菌種的傳代與保藏ppt課件-在線瀏覽
2025-05-09 05:51本頁面
【正文】 4～ 6℃ 0℃ 以下 6～ 12個(gè)月 1～ 2年 4年以上 短小芽孢桿菌 營養(yǎng)瓊脂斜面 半固體 營養(yǎng)肉湯菌懸液 4～ 6℃ 4～ 6℃ 0℃ 以下 6～ 12個(gè)月 1～ 2年 4年以上 生孢梭菌 庖肉培養(yǎng)基 液體石蠟覆蓋保存法 4～ 6℃ 4～ 6℃ 6個(gè)月 2年 白色念珠菌 改良馬丁斜面 4～ 6℃ 6個(gè)月 （ 3） 特點(diǎn)： 本方法簡便易行 ， 是實(shí)驗(yàn)室常用的一種保藏方法 ， 該法主要使菌種與空氣隔絕 。 2. 使用菌種時(shí) ， 先將菌種管傾斜使液體石蠟流至一邊 ， 再用接種針挑取培養(yǎng)物接種到新鮮斜面上培養(yǎng) ， 待長出新培養(yǎng)物后 ， 再移種一次到新斜面上即可使用 。 4. 液體石蠟在菌種管中高出培養(yǎng)基的高度要嚴(yán)格控制 ， 如太多 ， 會(huì)影響菌種交換氣體 ， 使保藏效果不好；如太少 ， 斜面容易干燥 ， 將縮短保藏期 。 5. 制備無菌液體石蠟時(shí) ， 每管裝量不能太多 ， 否則分裝到菌種培養(yǎng)基中易造成污染 。 ? 菌種的復(fù)蘇與保存在專用無菌室或超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行 。 ?先用砂輪將凍干菌種安瓶頸部挫出刻痕 ,再將凍干菌種管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干，用 75% 乙醇棉擦凈，放在滅菌雙碟內(nèi)，待干。 ? 取滅菌鑷子，在火焰旁，將炸裂的管口打開，放入滅菌雙碟內(nèi)，另取 1支滅菌滴管，在火焰旁吸取營養(yǎng)肉湯少許，加至菌種管底部，將凍干菌攪動(dòng)促使溶解，隨即吸出管內(nèi)菌液，接種至營養(yǎng)肉湯內(nèi)，并將滴管及菌種管投入消毒液內(nèi)，將已接種的營養(yǎng)肉湯置 35~37℃ 培養(yǎng) 22~24 h。如發(fā)現(xiàn)菌型不典型，可進(jìn)行平板分離單菌落。 標(biāo)簽上著名菌名及接種日期 。 ? 點(diǎn)燃酒精燈 ， 用左手握住菌種斜面 ， 將管口靠近火焰旁 ， 右手拿接種棒后端 ， 將接種環(huán)燒紅 30秒 ，隨后將全部接種棒金屬部分在火焰上燒灼 ， 往返通過 3次 。 ? 堵上管塞 ， 左手將菌種管放下 ， 取營養(yǎng)瓊脂斜面 1支 ， 照上述操作打開棉塞 ， 將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的低部 ， 由底向上 ， 將接種環(huán)輕貼斜面的表面曲折移動(dòng) ， 使細(xì)菌劃在斜面的表面上 。 ? 將已接種畢的細(xì)菌管置 35~37℃ 培養(yǎng)22~24小時(shí) ， 霉菌管一般置 20~25℃ 霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 7日 。 斜面接種時(shí)的無菌操作 (1)接種滅菌 (2)開啟試管塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好試管塞 方法 2：菌斜面 營養(yǎng)肉湯 分離平板 菌斜面 如果菌落形態(tài)不典型可純化 ， 按下列方法傳代（ 分離菌落 ） ： 用接種環(huán)取上述菌管 （ 斜面 ） 菌苔少許接種置營養(yǎng)肉湯中 (已滅菌 ), 置 35~37℃ 培養(yǎng) 18~24小時(shí)后 ，再用接種環(huán)取培養(yǎng)好的營養(yǎng)肉湯菌懸液 （ 濃菌液 ） ，接種于分離平板 ， 置 35~37℃ 培養(yǎng) 18~24小時(shí) ， 用接種針選典型菌落劃線于營養(yǎng)瓊脂斜面 ， 置 35~37℃ 培養(yǎng) 18~24小時(shí) 。 平板劃線分離法 常用分離平板： ? 大腸埃希菌 —— EMB瓊脂平板 ? 紫黑色有金屬光澤 ， 表面光滑 ， 圓形 ， 凸起 銅綠假單胞菌 —— 溴化十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基 扁
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