基因工程中的酶ppt課件-展示頁
2025-01-14 09:16本頁面
【正文】 類型 的限制性內切酶。 （ 1）限制（ Restriction） 10 細菌自身的 DNA堿基被 甲基化酶 甲基化修飾所保護，不能被自身的限制性內切酶識別切割。 細菌的 R/M體系類似于免疫系統(tǒng)，能辨別自身的 DNA與外來的 DNA，并能使后者降解掉。 5 一、限制性內切酶概念的提出 寄主控制的限制（ restriction）與修飾 (modification) 現(xiàn)象： 人們發(fā)現(xiàn)侵染大腸桿菌的噬菌體都存在著一些功能性障礙。1 第三節(jié)基因工程中的酶學 關鍵詞： ?了解各種酶在基因工程中的作用 ?掌握限制性內切酶和連接酶的基本特性 ?逆轉錄酶在基因工程中參與了哪些反應？ 2 3 重組 DNA技術中常用的工具酶 工具酶 功能 限制性核酸內切酶 DNA連接酶 DNA聚合酶 I 反轉錄酶 多聚核苷酸激酶 末端轉移酶 堿性磷酸酶 識別特異序列，切割 DNA 催化 DNA中相鄰的 5‘磷酸基和 3’羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，是 DNA切口封合或是 DNA片段連接 ①合成雙鏈 cDNA的第二條鏈 ②缺口平移制作高比活探針 ③ DNA序列分析 ④填補 3’ 末端 ①合成 cDNA ② 代替 DNA聚合酶 I 進行填補，標記或 DNA序列分析 催化多聚核苷酸 5’ 羥基末端磷酸化，或標記探針 在 3’ 羥基末端進行同質多聚物加尾 切除末端磷酸基 4 第一 限制性核酸內切酶 這類酶又簡稱為限制性內切酶或限制酶 。 是一類能夠識別雙鏈 DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并由此切割 DNA雙鏈結構的核苷酸內切酶。即所謂的寄主控制的限制與修飾現(xiàn)象簡稱（ R/M體系）。 6 為什么生物體產生的限制酶，不會損失自身的 DNA呢？？？ 7 R/M體系： 寄主是由兩種酶活性配合完成的 一 種是修飾的甲基轉移酶 另 一種是核酸內切限制酶 8 EcoB核酸酶 和 EcoB甲基化酶 以 λ(k) 噬菌體侵染 9 限
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