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實(shí)驗(yàn)二各種生物裝片的制備-在線瀏覽

2025-03-07 01:19本頁面
  

【正文】 和刀面,使之潤滑,否則材料容易破損)。徒手切片時最重要的是切下一小片平而薄的組織,而并不要求切下一個完整的切片。n A、 將切片移入小燒杯中,經(jīng) 50%、 60%、70%各級乙醇中進(jìn)行脫水及固定,每級 5分鐘,然后移入 1%番紅染液中(用 70%乙醇溶液配制)中 30分鐘。再移入 1%固綠染液(用 95%乙醇配制)染色 30分鐘,再入 95%乙醇中洗去浮色,最后進(jìn)入無水乙醇脫水 5分鐘。n D、將切片置于載玻片中央,加一滴樹膠,蓋上蓋玻片封片,待干燥后即可使用。此法在植物制片中具有十分重要的地位,是一種普遍應(yīng)用的制片方法。此外,在進(jìn)行植物組織顯微化學(xué)鑒定以及制作永久制片之前,也經(jīng)常先用徒手切片進(jìn)行觀察,以檢查材料是否合乎要求而決定取舍。n 徒手制片的主要優(yōu)點(diǎn)是:( 1)能及時觀察研究植物生活組織的結(jié)構(gòu)和天然色彩;( 2)方法及用具簡單,不需切片機(jī)等機(jī)械設(shè)備,短時間即可完成,這是其他方法所不及的;主要缺點(diǎn)是( 3)對于微小、柔軟、水分過多以及堅硬的材料,難以用徒手切成薄片;( 4)對于操作不熟練者,往往切成厚薄不勻或不完整的切片。要獲得良好的切片,首先要保持刀口的鋒利,因此在進(jìn)行材料的截取、削平切面時,可以用解剖刀或用過的刀片,不要用新刀,以免鈍化刀口。材料可以是新鮮的材料,也可以是經(jīng)過固定的材料(若材料取回后,因各種原因不能及時切片,可將材料保存在 ,而后可隨取隨做切片)。以左手拇指、食指、中指捏住材料,拇指應(yīng)低于食指,以免切傷手指;材料高出指尖(不要高出太多,否則不易掌握切片厚薄)。切片時還要注意:兩只手要能自由活動而不要靠在身上或桌子上;切實(shí)動作要迅速,材料一次切下,切忌停頓或拉鋸式切割。做連續(xù)徒手切片時,會因用力不均或刀不鋒利而出現(xiàn)切面傾斜的現(xiàn)象,要及時修正。n 在加蓋玻片時,要使蓋玻片的一側(cè)邊緣與水滴邊緣接觸,然后慢慢向下放蓋玻片,若蓋玻片下有氣泡應(yīng)重新放置蓋玻片。n 用徒手切片的材料不宜過大,一般以表面不超過 5~8mm178。對于過于柔軟或微小的材料(如葉片、細(xì)小的根尖等),難以用手拿住來做切片,需要借助一些夾持物方可進(jìn)行切片,一般可采用馬鈴薯塊莖或胡蘿卜直根(將中間硬心切去)作夾持物。夾持物的大小、夾縫(甚至夾溝)等應(yīng)視材料具體情況而定。n 如果臨時制片需保存一段時間,( 1)將材料封在水中,每隔 20~30分鐘再加一滴水,此法可保持?jǐn)?shù)小時;( 2)用10%~30%的甘油水溶液代替清水封片,并將制片放在鋪有濕濾紙的大培養(yǎng)皿中保存,
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