【正文】 ，約十幾分鐘可完成檢測。在動物間一種生物芯片主要用于：傳染病（同步檢測多種病原體；同時檢測多個樣品）；藥物殘留（同時檢測多種藥物）；轉(zhuǎn)基因成分、特定動物源成分（同時檢測鑒別多種成分）。我國正式進入生物芯片的研究領(lǐng)域是在1998年，我國自主研發(fā)的各類生物芯片及其配套產(chǎn)品累計實現(xiàn)的銷售收入已超過億元人民幣。基因芯片制備及檢測流程，是利用原位合成法或?qū)⒁押铣珊玫囊幌盗泄押烁仕嵋灶A(yù)先設(shè)定的排列方式固定在固相支持介質(zhì)表面，形成高密度的寡核甘酸的陣列，樣品與探針雜交后，由特殊的裝置檢出信號，并由計算機進行分析得到結(jié)果，其在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品及動物產(chǎn)品中的微生物的檢疫有廣泛的運用。1992年第一塊生物芯片誕生，在近幾年迅速崛起，全球約有數(shù)百家生物技術(shù)公司和數(shù)千家研究機構(gòu)從事生物芯片的研究和開發(fā)工作。隨著科技進步和學(xué)科的交融，分子生物學(xué)、材料科學(xué)、微電子、激光檢測、計算機數(shù)字信號處理等多學(xué)科技術(shù)相融合，實現(xiàn)快速、靈敏、高通量（同步檢測多種目標(biāo)，或同時檢測多個樣品）和自動化檢 測和數(shù)據(jù)處理。 基因工程、單克隆抗體與蛋白質(zhì)檢測技術(shù)基因工程、單克隆抗體與蛋白質(zhì)檢測技術(shù)通過基因工程技術(shù)生產(chǎn)特異抗原（重組抗原）、單克隆抗體技術(shù)生產(chǎn)特異抗體等，該方法的建立基于重組抗原或單克隆抗體的各種血清學(xué)檢測方法：ELISA、膠體金試紙條、生物芯片等。核酸檢測技術(shù)在直屬局實驗室（中心）均已開展應(yīng)用或研發(fā)，設(shè)備和技術(shù)基礎(chǔ)良好。 核酸檢測技術(shù)應(yīng)用現(xiàn)狀核酸檢測技術(shù)直接應(yīng)用于檢測各種動物病原、病原體分型，特定動物源成份、轉(zhuǎn)基因成份等，并已有一批總局明文批準(zhǔn)采用的檢測項目如：禽流感、甲型流感H1N口蹄疫、SARS、鏈球菌、藍耳病、轉(zhuǎn)基因、動物源成份等。適合基層實驗室甚至現(xiàn)場檢測。需針對靶基因的6個特異序列設(shè)計4條引物，還可加上2條環(huán)識別引物以提高速度和產(chǎn)量。反應(yīng)起始階段形成DNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)（LAMP循環(huán)的起始結(jié)構(gòu)），以莖環(huán)結(jié)構(gòu)為模板進入擴增循環(huán)階段。實時熒光PCR技術(shù)應(yīng)用范圍為重大動物疫病及各種傳染病病原快速檢測方法，疫情監(jiān)控重要的技術(shù)依托；供港澳活禽及產(chǎn)品禽流感，新城疫監(jiān)測；進境動物產(chǎn)品口蹄疫，豬生殖與呼吸系統(tǒng)綜合癥檢測；動物及產(chǎn)品甲型流感H1N1監(jiān)測；飼料及動物產(chǎn)品中特定動物源成分檢測等。實時熒光PCR檢測是當(dāng)前實驗室及商業(yè)重點開發(fā)應(yīng)用的快速檢測方法。常規(guī)PCR檢測過程包括：取樣、樣品前處理與核酸提取PCR反應(yīng)，PCR產(chǎn)物電泳檢測，PCR產(chǎn)物的確證分析（測序、酶切等）。它不僅可以檢測活的病原體，而且還可檢出已滅活的病原體，只要病原體的核酸未降解。PCR與實時熒光PCR是發(fā)展成熟且主要應(yīng)用的核酸擴增技術(shù)。核酸擴增技術(shù)是對核酸進行體外生成和放大的技術(shù)，只要起始的生物材料里存在微量的特定核酸（如某種病原體的核酸），通過擴增反應(yīng)就能得到大量的可檢測到的特定核酸產(chǎn)物，從而可證明檢測對象的存在。在動物檢疫方面，具有代表性的技術(shù)主要有3大類： 核酸擴增技術(shù)：蛋白質(zhì)檢測技術(shù)：蛋白質(zhì)電泳與免疫印跡、重組抗原based、單克隆抗體based。分子生物學(xué)檢疫又稱基因檢疫，主要是針對不同病原微生物所具有的特異性核酸序列和結(jié)構(gòu)進行測定。3現(xiàn)代生物技術(shù)在動物檢疫中的應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)在動物檢疫中的應(yīng)用是基于分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展起來的分子生物學(xué)檢測技術(shù)。免疫學(xué)檢疫技術(shù)具有靈敏度高、特異性強、重復(fù)性好的檢測、操作簡單、快速等優(yōu)點，是目前最理想的殘留篩選性分析方法之一。病原學(xué)檢疫時從病料中分離出病原微生物，雖是確診的重要依據(jù)，但健康動物也有帶菌現(xiàn)象，所以病原學(xué)的檢疫結(jié)果還需與流行病學(xué)及臨床診斷癥狀、病理變化聯(lián)合起來綜合分析。病理學(xué)檢疫技術(shù)既可驗證臨床診斷結(jié)果的正確與否，又可為實驗室診斷方法和內(nèi)容的選擇提供參考依據(jù)。2傳統(tǒng)常規(guī)動物檢疫技術(shù)流行病學(xué)檢疫時，對流行病的分析和確診有至關(guān)重要的作用，但是流行病學(xué)的調(diào)查總結(jié)過程中也存在工作量大且繁瑣，耗費的人力多等問題。獸藥包括禁用藥和限量用藥，具體檢測項目和控制標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)進出口國家或地區(qū)的要求。OIE關(guān)注疫?。ㄊ謨?009）陸生動物疫病112種；水生動物疫病：25種。1動物檢驗主要檢測內(nèi)容動物疫?。ê诵蠊不家卟。┯刹《尽⒓毦?、真菌、寄生蟲、支原體、非常規(guī)病原（例阮病毒、立克次氏體）引起，在動物間或人與動物間傳播，造成較嚴(yán)重危害的各種傳染病。關(guān)鍵詞：動物檢疫；傳統(tǒng)檢疫技術(shù)；現(xiàn)代檢疫技術(shù)動物檢疫（Animal Quarantine）遵照國家法律運用強制性手段和科學(xué)技術(shù)方法預(yù)防或阻斷動物疫病的發(fā)生以及從一個地區(qū)到另一個地區(qū)的傳播，通常指動物防疫監(jiān)督機構(gòu)的動物檢驗檢疫人員依法對動物、動物產(chǎn)品的傳染病、寄生蟲病進行檢查定性和處理的行政執(zhí)法行為。第一篇：動物檢疫現(xiàn)代生物技術(shù)在動物檢疫中的應(yīng)用養(yǎng)殖宋天增201509510507 摘要：動物檢驗檢疫主要檢測內(nèi)容包括動物疫病、獸藥等有毒有害物質(zhì)、特定動物源成份。本文簡述了當(dāng)前動物檢疫的主要檢測內(nèi)容、傳統(tǒng)常規(guī)動物檢疫技術(shù)、核酸擴增技術(shù)在動物檢疫中應(yīng)用和新型生物技術(shù)平臺技術(shù)在動物檢疫中的應(yīng)用。通過動物檢疫，對可疑或已證實的疫病對象實行強制隔離，或作出適當(dāng)處理，目的是防止動物傳染病的傳播，保障畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民健康。我國進境動物疫病名錄97種：一類病15種，二類病82種；含水生動物疫病11種。動物、動物產(chǎn)品、飼料中的獸藥殘留、重金屬、微生物毒素、生物毒素等。瘋牛病傳播風(fēng)險因子：飼料中的牛羊成分；動物產(chǎn)品真?zhèn)舞b別：熟制肉類出口；珍貴皮草、珍貴中藥材、瀕危動物保護； 食物過敏源檢測：甲殼素、某些魚成份、轉(zhuǎn)基因成分：例轉(zhuǎn)基因魚等。臨床檢疫方法具簡便易行，適合現(xiàn)場操作等優(yōu)點，但是臨床檢疫對發(fā)病初期尚未出現(xiàn)有病證意義的、特征癥狀的病例，或非典型病例，或癥狀相似病例，往往難于做出診斷。在剖解檢疫時，有些病例往往缺乏特征性的病變，特別是急性死亡的病例、非典型病例和早期屠 宰病例，所以在剖解檢疫這些病例時應(yīng)選擇癥狀較典型、病程較長、未經(jīng)治療的自然死亡病例進行剖檢。而且任何一種病原學(xué)方法都存在有漏檢的可能，所以即使沒有發(fā)現(xiàn)病原體，也不能完全否定該種傳染病的診斷。但酶聯(lián)免疫分析前期工作復(fù)雜，檢測對象針對性太強，開發(fā)免疫檢測試劑盒所需費用昂貴。根據(jù)生物大分子結(jié)構(gòu)特點與相互作用原理，從分子水平檢測某種特定生物大分子存在與否。自1976年以來，基因檢疫方法取得了巨大進展，建立了DNA限制性內(nèi)切酶圖譜分析、核酸電泳圖譜分析、寡核苷酸指紋圖核酸探針、聚合酶鏈反應(yīng)等。新技術(shù)平臺：生物芯片、變性高效液相色譜、生物傳感器。主要包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR)，實時熒光PCR，LAMP, NASBA核酸擴增產(chǎn)物分析技術(shù)測序、雜交、酶切等。 PCR檢測PCR技術(shù)用于動物檢疫主要是檢測病原，做早期診斷和病原的鑒定。因此，當(dāng)由于各種原因無法進行病原分離和鑒定時，該技術(shù)將發(fā)揮巨大的作用。 實時熒光PCR檢測實時熒光PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，每經(jīng)過一個擴增循環(huán)，產(chǎn)生一個熒光信號，通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程，最終得到一條熒光擴增曲線，也可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析。其優(yōu)點為：特異性好、靈敏度高、更快速；操作簡單、安全、自動化程度高、防污染；可實現(xiàn)定量檢測；設(shè)備、試劑成本較高；快速篩選檢測方法，仍需確證（常規(guī)PCR及序列分析）等。（LAMP)環(huán)介導(dǎo)等溫核酸擴增技術(shù)（LAMP)是在鏈置換DNA聚合酶啟動下的鏈置換DNA合成循環(huán)。擴增產(chǎn)物是不同長度的DNA混合物，分別具有不同個數(shù)莖環(huán)結(jié)構(gòu)，產(chǎn)物DNA序列為擴增靶序列的交替反向重復(fù)序列，酶切后可得到單一產(chǎn)物。LAMP優(yōu)點為簡便、成本低、更快速；設(shè)備和試劑成本低，時間短；高特異性、高靈敏度；識別6個區(qū)域的4條引物；敏感性比常規(guī)PCR高；高產(chǎn)量、易檢測；產(chǎn)量可達數(shù)十微克，可進行熒光檢測（熒光核酸染料）或濁度（焦磷酸鎂沉淀）檢測。LAMP缺點：更易污染、不方便產(chǎn)物回收及鑒定、設(shè)計空間較受限、擴增產(chǎn)度 500時不能進行長鏈擴增。近幾年發(fā)布（或立項）不少檢測標(biāo)準(zhǔn)（PCR/rPCR)，基本覆蓋主要進境動物疫病項目。國內(nèi)外均有成熟的核酸檢測技術(shù)平臺和商業(yè)服務(wù)平臺（設(shè)備、試劑、技術(shù)服務(wù)）；常見病原體已有商品化核酸檢測試劑盒；基本上較重要的各種動物病原體均有已發(fā)表的PCR檢測方法，全系統(tǒng)普遍具備自行開發(fā)建立特定病原的核酸檢測方法的能力?；蚬こ?、單克隆抗體與蛋白質(zhì)檢測技術(shù)是系統(tǒng)內(nèi)研究開發(fā)檢測方法/檢測試劑盒的熱點方向之一。伴隨著“人類基因組計劃”而衍生的一項重大高新技術(shù)，通過微加工和微電子等技術(shù)在載體表面構(gòu)建微型生物化學(xué)分析系統(tǒng)，實現(xiàn)了對基因、蛋白質(zhì)、細胞、組織以及其他生物組分的準(zhǔn)確、快速、高通量的檢測。生物芯片技術(shù)是分子生物學(xué)技術(shù)與芯片技術(shù)相結(jié)合產(chǎn)生的一項高新技術(shù)。美國是生物芯片技術(shù)最為領(lǐng)先的國家，目前美國生物技術(shù)公司研制的生物芯片已進入實用化、產(chǎn)業(yè)化階段。以生物芯片為核心的相關(guān)產(chǎn)業(yè)正在全球崛起!生物芯片主要包括：按檢測目標(biāo)：基因芯片、蛋白芯片（包括藥殘檢測芯片）、組織芯片、細胞芯片、糖芯片；按載體：固相芯片、液相芯片。（xMAP懸浮芯片技術(shù)）21世紀(jì)初誕生、在流式細胞術(shù)、ELISA技術(shù)和芯片技術(shù)基礎(chǔ)上開發(fā)的新一代分子診斷技術(shù)平臺，有機整合了微球（Beads）、激光檢測技術(shù)、流體動力學(xué)、高速的數(shù)字信號處理系統(tǒng)和強大的計算機運算功能，具有更強的檢測特異性和靈敏性。乳膠微球帶有獨特的色彩編號，每種小球可分別包被抗原、抗體或核酸等特異分子，小球體懸浮于液相體系中構(gòu)成液相芯片系統(tǒng)，可以特異捕獲多達100種不同的目標(biāo)分子實現(xiàn)同步特異檢測，其結(jié)果可在瞬間經(jīng)激光判定后由電腦以數(shù)據(jù)信息的形式記錄下來，敏感性顯著超越抗原抗體結(jié)合酶聯(lián)信號或常規(guī)核酸雜交信號檢測。（DHPLC)技術(shù)變性高效液相色譜（DHPLC)技術(shù)近年來發(fā)展起來的一項高性價比核酸檢測分析技術(shù)，可進行核苷酸片段分離分析、分析檢測已知或未知基因突變及SNP。設(shè)備依托：Transgenomic公司的WAVE174。DNA SepCartridge分離柱采用無孔多苯乙烯二乙烯基苯（PSDVB）共聚物微球 體作為穩(wěn)定基質(zhì)，當(dāng)DNA樣品注入到色譜柱后，通過與緩沖液中的橋分子三乙基胺(TEAA)的相互作用被吸附到固相柱基質(zhì)上，而乙腈可破壞這一相互作用；通過改變流動相中乙腈的濃度實現(xiàn)DNA片段的分離。 生物傳感器（Biosensor）生物傳感器（Biosensor）是將生物體的成份（酶、抗原、抗體、DNA、激素）或生物體本身（細胞、細胞器、組織）固定化在一器件上作為敏感元件的傳感器稱為生物傳感器。根據(jù)生物分子識別元件上的敏感材料可分為：酶傳感器、微生物傳感器、免疫傳感器、組織傳感器、基因傳感器、細胞及細胞器傳感器。能在10s內(nèi)偵檢出微量級生化戰(zhàn)劑，包括委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒、黃熱病毒、炭疽桿菌、流感病毒、鼠疫耶爾森菌、埃博拉出血熱病毒、肉毒桿菌類毒素等；農(nóng)藥、獸藥殘留（農(nóng)產(chǎn)品、食品、環(huán)境監(jiān)測）等方面。顯著提高了實驗室和臨床診斷工作效率，節(jié)省人力、試劑、更為準(zhǔn)確快速，更為安全。自動化設(shè)備的配備和使用將是高端實驗室建設(shè)發(fā)展的主要方向，也將帶動實驗室檢驗?zāi)芰退降奶岣摺?展望隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，動物檢疫的各種技術(shù)也必將不斷地更新、完善和迅速發(fā)展，尤其是速測技術(shù)更能適應(yīng)現(xiàn)代高效、快速的節(jié)奏和滿足社會的要求。為了保障消費者的安全和健康，增強動物產(chǎn)品的國際競爭力，應(yīng)該靈活選擇各種測試技術(shù)，嚴(yán)把動物產(chǎn)品質(zhì)量關(guān)。動物檢驗檢疫技術(shù)體系不可或缺的重要組成部分，現(xiàn)代生物技術(shù)在動物檢疫中的應(yīng)用將日益常規(guī)化，檢測技術(shù)更細化、更精準(zhǔn)；新型技術(shù)平臺的建立和應(yīng)用常態(tài)化；自動化設(shè)備的配備使動物檢疫更加 方便；便攜式檢測工具的開發(fā)和應(yīng)用使實現(xiàn)更多現(xiàn)場更加快速檢測。第二篇：動物檢疫檢疫：是以法律為依據(jù)，國家授權(quán)特定機關(guān)對有關(guān)生物及其產(chǎn)品和其他相關(guān)的商品實施科學(xué)檢驗鑒定與處理，以防止有害生物在國內(nèi)蔓延和國際間傳播的