db33t537-2005動(dòng)物組織中萊克多巴胺的測(cè)定-文庫(kù)吧資料
2025-07-05 19:08本頁(yè)面
【正文】 50mL。 分析天平 ?！?微孔濾膜 ?！?振蕩器。11 儀器設(shè)備 高效液相色譜儀（配熒光檢測(cè)器）。萊克多巴胺稀釋液 (5μg/mL) 精密量取1ml萊克多巴胺貯備液（），置50mL棕色容量瓶中，用甲醇（）稀釋并定容至刻度，為萊克多巴胺工作液。）：每根柱填料量為500mg，柱體積5mL。 戊烷磺酸鈉溶液：取800mL水，（，C5H11O3SNa?H2O），混勻?！?3％甲醇/乙酸乙酯溶液：取15mL甲醇加乙酸乙酯至500mL，混勻?！?飽和氯化鈉溶液：取過(guò)量氯化鈉溶解于水中而得?！?正己烷?！?無(wú)水硫酸鈉。 乙酸乙酯?！?甲醇。 10 試劑和溶液 除非另有說(shuō)明，本法所用試劑均為分析純，水為去離子水，符合GB/T 6682二級(jí)水的規(guī)定。相對(duì)應(yīng)每一個(gè)樣品的濃度(ng/L)可以從校正曲線上讀出。8 結(jié)果計(jì)算以空白（濃度為0的標(biāo)準(zhǔn)溶液）吸光度值為100%計(jì)算，折算出各標(biāo)準(zhǔn)和樣品的相對(duì)吸光度值。加入100μL底物液到微孔中，充分混合并在室溫孵育38min。加入150μL稀釋的酶標(biāo)記的第二抗體（）37℃孵育30分鐘后倒出孔中的液體，將微孔架倒置在洗水紙上拍打（每輪拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，再加入工作洗液（）250μL，重復(fù)操作兩遍。加入100μL第一抗體溶液到每一個(gè)微孔中，在37℃孵育30分鐘后倒出孔中的液體，將微孔架倒置在洗水紙上拍打（每輪拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，再加入工作洗液（）250μL，重復(fù)操作兩遍?！?測(cè)試程序根據(jù)所測(cè)定樣品及標(biāo)準(zhǔn)數(shù)，計(jì)算出所需微孔條數(shù)，將微孔條插入微孔架，標(biāo)準(zhǔn)和樣品做兩個(gè)孔的平行重復(fù)，記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品的位置?！?樣品處理，加入6mL提取液（），用勻漿器勻漿，加入6mL碳酸鹽緩沖液（），用勻漿器勻漿，再定量加入10mL乙酸乙酯（），振蕩30min；以4000rpm的轉(zhuǎn)速離心5min，氮吹至干?！?分析天平：。 生化培養(yǎng)箱?！?冰箱?！?冷凍離心機(jī)。6 儀器與設(shè)備 微孔板酶標(biāo)儀(帶450nm濾光片)?！?甲醇。 碳酸鹽緩沖液：（Na2CO3?10H2O），（NaHCO3），加水至1000mL，搖勻?！?工作洗液：用水20倍稀釋廠商提供的濃縮洗液。5 5試劑和溶液 除
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