20xx年醫(yī)學(xué)專題—參與dna復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)-文庫吧資料
2024-11-04 07:10本頁面
【正文】 鏈局部不被核酸酶降解〕 首先在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)，后來發(fā)現(xiàn)許多種生物中都有這類蛋白質(zhì)。h233。,第三十二頁，共五十二頁。 現(xiàn)在已找到一些酶和蛋白質(zhì)，它們或者能使DNA雙鏈變得易于解開，或者可以使超螺旋分子松弛，以下(yǐxi224。,第三十一頁，共五十二頁。大腸桿菌連接酶那么不行。nɡ)連接一個(gè)切口(nick)而不能連接一個(gè)豁口(gap)(喪失核苷酸)，如圖715所示。,2 DNA連接酶 DNA Ligase DNA連接酶催化一個(gè)DNA鏈的5′磷酸根與另一DNA鏈的3′羥基形成磷酸二酯鍵。 DNA聚合酶ε：功能不詳。 DNA聚合酶γ負(fù)責(zé)線粒體DNA的復(fù)制。 DNA聚合酶γ〔線粒體〕：是一個(gè)大分子酶，在細(xì)胞內(nèi)含量很低，因此不容易純化。,DNA聚合酶β(損傷修復(fù))：為分子量較小(43,000U)的聚合酶。 它同大腸桿菌DNA聚合酶最大不同之處在于不具外切酶活性。最適宜的底物是帶缺口的雙鏈DNA，但是帶引物的變性DNA也是很好的底物。bāo)中活力較高。 目前發(fā)現(xiàn)的真核生物DNA聚合酶有α β γ δ ε 。,E. Coli中的DNA聚合酶,第二十七頁，共五十二頁。,第二十五頁，共五十二頁。ng)，因此不能用于缺口翻譯。 3′→5′和5′→3′的外切酶活性： pol Ⅲ的5′→3′外切酶活性與polⅠ的不同，pol Ⅲ的5′→3′外切酶活性只對 單鏈 DNA有作用(zu242。 亞基β：形成夾鉗，保持催化核心和模板鏈的結(jié)合,第二十四頁，共五十二頁。ng) pol Ⅲ′復(fù)合體。 γ復(fù)合體參加到pol Ⅲ※，進(jìn)一步形成(x237。 θ亞基可能在組裝中發(fā)揮功能。yǒu)合成DNA的能力。,DNA聚合酶 Ⅲ的 “核心酶〞由α、ε、θ三種亞基組成。聚合功能。 DNA pol Ⅲ具有539。z225。,(3) 大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ ▼聚合酶Ⅲ是體內(nèi)DNA復(fù)制所必需的酶 帶有DNA聚合酶 Ⅲ 的溫度敏感突變 (polc) 的大腸桿菌在限制溫度下是不能存活的，從這種菌株得到的裂解液也不能合成DNA，當(dāng)參加正常細(xì)菌的DNA 聚合酶Ⅲ 時(shí)可以恢復(fù)它的聚合能力，因此不同于DNA聚合酶I和Ⅱ，聚合酶Ⅲ是體內(nèi)DNA復(fù)制所必需的酶。 在體外的合成速率比體內(nèi)的速率要低得多，帶有這個(gè)酶缺陷的大腸桿菌突變株染色體的復(fù)制各方面都正常，它在體內(nèi)的功能可能和DNA聚合酶 I 類似。人們開始尋找另外的DNA聚合酶，并于1970年發(fā)現(xiàn)了DNApolⅡ。,〔2〕 大腸桿菌 DNA聚合酶 Ⅱ DNA聚合酶Ⅰ缺陷的突變株仍能生存，這說明DNApolⅠ不是DNA復(fù)制的主要(zhǔy224。i du236。,第二十頁，共五十二頁。ngm237。在兩個(gè)堿基之間切開產(chǎn)生一個(gè)具有5ˊP 末端的不配對堿基的片段。,第十九頁，共五十二頁。,539。,539。 在反響物里參加同位素標(biāo)記的脫氧單核苷酸，DNA聚合酶I 首先利用5ˊ→3ˊ外切酶活性，從切口處逐個(gè)切下DNA上的核苷酸，再利用3ˊOH末端聚合作用逐個(gè)將標(biāo)記的核苷酸加上去(圖7—12)。ngsh237。,第十七頁，共五十二頁。 如圖711，其特點(diǎn)是： ▲ 只能在5ˊP末端一個(gè)接一個(gè)地切除核苷酸； ▲ 能連續(xù)地切除多個(gè)核苷酸； ▲ 只切除配對的5ˊP末端核苷酸，不切除不配對的單鏈5ˊP末端核苷酸； ▲ 既能切除脫氧核苷酸也能切除核苷酸； ▲ 對只具有5ˊP末端的切口也有活性〔由于在DNA復(fù)制過程中一般情況下只在RNA引物處才有缺口，因此5′→3′外切酶活性的主要功能是切除核糖核苷酸
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