【正文】 ........................ 12 接種量的影響 .................................................................................................................................... 13 培養(yǎng)溫度的影響 ................................................................................................................................. 13 初始 pH 值的影響 .............................................................................................................................. 14 污水 COD 值測(cè)定 ...................................................................................................................................... 14 菌株對(duì)污水 COD 降解結(jié)果 ............................................................................................................. 15 菌株對(duì)丙烯酰胺除去率結(jié)果 ........................................................................................................... 16 .................................................................................................................................. 16 參考文獻(xiàn) ............................................................................................................................. 17 致 謝 ................................................................................................................................... 18 1 摘 要 微生物降解因其特有的無(wú)害化處理將成為解決丙烯酰胺引起環(huán)境污染問題的有效手段。采用富集、選擇培養(yǎng)分離的方法，從江西昌九農(nóng)科化工有限公司厭氧池廢水中篩選分離得到能夠降解丙烯酰胺單體的菌株，對(duì)菌株的培養(yǎng)基及生長(zhǎng)條件優(yōu)化，得到一株降解效果較好的菌株 ,最后對(duì)該 丙烯酰胺降解菌 進(jìn)行基本的生理生化特性測(cè)試，初步鑒定屬 葡萄球菌屬， 最適生長(zhǎng)溫度為 33℃ ，最適生長(zhǎng) pH為 左右，最佳接種量為 2%，最適生長(zhǎng)時(shí)間是 12h，菌株對(duì)污水 COD 降解率達(dá)到 66%，丙烯酰胺除去率達(dá)到 %。 PAM 由于具有特殊的物理化學(xué)性質(zhì)，因而廣泛應(yīng)用于石油開采、污水處理、造紙、礦產(chǎn)、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、紡織等行業(yè)，享有“百業(yè)助劑”之稱?；?醫(yī)藥行業(yè)的廢水中常含有丙烯酰胺，對(duì)環(huán)境造成污染，危害人類健康。 丙烯酰胺菌的危害 急性毒性 ： 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，大鼠、小鼠、豚鼠和兔的丙烯酰胺經(jīng)口 LD50為 150180 mg/kg，屬中等毒性物質(zhì)。神經(jīng)毒性作用主要為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、記憶和其他認(rèn)知功能部位的退行性變；生殖毒性作用 表現(xiàn)為雄性大鼠精子數(shù)目和活力下降及形態(tài)改變和生育能力下降。大鼠生殖和發(fā)育毒性試驗(yàn)的 NOAEL 為 2 mg/kg 天。并證明丙烯酰胺的代謝產(chǎn)物環(huán)氧丙酰胺是其主要致突變活性物質(zhì)。國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（ IARC）1994 年對(duì)其致癌性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，將丙烯酰胺列為 2 類致癌物（ 2A）即人類可能致癌物，其主要依據(jù)為丙烯酰胺在動(dòng)物和人體均可代謝轉(zhuǎn)化為其致癌活性代謝產(chǎn)物環(huán)氧丙酰胺。對(duì)于廣大消費(fèi)者，專家建議： 盡量避免過(guò)度烹飪食品（如 溫度過(guò)高或加熱時(shí)間太長(zhǎng)），但應(yīng)保證做熟，以確保殺滅食品中的微生物，避免導(dǎo)致食源性疾病。 建議食品生產(chǎn)加工企業(yè)，改進(jìn)食品加工工藝和條件，研究減少食品中丙烯酰胺的可能途徑，探討優(yōu)化我國(guó)工業(yè)生產(chǎn)、家庭食品制作中食品配料、加工烹飪條件，探索降低乃至可能消除食品中丙烯酰胺的方法。目前，降解有機(jī)污染物的處理技術(shù)中，應(yīng)用具有特殊分解能力的微生物的投菌法具有廣闊的前景。 2. 材料與儀器 菌種來(lái)源 從江西昌九農(nóng)科化工有限公司厭氧池廢水中篩選分離得到能夠降解丙烯酰胺單體的菌株 主要藥品和試劑 實(shí)驗(yàn)中使用 的藥品和 試劑如表 1 表 1 使用試劑名稱，規(guī)格及廠家 Table 1 Chemical reagents consumed in experiment 5 名稱 規(guī)格 生產(chǎn)廠家 磷酸氫二鉀 分析純 成都市科龍化工試劑廠 濃氨水 分析純 天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心 氯化銨 分析純 天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心 硝酸銀 分析純 天津市福晨化學(xué)試劑廠 硫酸亞鐵 分析純 天津市福晨化學(xué)試劑廠 氯化鈉 分析純 天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心 重鉻酸鉀 分析純 廣東西隴化工廠 硫酸亞鐵銨 分 析純 天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心 鹽酸 分析純 南昌鑫光精細(xì)化工有限公司 濃硫酸 分析純 南昌鑫光精細(xì)化工有限公司 蛋白胨 生化試劑 北京奧博星技術(shù)有限責(zé)任公司 肌酸 生化試劑 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司 甲基紅 生化試劑 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司 瓊脂粉 生化試劑 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司 牛肉膏 生化試劑 北京奧博星技術(shù)有限責(zé)任公司 營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉 生化試劑 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司 氫氧化鈉 分析純 天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司 葡萄糖 分析純 成都市科龍化工試劑廠 無(wú)水乙醇 分析純 天津市福晨化學(xué)試劑廠 實(shí)驗(yàn)儀器 實(shí)驗(yàn)中所使用的儀器如表 2 表 2 使用儀器名稱，規(guī)格及廠家 Table 2 Equipments used in experiment 名稱 規(guī)格型號(hào) 生產(chǎn)廠家 隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱 GSM350BSⅡ 上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 PHG9240A 上海精密實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司 電子天平 MP502B 上海精科天平 分析天平 JA5003N 上海精密科學(xué)儀器有限公司 不銹鋼手提式滅菌鍋 DSX280A 上海申實(shí)醫(yī)療器械廠 全自動(dòng) 高壓滅菌鍋 HVE50 日本 潔凈工作臺(tái) SWCJIF 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司 6 可見分光光度計(jì) WFJ7200 型 龍尼柯（上海）儀器有限公司 pH 酸度計(jì) pHS25 型 上海雷磁儀器廠 恒溫培養(yǎng)搖床 HWY100B 上海智城分析儀器制造有限公司 冰箱 BCD216YH 海爾冰箱 培養(yǎng)基 選擇性培養(yǎng)基 表 3 培養(yǎng)基的配制 Table 3 Medium pound 葡萄糖 10g/l CaCl2 K2HPO4 FeCl3 g/l MgSO4 NaCl g/l 丙烯酰胺 PH 控制在 葡萄糖氧化發(fā)酵培養(yǎng)基 表 4 培養(yǎng)基的配制 Table 4 Medium pound 蛋白胨 10 g/l NaCl 5 g/l K2HPO4 g/l 葡萄糖 10 g/l 瓊脂 6 g/l 1%溴甲酚紫 3ml 蒸餾水 1000ml 用氫氧化鈉調(diào) ，分裝試管， 115℃蒸汽滅菌 20min。 降解丙烯酰胺菌篩選流程 菌株的富集 實(shí)驗(yàn)樣品采自江西昌九農(nóng)科化工有限公司厭氧池帶污泥廢水，將所采集的帶污泥廢水 1ml 接入 50ml 已滅菌的富集液體培養(yǎng)基中，在 30℃旋轉(zhuǎn)式搖床（轉(zhuǎn)速 150r/min ）培養(yǎng)