電泳法和高效毛細管電泳法-文庫吧資料
2025-01-24 18:30本頁面
【正文】 黃芩苷 ? 儀器：高效毛細管電泳 二極管陣列檢測器 (HPCEDAD) ? 毛細管柱長度 58． 5cm 75 μ m，分離電壓 25 kv， ? 進樣量 kPa 8s，分離溫度 25℃ ， ? 緩沖溶液 20mmol/L檸檬酸 +40 mmol/L磷酸氫二鈉 (pH )，檢測波長 232nm。 基本結(jié)構(gòu)： （ 3） 進樣方法 Ⅰ 電動力學(xué)進樣 也稱電遷移進樣 . 樣品 方法 : 將毛細管的進樣端插入裝有試樣溶液的試樣管中，試樣管中插入電極，與檢測端的緩沖液間施加進樣電壓，并維持一定時間，試樣溶液在電泳和電滲流作用下進入毛細管，然后再將試樣溶液換成載體緩沖液，電泳即可進行。)2 實驗上可按上式求出理論塔板數(shù) W189。 2. 背景電流要小到足以克服區(qū)帶電泳效應(yīng) 在毛細管等速電泳中 , 由于沒有一個背景電解質(zhì)支持電流 (毛細管等速電泳要求溶劑的自身電導(dǎo)可以忽略不計 ), 各區(qū)帶互相連接 . 毛細管等速電泳一般用恒流操作模式 . 分離開始后 , 在電壓的作用下 , 各組分由于淌度的不同被分離 . 系統(tǒng)通電后 , 樣品中遷移速度最大的離子運動最快 , 但慢于前導(dǎo)電解質(zhì) . 遷移速度最小的離子運動最慢 , 但快于尾隨電解質(zhì) , 具有不同淌度的離子得到分離。它運載電流并有一定的緩沖能力。 2. 具有極高的分辯率 ， 可以分離等電點相差 . 注意 :電滲流的存在會破壞聚焦區(qū)帶的穩(wěn)定 第 10章 毛細管電泳 分離模式 第 10章 毛細管電泳 分離模式 7 毛細管等速電泳 分離是建立在試樣中各組分的 電泳淌度 不同 ，等速電泳中被分析試樣進樣前后分別使用 前導(dǎo)電解質(zhì)溶液 和 終結(jié) (后繼 ） 電解質(zhì)溶液 ， 分離后的各組分區(qū)帶以相同的電泳遷移速度通過檢測窗口 。 這樣 pI不同的蛋白質(zhì)各組分會在毛細管內(nèi)很窄的不同 pH區(qū)域內(nèi)聚焦 . 3. 在陽 、 陰極電解液中加入鹽如 NaCl或 NaOH,破壞 pH梯度 ， 使各組分蛋白質(zhì)重新帶電 ， 在電場力作用下發(fā)生遷移 、 檢測 ， 使不同組分的蛋白質(zhì)得到分離 。 2. 施加電壓 ， 進行電泳實驗 。 蛋白質(zhì)的等電點 (pI): 指蛋白質(zhì)分子的表觀電荷數(shù)為零時的 pH值 。 例應(yīng)用 CGE分離與激光誘導(dǎo)熒光檢測相結(jié)合 ， 用于 DNA序列快速分析 。 毛細管電泳的原理 1 裝置 毛細管 數(shù)據(jù)處理
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