【正文】 以最低日治療劑量為基礎(chǔ)的生物學(xué)活性的限度。實(shí)際生產(chǎn)中確實(shí)可能存在某些特殊表面，如灌封頭，殘留物溶解后并不均勻分散到整個(gè)批中，而是全部進(jìn)入一瓶產(chǎn)品中。對(duì)于確定的設(shè)備，內(nèi)表面積是定值，批量值應(yīng)取最小批量，以獲取最差情況下的表面殘留物限度。設(shè)下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg)，因殘留物濃度最高為1010－6，即10mg／kg，則殘留物總量最大為B1010－6＝10B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物總量除以測(cè)總內(nèi)表面積，設(shè)設(shè)備總內(nèi)表面積為SA(cm2)，則表面殘留物限度L 為10B／SA(mg／cm2)；為確保安全，一般應(yīng)除以安全因子F，即得L＝10B／(SA從殘留物濃度限度可推導(dǎo)出設(shè)備內(nèi)表面的單位面積殘留物限度(表面殘留物限度)，單位為μg／cm2。驗(yàn)證時(shí)一般采用收集清潔程序最后一步淋洗結(jié)束時(shí)的水樣，或淋洗完成后在設(shè)備中加入一定量的水(小于最小生產(chǎn)批次量)，使其在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)后取樣，測(cè)定相關(guān)物質(zhì)的濃度。對(duì)液體制劑而言，這就是進(jìn)入下批各瓶產(chǎn)品的殘留物濃度。(一) 殘留物濃度限度1010－6－6 將殘留物濃度限度定為1010多為發(fā)達(dá)國(guó)家生產(chǎn)液體制劑如溶液、乳劑等劑型的企業(yè)采用。目前企業(yè)界普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)基于以下原則：① 分析方法客觀能達(dá)到的能力，如濃度限度——百萬(wàn)分之十 (1010－6)；② 生物活性的限度，如正常治療劑量的l／1000；③ 以目檢為依據(jù)的限度，如不得有可見(jiàn)的殘留物?！币簿褪钦f(shuō)，鑒于生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品性質(zhì)的多樣性，由藥品監(jiān)督機(jī)構(gòu)設(shè)立統(tǒng)一的限度標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)方法是不現(xiàn)實(shí)的。 FDA 在其《清潔規(guī)程驗(yàn)證檢查指南》中指出：“FDA 不打算為清潔驗(yàn)證設(shè)立一個(gè)通用方法或限度標(biāo)準(zhǔn)。乳化和化學(xué)反應(yīng)的機(jī)制在微觀上與溶解過(guò)程相似，都有清潔劑分子作用于殘留物表面，使其表面的分子脫離或反應(yīng)生成其他物質(zhì)進(jìn)而溶解，因此宏觀上不容易形成湍流的部位也是難清潔的部位。綜合而言，凡是死角、清潔劑不易接觸的部位如帶密封墊圈的管道連接處，壓力、流速迅速變化的部位如有歧管或岔管處、管徑由小變大處、容易吸附殘留物的部位如內(nèi)表面不光滑處等，都應(yīng)視為最難清潔的部位。這些管道或由于投料時(shí)物料微粒的飛揚(yáng)，或因?yàn)榕渲乒迌?nèi)霧化的小液滴隨充氮、抽真空等工藝過(guò)程四處飄散而可能被污染。對(duì)有多根平行管道尤其是管徑不同的系統(tǒng)，因各管道的流速變化、流量分配各不相同，通常將這些部位列為較難清潔的部位。根據(jù)液體的不可壓縮特性，在沒(méi)有平行管道和分叉的情況下，不管管徑如何變化，管內(nèi)各點(diǎn)的流量必然相同。在已確定清潔劑和淋洗液的情況下，Re 正比于管徑與流速的乘積：Re∝wd比較普遍的在線清洗過(guò)程都有清潔劑在泵的驅(qū)動(dòng)下在設(shè)備與管道中循環(huán)的步驟。當(dāng)Re＜2300 時(shí)，為層流；Re＞10 000 時(shí)，為湍流；2300＜Re＜10 000 時(shí)，為層流和湍流的過(guò)渡階段。流體以何種形式流動(dòng)取決于流體雷諾準(zhǔn)數(shù)Re 的大小。這樣殘留物表面再也不會(huì)形成穩(wěn)定的飽和層，溶解的速度就大大提高了，清潔的效率也隨之提高。流體以湍流形式流動(dòng)時(shí)，雖然宏觀上流體沿管道向一個(gè)方向流動(dòng)，但從微觀上看各質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)速度在大小和方向上都隨時(shí)發(fā)生變化。由此可以推斷，如果清潔劑在待清洗設(shè)備中形成了層流，會(huì)很迅速地在殘留物表面形成一穩(wěn)定的飽和溶液層，殘留物的溶解速度會(huì)急劇下降，這與靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解過(guò)程非常相似，從而清潔效率也隨之明顯下降。層流指流體在導(dǎo)管中流動(dòng)時(shí)，所有質(zhì)點(diǎn)均沿著與管軸平行的方向流動(dòng)。清潔劑與殘留物的相對(duì)運(yùn)動(dòng)從宏觀上可分解為垂直方向和水平方向的運(yùn)動(dòng)。提高溶解速度的方法是使溶液流動(dòng)以迫使溶質(zhì)表面的飽和層離開(kāi)。如果處于飽和層的溶質(zhì)分子不能迅速進(jìn)入溶液深處，就會(huì)降低溶解的速度。一旦差值為零，表面溶解過(guò)程達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，此溶液即為飽和溶液。以溶解為機(jī)制的清洗過(guò)程主要是通過(guò)溶劑(清洗液)對(duì)殘留物的溶解作用以及流動(dòng)的清洗液對(duì)殘留物的沖擊而使附著在設(shè)備表面的殘留物進(jìn)入溶劑中。不管何種機(jī)制，都存在殘留物與清洗液接觸、被潤(rùn)濕、脫離設(shè)備表面等共同的過(guò)程。二、最難清潔部位和取樣點(diǎn)在討論如何確定最難清潔部位前，首先應(yīng)當(dāng)對(duì)清洗的機(jī)制有所了解。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水，因此可將其作為最難清潔物質(zhì)。如當(dāng)存在兩個(gè)以上的活性成分時(shí)，其中最難溶解的成分即可作為最難清潔物質(zhì)論處。通常，相對(duì)與輔料，人們最更關(guān)注活性成分的殘留，因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安全性。在清潔驗(yàn)證中是否需要為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測(cè)呢?這是不切實(shí)際且沒(méi)有必要的。對(duì)于復(fù)方制劑，含有多個(gè)活性成分。驗(yàn)證方案中最關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題為如何確定限度，用什么手段能準(zhǔn)確地定量殘留量，這包括取樣方法和檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證。企業(yè)應(yīng)有足夠靈敏的方法檢測(cè)清潔劑的殘留情況，并有能力回收或?qū)U液進(jìn)行無(wú)害化處理。使用這類(lèi)清潔劑后，還會(huì)帶來(lái)另一個(gè)問(wèn)題，即如何證明清潔劑的殘留達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)?應(yīng)盡量選擇組成簡(jiǎn)單、成分確切的清潔劑。從驗(yàn)證的角度，不同批號(hào)的清潔劑應(yīng)當(dāng)有足夠的質(zhì)量穩(wěn)定性。滿足以上要求的前提下應(yīng)盡量廉價(jià)。人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)在“殘留溶劑指南”將溶劑分為3 個(gè)級(jí)別，對(duì)其使用和殘留限度有明確的要求。此外，要注意裝配期間避免污染設(shè)備和部件。7．儲(chǔ)存規(guī)定已清潔設(shè)備和部件的儲(chǔ)存條件和最長(zhǎng)儲(chǔ)存時(shí)間，以防止再次污染。因此在規(guī)程中可作出類(lèi)似規(guī)定，如：目檢所有設(shè)備的表面，不得有殘余物。6．檢查通常經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的清潔程序應(yīng)保證清潔后的設(shè)備不殘留可見(jiàn)的殘余物。因此對(duì)于須暴露保存的設(shè)備，應(yīng)進(jìn)行干燥。5．干燥根據(jù)需要決定是否進(jìn)行干燥。由于本步驟的目的是除去已溶解的低濃度的殘留物，并使殘留在設(shè)備上的水具有盡可能高的質(zhì)量(最小的可溶性固體，最低的微生物污染水平)，在淋洗水的壓力、流速、淋洗持續(xù)時(shí)間及水溫等諸影響因素中，水溫的重要性相對(duì)下降。如由電腦按預(yù)定程序自動(dòng)執(zhí)行的淋洗程序進(jìn)行淋洗，淋洗的結(jié)果就比較安全可靠。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的類(lèi)型采用符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的純化水或注射用水。為提高淋洗效率，宜采用多次淋洗的淋洗方法。清洗步驟通常溶解了大部分殘留物，但設(shè)備上殘留的清洗液中含水、清潔劑和殘留的產(chǎn)品或原料。配制清潔溶液的水可根據(jù)需要采用飲用水或純化水。為提高清洗效率，可采用多步清洗的方式。應(yīng)明確清潔劑的組成，以便驗(yàn)證時(shí)檢查是否有殘留的清潔劑。如果清潔程序中要使用專(zhuān)用的清潔劑，即在本步使用。這種一致性是進(jìn)行驗(yàn)證的基礎(chǔ)。特別注意檢查不易清潔的部位。因此，操作者判斷預(yù)洗完成與否的標(biāo)準(zhǔn)必須盡可能的明確，特別是應(yīng)檢查的部位。由于操作人員的素質(zhì)及習(xí)慣，從一大堆方案中去選擇應(yīng)當(dāng)采用的方案反而容易造成差錯(cuò)。對(duì)于殘留物物理性質(zhì)差異較大的情況，有的企業(yè)希望制定一份產(chǎn)品與預(yù)洗參數(shù)如水溫、壓力、時(shí)間等一一對(duì)應(yīng)的對(duì)照表，由操作人員按實(shí)際產(chǎn)品選擇參數(shù)。預(yù)洗所使用水質(zhì)不必苛求，通常飲用水或經(jīng)一定程度凈化(如過(guò)濾)的飲用水已經(jīng)足夠。由于清潔規(guī)程往往不是專(zhuān)用的，它需要適用于生產(chǎn)多種產(chǎn)品和濃度或劑量規(guī)格的通用設(shè)備，以簡(jiǎn)化管理及操作，因此需進(jìn)行預(yù)洗。應(yīng)有書(shū)面的、內(nèi)容清晰完整的拆卸指導(dǎo)，最好附有圖表或示意圖，以使操作人員容易理解。二、清潔規(guī)程的要點(diǎn)應(yīng)規(guī)定清潔一臺(tái)設(shè)備需要拆卸的程度。⑧ 連續(xù)生產(chǎn)的最長(zhǎng)時(shí)間。⑥ 淋洗要求。④ 清潔溶液的配制方法。② 所用清潔劑的名稱(chēng)、成分和規(guī)格。從保證清潔重現(xiàn)性及驗(yàn)證結(jié)果的可靠性出發(fā)，清潔規(guī)程至少應(yīng)對(duì)以下方面作出規(guī)定。 不管采取何種清潔方式，都必須制定一份詳細(xì)的書(shū)面規(guī)程，規(guī)定每一臺(tái)設(shè)備的清洗程序，從而保證每個(gè)操作人員都能以相同的方式實(shí)施清洗，并獲得相同的清潔效果。如果生產(chǎn)設(shè)備死角較多，難以清潔，或生產(chǎn)的產(chǎn)品易粘結(jié)在設(shè)備表面、易結(jié)塊，則需要進(jìn)行一定程度的拆卸并用人工或?qū)Ｓ迷O(shè)備清洗。舉例來(lái)說(shuō)，如果設(shè)備體積龐大且內(nèi)表面光滑無(wú)死角；生產(chǎn)使用的物料和產(chǎn)品易溶于水或一定的清潔劑，這種情況下比較適合采用自動(dòng)或半自動(dòng)的在線清洗方式： 清潔劑和淋洗水在泵的驅(qū)動(dòng)下以一定的溫度、壓力、速度和流量流經(jīng)待清洗設(shè)備的管道，或通過(guò)專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的噴淋頭均勻噴灑在設(shè)備內(nèi)表面從而達(dá)到清洗的目的。通常只要將清洗裝置同待清洗的設(shè)備相連接，由清洗裝置按預(yù)定的程序完成整個(gè)清潔過(guò)程，整個(gè)清潔過(guò)程通常不需要人工檢查已清潔的程度，乃至干預(yù)程序的執(zhí)行。 清洗前通常需要將設(shè)備拆卸到一定程度并轉(zhuǎn)移到專(zhuān)門(mén)的清洗場(chǎng)所。手工清潔方式的特征是主要由人工持清潔工具，按預(yù)定的要求清洗設(shè)備，根據(jù)目測(cè)確定清潔的程度，直至清潔完成。4．監(jiān)控及再驗(yàn)證階段對(duì)已驗(yàn)證并投入運(yùn)行的清潔方法進(jìn)行監(jiān)控，對(duì)清潔方法的變更實(shí)行變更管理，根據(jù)監(jiān)測(cè)的結(jié)果來(lái)看各種生產(chǎn)活動(dòng)中，所采用的清潔方法能達(dá)到的實(shí)際效果，以確定再驗(yàn)證的周期進(jìn)行再驗(yàn)證。3．方案實(shí)施階段按照批準(zhǔn)的驗(yàn)證方案開(kāi)展試驗(yàn)獲取數(shù)據(jù)，評(píng)價(jià)結(jié)果，得出結(jié)論。2．方案準(zhǔn)備階段對(duì)生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)行詳細(xì)考察，確定有代表性的，難清潔的部位作為取樣點(diǎn)；計(jì)算設(shè)備的內(nèi)表面積；根據(jù)產(chǎn)品的相關(guān)性質(zhì)選定某種物質(zhì)作為參照物質(zhì)，確定清潔后允許的最大殘留量為 合格標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證中通過(guò)檢驗(yàn)其含量確定設(shè)備清潔的程度，必要時(shí)還要考察清潔的殘留量；根據(jù)驗(yàn)證共同要求制訂并批準(zhǔn)驗(yàn)證方案；開(kāi)發(fā)驗(yàn)證有關(guān)取樣方法和檢驗(yàn)方法，以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。從方法學(xué)上考慮，科學(xué)、完整的清潔驗(yàn)證一般可按以下幾個(gè)工作階段依次進(jìn)行(圖3－1)。驗(yàn)證結(jié)論的準(zhǔn)確性與完整性，是驗(yàn)證的核心。各種版本的GMP都規(guī)定必須對(duì)清潔規(guī)程進(jìn)行驗(yàn)證。書(shū)面的、確定的清洗方法即所謂的清潔規(guī)程，應(yīng)包括清洗方法及影響清潔效果的各項(xiàng)具體規(guī)定，如清洗前設(shè)備的拆卸、清潔劑的種類(lèi)、濃度、溫度、清洗的次序和各種參數(shù)，清洗后的檢查或清潔效果的確認(rèn)等以及生產(chǎn)結(jié)束后等待清洗的最長(zhǎng)時(shí)間及清洗后至下次生產(chǎn)的最長(zhǎng)存放時(shí)間等。設(shè)備的清潔程度，取決于殘留物的性質(zhì)、設(shè)備的結(jié)構(gòu)、材質(zhì)和清洗的方法。通過(guò)有效的清洗，可將上批生產(chǎn)殘留在生產(chǎn)設(shè)備中的物質(zhì)減少到不會(huì)影響下批產(chǎn)品療效、質(zhì)量和安全性的程度。嚴(yán)格地講，絕對(duì)意義上的、不含任何殘留物的清潔狀態(tài)是不存在的。顯然，如果這些殘留的原輔料、微生物和其代謝產(chǎn)物進(jìn)入下批生產(chǎn)過(guò)程，必然對(duì)下批產(chǎn)品產(chǎn)生不良影響。產(chǎn)品生產(chǎn)后，總會(huì)殘留若干原輔料和微生物。生產(chǎn)部門(mén)在收到清潔驗(yàn)證合格證后，可根據(jù)驗(yàn)證的技術(shù)參數(shù)和清潔程序制訂詳細(xì)的清潔操作規(guī)程SOP，并進(jìn)行全面的培訓(xùn)，以確保驗(yàn)證過(guò)程中所使用的程序能切實(shí)得以執(zhí)行。七、驗(yàn)證報(bào)告的審查和批準(zhǔn)驗(yàn)證委員會(huì)應(yīng)按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)驗(yàn)證報(bào)告中所列的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù)、驗(yàn)證過(guò)程和測(cè)試分析結(jié)果逐一加以審查，以確保所實(shí)施的清潔驗(yàn)證對(duì)正常生產(chǎn)過(guò)程中的設(shè)備清潔和質(zhì)量控制具有可重復(fù)性。六、驗(yàn)證報(bào)告的完成清潔驗(yàn)證結(jié)束后，各驗(yàn)證部門(mén)應(yīng)將自己負(fù)責(zé)部分的驗(yàn)證數(shù)據(jù)和資料匯總，并起草相關(guān)部分的報(bào)告，然后交驗(yàn)證部統(tǒng)一匯總，對(duì)每一部分加以復(fù)核，在此基礎(chǔ)上起草一份完整的驗(yàn)證報(bào)告，送交驗(yàn)證委員會(huì)審批。清潔檢查結(jié)束后，檢查者應(yīng)在檢查記錄表上簽名認(rèn)可。7．清潔后的檢查設(shè)備的整個(gè)清潔工作完成后應(yīng)對(duì)清潔工作進(jìn)行檢查，可采用目檢的方法。設(shè)備的干燥一般可采用潔凈的壓縮空氣吹淋、自然干燥或加熱干燥等方法。這些都應(yīng)在各自清潔程序中作明確而詳細(xì)的描述。這些技術(shù)參數(shù)一般應(yīng)包括下列內(nèi)容：清潔前預(yù)處理(刮除或浸泡)，參數(shù)(例如時(shí)間、溫度、溶劑、用量等)，清潔用水的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，持續(xù)洗滌時(shí)間，洗滌水的壓力、流量、溫度和用量，洗滌的次數(shù)，所使用溶劑的名稱(chēng)、濃度和用量，所使用清潔劑的名稱(chēng)、濃度和用量， 水洗的方法(例如電動(dòng)噴射、浸沒(méi)、手工洗滌等)，沖淋水的質(zhì)量，沖淋持續(xù)時(shí)間，沖淋水的壓力、流量、溫度和用量，沖淋的次數(shù)，沖淋的方法，手工清洗用力大小