【正文】 細胞工程 植物細胞工程 動物細胞工程 應(yīng)用 白菜 —甘藍等雜交植物 單克隆抗體的制備（雜交瘤細胞） 意義和用途 (1)克服有性遠緣雜交不親和性障礙； (2)培育作物新品種有 助于疾病的診斷、治療、預(yù)防 高考總復(fù)習(xí) .生物 植物細胞雜交 (番茄 馬鈴薯植株 ) 動物細胞融合 (單克隆抗體制備 ) 過程 第 1步 原生質(zhì)體的制備 (酶解法 ) 正常小鼠的處理 (注射滅活抗原 ) 第 2步 原生質(zhì)體的融合 (物、化法 ) 動物細胞融合 (物、化、生法 ) 第 3步 雜種細胞的篩選和培養(yǎng) 雜交瘤細胞的篩選和培養(yǎng) 第 4步 雜種植株鑒定 提純單克隆抗體 高考總復(fù)習(xí) .生物 植物細胞雜交 (番茄 馬鈴薯植株 ) 動物細胞融合 (單克隆抗體制備 ) 理論基礎(chǔ) 細胞膜的流動性、植物細胞的全能性 細胞膜的流動性、細胞增殖 融合前處理 酶解法除去細胞壁：纖維素酶、果膠酶 注射特定抗原法免疫處理正常小鼠 高考總復(fù)習(xí) .生物 植物細胞雜交 (番茄 馬鈴薯植株 ) 動物細胞融合 (單克隆抗體制備 ) 促融因子 物理法：電刺激、離心、振動；化學(xué)法：聚乙二醇 物、化法：與植物相同；生物法：滅活的仙臺病毒 意義和用途 ① 克服有性遠緣雜交不親和性障礙；②培育作物新品種 ① 制備單克隆抗體；②有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防 高考總復(fù)習(xí) .生物 細胞工程技術(shù) 原 理 植物組織培養(yǎng) 細胞的全能性 植物體細胞雜交 細胞膜的流動性和細胞的全能性 動物細胞培養(yǎng) 細胞分裂 動物細胞融合 細胞膜的流動性 單克隆抗體的制備 理論基礎(chǔ)：一種效應(yīng) B細胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體；技術(shù)原理：細胞膜的流動性、細胞分裂 高考總復(fù)習(xí) .生物 特別提醒 ： ① 理解一組概念：細胞貼壁 、 接觸抑制 、 原代培養(yǎng) 、 傳代培養(yǎng) 。 ⑦ 兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂 ， 都是無性繁殖， 都可稱克隆 ， 都不涉及減數(shù)分裂 。 高考總復(fù)習(xí) .生物 ⑤ 克隆屬于無性繁殖 ， 產(chǎn)生新個體的性別 、 絕大多數(shù)性狀與供核親本一致 。 ③ 該技術(shù)形成重組細胞發(fā)育成一個新個體 ， 體現(xiàn)了細胞核的全能性而非動物細胞的全能性 。 體現(xiàn)細胞膜的結(jié)構(gòu)特點：具有一定的流動性 。 ② 用于治療疾病和運載藥物：主要用于 __________， 可制成 “__________”， 也有少量用于其他疾病治療 。 （ 4） 單克隆抗體的優(yōu)點： __________， __________， 并能 __________。 從血清中分離出的抗體 __________。 （ 3） 動物細胞融合的意義：克服了遠緣雜交的__________， 成為研究細胞遺傳 、 細胞免疫 、 腫瘤和生物新品種培育的重要手段 。 融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞 ， 稱為 __________。 （ 5） 體細胞核移植技術(shù)存在的問題 克隆動物存在著健康問題 、 表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等 。 （ 2） 選用去核卵 (母 )細胞的原因：卵 (母 )細胞比較__________， 容易操作；卵 (母 )細胞細胞質(zhì) __________，營養(yǎng)豐富 。 CO 177。 O2是__________所必需的 ， CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的__________。 細胞貼壁 相互抑制 停止分裂增殖 接觸抑制 無菌 抗生素 血清、血漿 高考總復(fù)習(xí) .生物 ③ 溫度及 pH：哺乳動物的適宜溫度多是 __________； pH為 __________。 ② 營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分包括糖 、 氨基酸 、 促生長因子 、無機鹽 、 微量元素等 。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的 __________， 以防培養(yǎng)過程中的污染 。 細胞數(shù)目不斷增多 ， 當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面 __________時 ， 細胞就會__________， 這種現(xiàn)象稱為細胞的 __________。 （ 2） 動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊 （ 動物胚胎或幼齡動物的器官或組織 ） → 剪碎 → 用 __________處理分散成 __________→ 制成 __________→ 轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行__________培養(yǎng) → 貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù) __________培養(yǎng) 。 故 C錯誤 。 植物體細胞雜交的過程 ， 實際是不同植物體細胞的原生質(zhì)體融合的過程 。 單倍體育種的方法是花藥的離體培養(yǎng) ， 采用的技術(shù)是先用微型繁殖技術(shù)獲得單倍體 ， 然后用秋水仙素處理 ，獲得純合體 。 與試管幼苗技術(shù)比較 ， 人工種子成本低 、 儲藏運輸方便 、 減少了移栽馴化過程和育種年限 。 ④逆性 。③ 快捷高效的繁殖方式 。 天然種子是有性繁殖的 ， 往往雜種優(yōu)勢只能體現(xiàn)在第 1代 ， 第 2代便參差不齊了 。 高考總復(fù)習(xí) .生物 人工種子與天然種子相比 ， 有以下突出的優(yōu)越性： ① 可使在自然條件下不結(jié)實或種子昂貴的植物得以繁殖 。 采用的技術(shù)是微型繁殖技術(shù) ， 首先利用植物組織培養(yǎng)獲得胚狀體 、 不定芽 、 頂芽和腋芽等 ，然后包上人工種皮就形成了人工種子 。注意其取材為植物的分生組織 (如根尖、莖尖 )，是無毒的。 微型繁殖的條件是培養(yǎng)基中加入細胞生命活動所需的水、無機鹽和小分子有機物，還有植物激素，更重要的是所有加入物質(zhì)必須是無菌的，而操作過程也必須在無菌的條件下進行，這樣繁殖的幼苗才是無毒的。繁殖過程的分裂方式是有絲分裂，親子代細胞內(nèi) DNA不變，所以能夠保證親子代遺傳特性不變。 高考總復(fù)習(xí) .生物 五、微型繁殖的繁殖方式與應(yīng)用 微型繁殖就是用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，也叫快速繁殖技術(shù)。 。 。 高考總復(fù)習(xí) .生物 四 、 植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用 。 高考總復(fù)習(xí) .生物 去壁的常用方法：酶解法 （ 纖維素酶 、 果膠酶等 ） 。 因此 ，誘導(dǎo)融合完成后 ， 在容器內(nèi)共有 A原生質(zhì)體 、 B原