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培養(yǎng)基驗收作業(yè)指導書刪減版-文庫吧資料

2025-06-24 02:47本頁面
  

【正文】 本規(guī)范適用于實驗室微生物檢測中所使用培養(yǎng)基的質量控制。職責: 檢驗人員:按照本規(guī)程規(guī)對培養(yǎng)基使用前及使用過程中進行質量控制,確保培養(yǎng)基符合相關標準的要求??刂拼胧?.1培養(yǎng)基的購置和驗收 培養(yǎng)基的購置試劑管理員在接到批準的采購信息后,從合格供應商中選擇廠商采購,同時要求廠商提供每批培養(yǎng)基的批號、使用前的pH值、儲藏信息、有效期、性能評價記錄(包括測試菌株、技術數據清單、質控證書及必要的安全危害數據)。同時應填寫“培養(yǎng)基驗收檢查記錄單”驗收符合要求后,交由檢測人員接受保管,填寫培養(yǎng)基入庫記錄和建立試劑臺帳。應每月對儲存中的培養(yǎng)基進行常規(guī)檢查,如容器密閉性復查、首次開封日期、內容物的感官檢查,如果培養(yǎng)基發(fā)生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。若發(fā)現培養(yǎng)基受潮或物理性狀發(fā)生明顯改變則不應再使用。4. 3培養(yǎng)基的使用 配制培養(yǎng)基用水和玻璃器皿  培養(yǎng)基制備用水應使用電阻率不小于30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質的水,每周檢測電阻率,每三個月檢測一次重金屬離子含量。 復水   復水時應注意以下事項:a)不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長;b)容器的大小需大于復水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過程中,培養(yǎng)基溢出;c)加熱培養(yǎng)基時一定要進行攪拌,特別是瓊脂類培養(yǎng)基;d)為避免燒焦和沸騰溢出,對于少量的培養(yǎng)基最好使用沸水浴進行加熱;e)含有瓊脂粉的培養(yǎng)基,在加熱溶解之前可以浸泡數分鐘; f)對于瓊脂類培養(yǎng)基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,最多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應棄去;g)燒糊的培養(yǎng)基營養(yǎng)物質被破壞,并可產生有毒物質,如發(fā)現焦化,或未溶解均勻前培養(yǎng)基有溢出,該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。已配制好的培養(yǎng)基必須在15分鐘內滅菌,避免微生物生長繁殖而消耗養(yǎng)分,改變培養(yǎng)基的酸堿度。 pH測定   在初次使用每批培養(yǎng)基時,均需隨同檢測配制一個測試培養(yǎng)基,在滅菌或消毒后應在25℃溫度下采用精密PH 試紙測試PH值,并判斷是否符合要求;使用過程中,如果需要調整培養(yǎng)基的pH,應用1mol/LNaOH或lmol/LHCL調整,注意不可反復調pH,否則會影響培養(yǎng)基的滲透壓。同時填寫配制記錄。在每個已滅菌的培養(yǎng)基容器外做好標記,注明名稱、配制日期、使用期限和配制人。2)保存時限: 基礎培養(yǎng)基應在30天內用完。選擇性分離鑒別培養(yǎng)基制成平板后當日用完,置保鮮膜(袋)密閉保存期限可延長至一周。如2004年6月4日配制的培養(yǎng)基,批號為040604。成品培養(yǎng)培養(yǎng)基的質量控制應包括物理指標和微生物指標的測試,根據測試結果及時填寫“實驗室培養(yǎng)基質量控制性能測試記錄及評估報告 培養(yǎng)基的性能測試 新購的不同批次的商品化培養(yǎng)基在使用前應進行培養(yǎng)基性能測試,包括物理指標和微生物指標的測試,根據測試結果及時填寫“實驗室培養(yǎng)基質量控制性能測試記錄及評估報告,菌株的選擇參考SN/T 《培養(yǎng)基制備指南 第2部分:培養(yǎng)基性能測試實用指南》。 4.5.3微生物學指標控制可根據要求選用定量方法、半定量方法或定性方法(詳見表1表)對培養(yǎng)基性能進行測試,具體操作方法如下:(1)生長率將適量測試菌株的工作培養(yǎng)物接種至固體、半固體和液體培養(yǎng)基中,每種培養(yǎng)基上菌株的生長率應達規(guī)定的最低限值。N0:從一個或多個規(guī)定的參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(該菌落總數應≥100cfu )。2) 半定量方法半定量方法采用生態(tài)測量技術在平板上劃線,平板板連續(xù)劃線區(qū)域得分的總和即為生長指數G,G值不應超過標準規(guī)定的允許范圍。①選擇性將濃度為104CFU/mL~106CFU/mL的非目標菌工作菌株懸浮液接種至選擇培養(yǎng)基和參考培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基的選擇性應達到規(guī)定值。③生理生化特性(選擇性和特異性)規(guī)定培養(yǎng)基的基本特性,使用一套適當的測試菌株對培養(yǎng)基上的目標菌的生理生化特性(菌
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