產(chǎn)物可跨膜分泌至胞周間隙 Intei
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