研發(fā)部崗前培訓(xùn)細(xì)胞培養(yǎng)-文庫(kù)吧資料
2025-01-24 13:33本頁(yè)面
【正文】 類型： （ 1）玻璃：透明、易觀察、易洗滌、能反復(fù)使用； 缺點(diǎn)：易破碎 （ 2）一次性塑料：常用聚苯乙烯，聚四氟乙烯； 缺點(diǎn)：易產(chǎn)生劃痕，不宜反復(fù)使用 （ 3）微載體：由聚苯乙烯和聚丙烯酰胺制成的小球 體，附著面大，利于大量繁殖細(xì)胞 （ 4）飼細(xì)胞（ Feeder Cells）：也稱滋養(yǎng)細(xì)胞，如 用成纖維細(xì)胞長(zhǎng)成單層后，大劑量射 線照射，細(xì)胞失去增殖能力但尚存活 并有代謝活動(dòng)；再將其它細(xì)胞接種于 其上。此時(shí)細(xì)胞質(zhì)回縮，胞體呈圓球形 10分鐘 ～ 4小時(shí) 貼壁期： 細(xì)胞附著于 底物 上，游離期結(jié)束。C 四、細(xì)胞培養(yǎng)的基本技術(shù) （一）細(xì)胞分離與原代培養(yǎng) 原代培養(yǎng) （ primary culture） 也稱初代培養(yǎng)，指從供體分離得到所需細(xì)胞后，接種于培養(yǎng)器皿，進(jìn)行首次培養(yǎng) 培養(yǎng)材料為血液、胸水、腹水和羊水等細(xì)胞懸液時(shí)，可采用低速離心分離 培養(yǎng)材料為組織塊時(shí)，將組織塊剪切得盡可能細(xì)小，然后用膠原酶或胰蛋白酶進(jìn)一步消化，以獲得細(xì)胞懸液 細(xì)胞分離與原代培養(yǎng) （二）細(xì)胞的傳代 （ secondary culture） 細(xì)胞由原培養(yǎng)器皿內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)器皿的過(guò)程為傳代 貼附細(xì)胞的傳代：多采用含有胰蛋白酶和EDTA的消化液消化傳代，然后以合適比例接種在新的培養(yǎng)器皿內(nèi) 懸浮細(xì)胞的傳代：可直接添加新鮮培養(yǎng)液，或離心收集后換新鮮培養(yǎng)液，再以一定比例稀釋傳代 細(xì)胞系（ cell line）： 在 細(xì)胞 培養(yǎng)中產(chǎn)生了具有無(wú)限增殖能力的變種細(xì)胞，這種細(xì)胞可被無(wú)限的傳代 常見(jiàn)的細(xì)胞系： ? NIH3T3細(xì)胞系： 取自小鼠胚胎細(xì)胞建立 (1963年 ) ? Hela細(xì)胞系： 取自人宮頸癌細(xì)胞建立 (1952年 ) 貼附型細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程 游離期 貼壁期 潛伏期 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 停止期（平臺(tái)期，平頂期） 游離期： 細(xì)胞接種后在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)。 176。大分子：蔗糖、卵黃，穩(wěn)定細(xì)胞膜 復(fù)蘇：手工降溫、程序降溫儀 ——“慢凍速溶” 五、培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境 （一）無(wú)污染環(huán)境 細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)毒、無(wú)菌是首要條件 人體：皮膚、黏膜；免疫系統(tǒng)；解毒器官（肝臟） 體外：保持細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)任何污染，及時(shí)清除代謝物 （二）溫度 人和哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)溫度： 176。 一、細(xì)胞培養(yǎng) (cell culture)的定義 從體內(nèi)取出細(xì)胞，在模擬體內(nèi)生理環(huán)境下（無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)條件），使細(xì)胞生存、生長(zhǎng)并維持其結(jié)構(gòu)和功能的方法。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展，但仍存在一些問(wèn)題。 血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。：融血或微融血的血清 。又可細(xì)分為： ：采血后靜
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