【正文】 在 ~ ——fs小于 ——fs大于 2．基線、噪音和漂移 基線 ： 當(dāng)沒(méi)有待測(cè)組分進(jìn)入檢測(cè)器 時(shí) ， 反映檢測(cè)器噪音隨時(shí)間 變化的曲線 （ 穩(wěn)定 —平直直線 ） 噪音 ： 儀器本身所固有的 ， 以噪音 帶 表示 （ 儀器越好 ， 噪音越小 ） 漂移 ： 基線向某個(gè)方向穩(wěn)定移動(dòng) （ 儀器未穩(wěn)定造成 ） 3．保留值：色譜定性參數(shù) ? 保留時(shí)間 tR：從進(jìn)樣開(kāi)始到組分出現(xiàn)濃度極大點(diǎn)時(shí) 所需時(shí)間 ， 即組分通過(guò)色譜柱所需要的時(shí)間 ? 死時(shí)間 tm：不被固定相溶解或吸附的組分的保留時(shí) 間 （ 即組分在流動(dòng)相中的所消耗的時(shí)間 ） ， 或流動(dòng) 相充滿柱內(nèi)空隙體積占據(jù)的空間所需要的時(shí)間 ， 又 稱流動(dòng)相保留時(shí)間 ? 調(diào)整保留時(shí)間 tR’：組分的保留時(shí)間與死時(shí)間之差值 ， 即組分在固定相中滯留的時(shí)間 mRR ttt ??39。 色譜法 一般分類 分離方法 固定相 所用平衡 液相色譜 LC LL分離 吸附在固定相表面的液體 不同溶液之間分配平衡 液相 固定相 固定相表面鍵合的有機(jī)相 在液體與固定相表面的分布 液固或吸附 固體 吸附 離子交換 離子交換樹脂 離子交換 尺寸排阻 聚合物中間隙 分布 /篩分 氣相色譜 GC（ 流動(dòng)相為氣體 ） 氣 、 液 吸附在固定相表面的液體 氣配 /氣 液 氣 鍵相 固體表面鍵合的有機(jī)物 氣配 /氣 液 氣 固定體 固體 吸附 超臨界流體色譜 SFC（ 流動(dòng)相超臨界流體 ） 固體表面鍵合的有機(jī)物 超臨界流體與鍵合表面的分配 氣相色譜法 第一節(jié) 概述 氣相色譜法 ： 以氣體為流動(dòng)相的柱色譜分離技術(shù) 一 、 GC分類 1. 按固定相分 氣 固色譜 氣 液色譜 2. 按分離原理分 吸附色譜 分配色譜 3. 按柱子粗細(xì)分 填充柱色譜 毛細(xì)管柱色譜 1載氣鋼瓶； 2減壓閥； 3凈化干燥管； 4針形閥； 5流量計(jì) 。色譜分析法 色譜法的分離原理 ? 利用樣品混合物中各組分理、化性質(zhì)的不同以及在兩相間分配系數(shù)的差異 , 當(dāng)兩相相對(duì)移動(dòng)時(shí)，各組分在兩相中反復(fù)多次重新分配，結(jié)果使混合物得到分離。 ? 兩相中，固定不動(dòng)的一相稱 固定相 (Stationary phase)；移動(dòng)的一相稱 流動(dòng)相 (Mobile phase)。6壓力表； 7進(jìn)樣器； 8色譜柱 。 039。39。39。139。139。239。當(dāng)色譜柱長(zhǎng)度一定時(shí)，塔板數(shù) n 越大 (塔板高度 H 越小 )，柱效能則越高，所得色譜峰越窄。 柱效不能表示被分離組分的實(shí)際分離效果，當(dāng)兩組分的分配系數(shù) K相同時(shí)，無(wú)論該色譜柱的塔板數(shù)多大，都無(wú)法分離。u 產(chǎn)生原因： 樣品在氣液兩相分配，樣品未及溶解就 被帶走，從而造成峰擴(kuò)張 影響因素： 傳質(zhì)阻抗系數(shù)lllg DdfkkCCCC 22)1(32 ???????固定液液膜厚度—df系數(shù)組分在固定液中的擴(kuò)散—lDll DdfC 2??TDl ?? 討論： ? 注： 固定液應(yīng)完全覆蓋載體表面，不可以太薄， 否則柱子壽命短， k太小； T不可以超過(guò)固定液最佳使用溫度 ????lDTdf ????????? 柱效， nHuCCl小結(jié)： 范氏方程說(shuō)明了在色譜分離條件的選擇中，填充 均勻程度、填充物的粒度、流動(dòng)相的種類及流速、 固定相的液膜厚度等對(duì)柱效和峰展寬的影響 分離度 塔板理論和速率理論都難以描述難分離物質(zhì)對(duì)的實(shí)際分離程度。 難分離物質(zhì)對(duì)的分離度大小受色譜過(guò)程中兩種因素的綜合影響：保留值之差 ── 色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素； 區(qū)域?qū)挾?── 色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)因素 。 1．分離度定義式 ? 分離度 ： 相臨兩組分間峰頂間距離是峰底寬平均值的幾倍 （衡量色譜分離條件優(yōu)劣的參數(shù)） 討論： 22112WWttR RR????峰寬和之半）保留值之差（峰頂間距)2(21)1(21122112 )(1 7 )(2WWttWWttR RRRR??????完全未分開(kāi)完全分離基本分離????????????RtRtRRR??令 Wb(2)=Wb(1)=Wb（相鄰兩峰的峰底寬近似相等 ）， 引入相對(duì)保留值和塔板數(shù)，可導(dǎo)出下式： 161112212121121221211212有效nrrWtttrWtttWttWWttRbbbbbRRRRRRRRRR)()()()(39。39。39。39。)()()()()()()()()()()()(?????????????有效有效HrrRLrrRn?????221212221212116116)()(? 結(jié)論： ? 增加柱效 （ n有效 ） 是提高分離度的一個(gè)直接有效手段 ? 提高柱效：增加柱長(zhǎng)；降低板高 ? 根據(jù)速率理論 ， 降低板高 ， 提高柱效的方法是： 1） 采用粒度較小 、 均勻填充的固定相 （ A項(xiàng) ↓ ） 2） 分配色譜應(yīng)控制固定液液膜厚度 （ C項(xiàng) ↓ ） 3） 適宜的操作條件： 流動(dòng)相的性質(zhì)和流速 ， 柱溫等等 （ B項(xiàng) ↓ ） ? 選用分子量較大、線速度較小的載氣 ——N2氣， ? 控制較低的柱溫 第三節(jié) 氣相色譜柱及分離條件的選擇 色譜柱組成 一 、 氣液分配色譜柱 二 、 氣固吸附色譜柱 柱管 填充劑 填充柱： 2~4米柱長(zhǎng) ， 2~6mm內(nèi)徑 毛細(xì)管柱：幾十米 ~幾百米柱長(zhǎng) ~ 固體吸附劑 ——?dú)?固吸附色譜柱 載體 +固定液 ——?dú)?液分配色譜柱 一、氣 液分配色譜柱 ? 固定相：載體 +固定液 （ 一 ） 載體 （ 二 ） 固定液 （一）載體 1． 作用： 承載固定液的作用 2． 要求： 比表面積大 （ 多涂漬固定液 ） 無(wú)吸附性 （ 不吸附被測(cè)組分 ） 化學(xué)惰性 （ 不與固定液發(fā)生化學(xué)反應(yīng) ） 熱穩(wěn)定性好 一定的機(jī)械強(qiáng)度 ， 不易破碎； 顆粒大小均勻 、 適度 。 3． 分類： （ 1） 硅藻土類：具有一定粒度的多孔性固體微粒 紅色：吸附力強(qiáng) ， 與非極性物質(zhì)配伍 白色：吸附力弱 ， 與極性物質(zhì)配伍 紅色擔(dān)體 ：孔徑較小，表孔密集，比表面積較大，機(jī)械強(qiáng)度好。 缺點(diǎn)是表面存有活性吸附中心點(diǎn)。 顆 粒疏松，孔徑較大。但吸附性顯著減小，適宜分離極性組分的試樣。 由四氟乙烯聚合而成，比表面積 m2 / g 適宜分析強(qiáng)極性物質(zhì)和腐蝕性物質(zhì) 上海試劑廠 （二）固定液 1． 要求： （ 1） 操作柱溫下固定液呈液態(tài) （ 易于形成均勻液膜 ） （ 2） 操作條件下固定液熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性好 （ 3） 固定液高沸點(diǎn)難揮發(fā) （ 柱壽命長(zhǎng) ， 檢測(cè)本底低 ） （ 4） 固定液對(duì)樣品應(yīng)有較好的溶解度及選擇性 2． 分類： ? 化學(xué)分類法 ? 極性分類法 ? 化學(xué)分類法 A． 烴