質粒分子生物學與質粒技術-在線瀏覽
2025-02-24 09:29本頁面
【正文】 F質粒的接合轉移機制 F質粒的分子大小為 100 kb， 編碼接合轉移功能的 tra基因區(qū)位于遺傳和物理圖譜的 － 100 kb 位置 ， 編碼 37個蛋白質和 1個反義 RNA， 這些分子分別負責性菌毛的合成和裝配 ， 雜交對的穩(wěn)定 ， 表面排斥 ， DNA轉移 ， 以及 tra區(qū)基因表達的調節(jié) 。 得到供體 DNA的受體細胞稱為接合體或接合子 。 這一過程由接合性質粒的轉移 (tra) 基因區(qū)編碼 。 腸道細菌質粒分別屬于 30多個不相容組 ， 用 Inc表示 。 質粒之間的不相容性 ，是由于它們存在 — 種或幾種與質粒復制或分配有關的相同因子 ， 如基本復制子中的反向轉錄區(qū)(ColE1質粒的 RNAⅠ )， ori區(qū)中的重復子 (Iteron)，與分配蛋白結合的分配位點 。 質粒分子中為質粒復制所必需的最小區(qū)段稱為基本復制子 ， 它由兩部分組成 ， 一是復制原點 (ori)， 二是調節(jié)復制起始的基因 （ 編碼蛋白質或 RNA)。 與 RNA病毒的主要區(qū)別是它們不具有感染性 ． ? 無殼體的 dsRNA質粒：存在于脂質小囊中的栗疫菌減毒 dsRNA質粒 ， 玉米線粒體中與雄性不育有關的 dsRNA質粒 。 ? 線狀 DNA質粒：乳酸克魯維酵母的嗜殺線狀 DNA質粒 ， 植物線粒體中與雄性不育有關的線狀 DNA質粒 。 根據質?？刂频男誀?， 可以把細菌質粒分成抗性質粒 、 降解質粒 、 毒力質粒和共生質粒等類型 。 質粒的命名：一個小寫字母 p 加 23 個大寫字母和數字 ， 如 pJP4，pDTG1。質粒分子生物學與質粒技術 第 1講 質粒分子生物學概論 1. 什么是質粒 2. 質粒的復制分配和不相容性 3. 質粒的接合轉移 4. 細菌質?？刂频谋硇? ①抗性質粒 ②毒力質粒 ③降解質粒 ④共生質粒 1 什么是質粒 定義和命名 質粒是染色體以外能自主復制的遺傳因子 ，不具有胞外期 ， 對寄主細胞來說是非必需的 ，符合這三條標準的染色體外 DNA或 RNA分子都可以稱為質粒 。 狹義的質粒一般是指細菌染色體外的環(huán)狀 DNA分子 。 細菌質粒 細菌細胞中染色體以外的共價閉合環(huán)狀DNA分子 (cccDNA)， 其大小在 11700 kb之間 。 真核生物的 DNA質粒 ? 環(huán)狀 DNA質粒：酵母 2mm質粒 ， 植物線立體中的環(huán)狀 DNA質粒 ， 人和動物的核 DNA質粒等 ，它們都是不知其功能的隱蔽質粒 。 真核生物的 RNA質粒 ? 有殼體的 dsRNA質粒：由蛋白質殼體包裹 ，存在于某些真菌和植物細胞中 ， 由于它們酷似病毒 ， 所以也常被稱作真菌病毒和植物隱蔽病毒 ， 或稱類病毒顆粒 ， 典型代表是釀酒酵母的嗜殺 dsRNA質粒 。 2 質粒的復制 、 分配和不相容性 復制 (Replication) 質粒的復制起始和拷貝數是由質粒 DNA序列控制的 。 不相容性 (Inpatibility) 兩種質粒不能在同 — 個寄主細胞中共存的現象 ， 叫質粒的不相容性 。 不相容性是質粒分類的理想標準 。 3 質粒的接合轉移 通過細胞與細胞之間的接觸 ， 使 DNA從一個細胞轉移到另外一個細胞的現象叫接合(Conjugation)。 被轉移的 DNA可以是接合質粒本身 ， 也可以是染色體或可誘動的非接合性質粒 。 每個供體細胞所產生的接合體數稱為接合頻率 。 圖 110 F質粒接合轉移區(qū)的結構 （ kb區(qū) ） traA：性菌毛亞基； traN和 traG：雜交對穩(wěn)定； traS和 traT：表面排斥； traM：轉移信號； traY：缺口酶； traI： DNA解旋酶； traD：驅動單鏈 DNA轉移； traJ、 finO、 finP：調節(jié)基因 細菌染色體的誘動 細菌的染
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