【正文】 ： 不論物理或化學(xué)藥劑，使用的劑量或濃度都會影響作用之效果。含滅菌及消毒。 ?商業(yè)滅菌 (mercial sterilization) 食品經(jīng)殺菌處理後，按其所規(guī)定的微生物檢驗法，在其 所檢之商品中未檢出超出規(guī)定之微生物的一種殺菌法。 ?防腐 (antisepsis) ：防腐劑 利用物理或化學(xué)方式使物體內(nèi)外之微生物 暫時處於不生 長繁殖但又未死亡 的狀態(tài)。 用物理或化學(xué)方式 殺死物體上所有微生物 ，永久性的喪 失其活力包括營養(yǎng)型及孢子型。 微生物的控制 防治微生物的目的，在有效控制微生物的生長及其影響，對有益者則加以利用，對有害者則加以設(shè)法滅除之。 同步培養(yǎng)所得知結(jié)果，其能維持的時間非常有限。 利用 『 螢火蟲發(fā)螢光的原理 』， 而螢火蟲會發(fā)光的原因有 ： 螢光物質(zhì) 螢光酵素 ＡＴＰ 將螢光物質(zhì) 、 螢光酵素加在細(xì)菌 (提供 ATP)上，利用超音波振盪，反應(yīng)後測知螢光量 (光子捕捉器 ) 微生物培養(yǎng)方式 同步培養(yǎng)： 應(yīng)用不同生理調(diào)節(jié)方式或物理法，使同一 菌齡之細(xì)胞增殖以供使用。109g/個 ＝ 107個 每一活細(xì)胞所含 ATP 量是固定值。247。247。 不同生物種類的含量則不同 。 ?生化活性測定： 如 ATP高則菌數(shù)含量高。 利用吸光計：利用固定波長 (500或 650㎜ )照射，測其 光學(xué)密度 (OD值 ) ，值越高菌數(shù)越多。 ?濁度法： ?要完成檢量線。 (死活菌均計 ) 主要是用來測定在某一環(huán)境下微生物的生長狀況及了解其特性 ?計量測定： ?乾燥菌體恆重測之： 將菌液經(jīng)離心使菌體沉下或經(jīng)過濾處理後 ， 菌體以低 溫真空烘乾後 ， 加以秤乾重。 (死活菌均計 ) ?過濾法： 以濾膜過濾菌液，待培養(yǎng)後估算菌落數(shù)。 每一帄盤 (9cm)菌落數(shù)以 30~300個為原則。 微生物的生長 世代時間 (generation time)： 母細(xì)胞經(jīng)二分裂生殖形成兩個子細(xì)胞 所需之時間 。 ?塗抹培養(yǎng) ：將預(yù)先稀釋好的菌液滴在固體培養(yǎng)基上， 再使用塗抹棒將之塗抹開。 ?半固態(tài)穿刺培養(yǎng) ：將菌株以接種針穿刺接種至半固體 培養(yǎng)基中。 (可動態(tài) ) ?斜面培養(yǎng) ：將菌株接種在製成斜面之固體培養(yǎng)基中。 如：加血液 測該菌有無溶血能力。 如：培養(yǎng)基中加入高濃度鹽、抗生素 等。如血清。 培養(yǎng)基種類 ~依作用分 ? 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (basical medium)： 含微生物生長之基本營養(yǎng)素者。 ? 半固體培養(yǎng)基： 培養(yǎng)基中 含 %或更少的洋菜 ，使培養(yǎng)基變成半固體 狀態(tài)，方便觀察微生物在培養(yǎng)基中的運動或產(chǎn)氣體的 情形。 ? 複合培養(yǎng)基： 於化學(xué)合成培養(yǎng)基中，再添加一些有機抽出物的成分 (如：酵母萃取液、牛肉萃取液、血清 )而組成者。 影響微生物生長的因子 外在因子 (環(huán)境因子 )~~Aw或滲透壓 微生物種類 Aw 實例 一般細(xì)菌 金黃色葡萄球菌 一般酵母菌 麵包酵母菌 一般黴菌 醬油黑麴菌 好鹽性細(xì)菌 腸炎弧菌生長在含 3%NaCl之培養(yǎng)基中 耐旱性黴菌 Xeromyces bisoporus 存在半乾性食品 耐滲透壓酵母菌 Zygosaccharomyces蜜餞、果醬 等之腐敗菌 培養(yǎng)基 含微生物生長所需之養(yǎng)分的培養(yǎng)液 培養(yǎng)基種類 ~依組成分 ? 天然培養(yǎng)基： 牛奶、馬鈴薯等含有多樣天然營養(yǎng)素者。 pH的改變會影響細(xì)胞內(nèi)酵素活性，因而影響細(xì)胞的生長。 ? 維生素 以維生素 B群最多，作為輔酵素之構(gòu)成份，重要者有 B泛酸、菸鹼 酸 等。 ? 脂質(zhì) 主要構(gòu)成細(xì)胞膜、核膜、粒腺體膜之成分 (磷脂質(zhì) ) 。 ? 醣類 多存在黏質(zhì)層、莢膜 (多醣體 )、細(xì)胞壁 (勝肽聚醣 )及細(xì)胞質(zhì)中；作為 能量貯存物質(zhì) (如酵母菌的肝醣 )及構(gòu)造物質(zhì) (纖維素 藻類細(xì)胞壁 )用。 甲烯藍與伊紅形成之複合體 可自由進出死細(xì)胞之細(xì)胞膜，與 死細(xì)胞 結(jié)合 常用鑑別染色技術(shù) 染色法 使用染劑 用途 結(jié)果 革蘭氏染色法 (Grams stain) 結(jié)晶紫、碘液 、95%酒精、番紅 分 G(+)與 G() G(+)~紫色 G()~紅色 芽胞染色 (spore stain) 孔雀綠、番紅 分 芽胞及菌體 芽胞 ~綠色 菌體 ~紅色 鞭毛染色 (flagella stain) 明礬、鹼性洋紅 觀察鞭毛 鞭毛 ~紅色 菌體 ~藍色 抗酸性染色 (acid fast stain) 石碳酸洋紅、 酸酒精、甲烯藍 觀察分枝桿菌屬與非抗酸細(xì)菌 抗酸菌 ~紅色 非抗酸菌 ~藍色 莢膜染色法 (capsule stain) 印地安墨 觀察莢膜 莢膜 ~淡藍色透明 菌體 ~藍紫色 微生物的培養(yǎng) 菌體化學(xué)組成份 ? 水分 主要作為代謝時的溶媒。 作用方式： 低濃度作用長時間較高濃度作用短時間較好。 染色技術(shù) 由於微生物之細(xì)胞很小，因此一般光學(xué)顯微鏡並不容易 觀察，所以常需藉助染劑 (Dye)與細(xì)胞間的物理或化學(xué) 作用，使細(xì)胞上色、增加對比以便於觀察 。 ?油浸式：需行高倍率放大時使用。路線呈不規(guī)則，速度緩慢。可觀察出： ?菌體細(xì)胞正常排列方式； ?細(xì)胞分裂時細(xì)胞的變化及其速率； ?運動性的鑑別： ＊自主運動： 鞭毛；路線呈直線規(guī)則，速度快速。 各類顯微鏡用途 ? 標(biāo)本製作法： ?塗抹法：觀察形狀 ， 大小，構(gòu)造 。 電子顯微鏡 檢視 很小的菌體 ，如病毒及菌體之超微小構(gòu)造。 螢光顯微鏡 檢視 螢光反應(yīng) ，可應(yīng)用於螢光抗體技術(shù)，因具有相當(dāng)高之專一性 ,有助於臨床診斷技術(shù)。 種類 應(yīng)用對象 明視野顯微鏡 未染色 之細(xì)菌、黴菌、酵母菌、藻類及原生動物。 位相差顯微鏡 在一般光學(xué)顯微鏡上加特殊之 位相差物鏡 及 聚光器 ，利用菌體各部位密度的差異，對光線折射的不同，藉以分辨活細(xì)胞內(nèi)不同的構(gòu)造。 紫外光會傷害眼睛，不能直接目視需投影至螢?zāi)弧? 暗視野顯微鏡 加裝特殊聚光器 ，誘導(dǎo)透光途徑，使光線自標(biāo)本偏離，造成鏡檢物呈現(xiàn)明亮態(tài)，背景呈現(xiàn)暗影。 微生物 生理 學(xué) 研究微生物體 各胞器機能和生理 之科學(xué)。 ? 例： Escherichia coli Escherichia coli 學(xué)名命名原則 (常見學(xué)名表示法 ) ?屬名 +種名 ?屬名 +Species Bacillus sp. 產(chǎn)生黃色素 ,意指枯草桿菌屬內(nèi)之某一個種會產(chǎn)生黃色素 Bacillus spp. 有產(chǎn)胞能力 ,意指枯草桿菌屬內(nèi)的所有種都具有產(chǎn)胞能力 ?屬名 +種名 +發(fā)現(xiàn)者 + Escherichia coil Castellani ?屬名 +種名 +（原發(fā)現(xiàn)者） +現(xiàn)發(fā)現(xiàn)者 Bacillus subtilus (Ehrenberg) Cohn ?屬名 +新種名 +（原發(fā)現(xiàn)者） +現(xiàn)發(fā)現(xiàn)者 ?屬名 +種名 +var.+變種名 Bacillus subtilus ,意指 Bacillus niger由 Bacillus subtilus 變異而來 命名的依據(jù) ? 形態(tài) Lactobacillus (乳酸桿菌屬 )； Sarcina (八聯(lián)球菌屬 )；Micrococcus (微球菌屬 )； Streptococcus (鏈球菌屬 )；Clostridium (梭狀桿菌屬 ) ? 來源或生存處 Escherichia coli 指存在大腸中 ? 生理狀態(tài) Aerobacter aerogenes生氣體； Acetobacter aceti生醋酸； Clostridium butyrium生丁酸。 命名 ? 1735年，瑞典生物學(xué)家 林奈 氏 (Carolus Linnaeus) 的二名法。 1929年， 佛來明 (Alexander Fleming) ， 發(fā)現(xiàn)青黴菌的代謝物能抑制葡萄球菌的增殖，此代謝物為青黴素 (penicillin)。 發(fā)現(xiàn)菸草鑲嵌病毒，並證明其可通過細(xì)瓷濾器。 並提出 『 柯霍假說 』 。 1876年 德 國 柯霍 (Koch