【正文】 ，具有多種功能的超分子結(jié)構(gòu)。研究表明，細(xì)菌在降解纖維素過程中產(chǎn)生纖維素酶的量較少，且大多不能分泌到細(xì)菌細(xì)胞外，其大多數(shù)對結(jié)晶纖維素沒有活性，在降解纖維素能力方面，細(xì)菌明顯低于真菌，因此，很少將細(xì)菌投入到工業(yè)生產(chǎn)中[11]。纖維素酶和濾紙酶活研究結(jié)果表明，這5 株菌在分泌纖維素酶活力及降解濾紙能力方面均較強(qiáng)， U/ mL，而分解濾紙的酶活力則最高達(dá)到64 U/ mL。C。李日強(qiáng)等[12]通過對發(fā)酵處理后的玉米秸稈和白酒糟的分析，玉米秸稈經(jīng)發(fā)酵處理后粗蛋白、 %， % %；白酒糟經(jīng)發(fā)酵處理后粗蛋白、 %， % %，而且都具有較高的半纖維素酶和纖維素酶活性，可對秸稈和白酒糟進(jìn)行持續(xù)降解，進(jìn)一步提高了消化率。C的水浴鍋中保持5 h，可以提高還原糖的含量， %vol， %， %，蒸餾出的產(chǎn)品達(dá)到蒸餾白酒各項衛(wèi)生指標(biāo)，達(dá)到優(yōu)質(zhì)醬香白酒的要求，提高了醬香型白酒酒糟的利用價值。酒糟的利用研究也有進(jìn)展，歸納起來，主要是通過生物法，將酒糟發(fā)酵為動物飼料，或從中再提取酒精，再有就是發(fā)酵為有機(jī)肥這幾大個方面，并從其中衍生出其他的發(fā)展方向。平均海拔高度880 m，176。茅臺鎮(zhèn)地處河谷，風(fēng)速小，冬暖、夏熱、少雨、少風(fēng)的特殊小氣候十分有利于釀造茅臺酒微生物的棲息和繁殖。采集的樣品放入塑料袋中，封口，置于冰箱中4176。、301車間酒糟、酒曲、酒醅、茅臺有機(jī)高粱基地土壤、廢舊稻草等樣品的基本理化性質(zhì)。 樣品基本理化性質(zhì)樣品名稱含水率有機(jī)C有機(jī)質(zhì)pH全K速效K全P全N堿解N%g/kgg/kgmg/kgmg/kg%g/kgmg/km茅臺酒糟301車間酒糟茅臺大曲茅臺酒醅1茅臺有機(jī)高粱基地土壤廢舊稻草小麥粉里村組土壤里列組土壤　1．試驗在30176。C培養(yǎng)條件下，從茅臺酒丟糟、301車間丟糟、酒曲、酒醅、茅臺有機(jī)高粱基地土壤、廢舊稻草樣品中分離細(xì)菌；2．對分離得到的菌株分別于30176。C下，采用羧甲基纖維素鈉鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)基進(jìn)行初篩；3．對初篩得到的菌株進(jìn)行生長曲線的測繪，以及濾紙酶活力（FPA）、羧甲基纖維素鈉酶活力（CMC）的測定，篩選出纖維素酶酶活性最高的菌株保存。2．羧甲基纖維素鈉鑒定培養(yǎng)基（CMCNa）[14]： g、 g 、K2HPO47H2O g、NaNO3 g、KCl g、 g、調(diào)pH 。4．斜面保存培養(yǎng)基： g、 g、NaCl g、 mL，調(diào)pH 。6．纖維素分解細(xì)菌活化培養(yǎng)液： g、 g、 g、K2HPO47H2O g、NaCl g、 mL、調(diào)pH 。7H2O g、CaCl2 g、K2HPO46H2O g、 mL、調(diào)pH 。C下，滅菌30 min后使用。2．檸檬酸緩沖液：稱取4. 2 g 檸檬酸溶于200 .0 mL 蒸餾水，配成0. 1 mol / L 檸檬酸溶液，稱取5. 88 g mL蒸餾水，配成0. 1 mol/ L檸檬酸三鈉溶液。量取0. 1 mo l/ L檸檬酸溶液57 mL，0. 1 mol / L mL， mL蒸餾水 混勻，配成pH4. 0. 05 mol / L 的檸檬酸緩沖液。4．CMCNa溶液： g CMCNa（羧甲基纖維素鈉） mL醋酸緩沖液（pH ），加熱使之溶解，保存于冰箱中，以待使用。C烘箱中烘2 h至恒重， g烘好的葡糖糖， mL。再用2 % NaHCO3洗至中性，曬干待用。儀器名稱型號生產(chǎn)廠商冰箱BCD215KALM青島海爾股份有限公司電熱恒溫培養(yǎng)箱DH6000BH天津市泰斯特儀器有限公司電子天平ALB224賽多利斯科學(xué)儀器有限公司單人單面凈化工作臺SW—CJ—1FD蘇州凈化設(shè)備有限公司恒溫振蕩器ZD—85A常州澳華儀器有限公司型電熱鼓風(fēng)干燥箱101—2AB天津市泰斯特儀器有限公司型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱DHG—9240上海一恒科技有限公司紫外可見分光光度計721GG上海儀電分析儀器有限公司高速臺式離心機(jī)TGL—16B上海安亭科學(xué)儀器廠、純化將從貴州茅臺酒廠取樣到的樣品搗碎后， mL無菌水中制備成1%的菌懸液，震蕩培養(yǎng)30 min用無菌蒸餾水稀釋101010105四個梯度，然后再用無菌吸管吸取100 μL菌懸液滴入牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上涂布均勻，分別在30 176。C恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)2 d，不同處理均作3個重復(fù)。觀察牛肉膏蛋白胨各培養(yǎng)基中的菌落形態(tài)特征，拍照并作好詳細(xì)記錄。分別于30176。C下倒置培養(yǎng)2 d，每天檢測觀察各菌株的菌落狀況，最后通過滴加革蘭氏碘液，靜置10 min，傾去染液，將平板置于白色背景下，觀察透明圈產(chǎn)生的清晰度，測量菌落及淺色透明圈半徑（R，mm），并拍照記錄。最后保存菌落半徑與透明圈比值大于2：4的菌株于牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)基上，其活性與透明圈半徑/菌落半徑（R/r）在冰箱中4176。從斜面保存培養(yǎng)基挑取菌株單菌落， mL LB 液體培養(yǎng)基的試管中，振蕩培養(yǎng)12 h，然后取100 μL 菌懸液置入另外盛有10 mL LB 液體培養(yǎng)液的試管中振蕩培養(yǎng)。以未接種的LB培養(yǎng)液做空白對照，依次測定。然后以時間為橫坐標(biāo)，以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，繪制菌體生長曲線。另取試管7支，編號， mL，對好加入各試管， mL，搖勻，置于沸水中煮沸5 min。選用520 nm波長。 mL蒸餾水代替葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液按同樣顯色操作為空白調(diào)零點。根據(jù)DNS (3，5二硝基水楊酸)比色法測定原理繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線[16]。C通過靜置培養(yǎng)、50176。每24 h 取一次菌液，3500 r/min 下離心5 min，收集上清液用于測定酶活。C 恒溫水浴中反應(yīng)30 min， mL DNS 試劑，沸水浴10 min， mL。3．濾紙崩解的測定分別用接種環(huán)取一環(huán)初篩得到的菌種，將其接種到裝有10 mL濾紙培養(yǎng)液的10mL試管中，置于30176。C恒溫?fù)u床，120 r /min下振蕩培養(yǎng)，每天檢查記錄各菌株對濾紙的作用情況[17]。具體表示：+濾紙邊緣膨脹；+ + 濾紙整齊膨脹并下彎； + + + 濾紙不定形；+ + + + 全成糊狀。4．CMC酶活力測定酶液的稀釋：取大號試管13只，用移液管吸取離心后的酶1 mL，加水24 mL，搖勻。每次測酶活時均設(shè)一個總的空白樣，即在試管中不加底物和酶液， mL，用作測量吸光度時的參比。在容積為10 mL的試管管中，加入1 mL 適當(dāng)稀釋的酶液于50176。C 恒溫水浴中預(yù)熱5 min后，搖勻，將試管置于水浴鍋中，50176。將試管從水浴鍋取出后， mL DNS試劑，然后又放入水浴鍋，沸水浴5 min。在560 nm 波長處測吸光度并做好記錄。C下，每1 g纖維素酶曲在1 min內(nèi)水解CMC，生成1 ug葡萄糖的酶活性稱作纖維素酶活力單位，記作U。3結(jié)果與分析、純化結(jié)果利用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，分101010105四個不同稀釋梯度，2至3組平行，從茅臺酒丟糟、301車間丟糟、酒曲、酒醅、茅臺有機(jī)高粱基地土壤、廢舊稻草樣品中初步分離到近千個菌株，在觀察菌落生長狀況、菌落形態(tài)特征的同時。 菌落計數(shù)統(tǒng)計菌株編號稀釋102（計數(shù)） 稀釋103（計數(shù)） 稀釋 104（計數(shù)） 稀釋105（計數(shù)）茅臺酒糟B1200328244248301車間酒糟B2400以上1051423454713茅臺大曲B3700以上741083238414茅臺酒醅B41241651722411茅臺有機(jī)高粱基地土壤B5500以上2012743456817廢舊稻草B6連片連片2893213257