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常用分子生物學(xué)技術(shù)的原理及其應(yīng)用-文庫吧資料

2025-01-19 22:27本頁面
  

【正文】 PRC 非探針類 探針類 1. TaqMan探針法 2. 分子信標(biāo)探針法 3. FRET探針法 目錄 圖 203 TaqMan探針法實時 PCR原理示意圖 目錄 第三節(jié) 基因文庫 Gene Library 目錄 ? 基因組 DNA文庫 (genomic DNA library) ? cDNA文庫 (cDNA library) ?基因文庫 (gene library) 是指一個包含了某一生物體全部 DNA序列的克隆群體。 539。 上游引物 下游引物 熒光標(biāo)記引物 R Q 339。 539。 目錄 ?實時 PCR技術(shù)原理 Q R 339。 ? 原位 PCR方法彌補了 PCR技術(shù)和原位雜交技術(shù)的不足 , 是將目的基因的擴增與定位相結(jié)合的一種最佳方法 。 ? RTPCR是目前從組織或細(xì)胞中獲得目的基因以及對已知序列的 RNA進(jìn)行定性及半定量分析的最有效方法。 PCR與其他技術(shù)的結(jié)合可以大大提高基因突變檢測的敏感性 。 PCR技術(shù)高度敏感 , 對模板 DNA的量要求很低 , 是 DNA和 RNA微量分析的最好方法 。 目錄 PCR技術(shù)原理示意圖 目錄 ? PCR的基本反應(yīng)步驟 變性 95?C 延伸 72?C 退火 Tm5?C 目錄 ? 模板 DNA ? 特異性引物 ? 耐熱 DNA聚合酶 ? dNTPs ? Mg2+ ? PCR體系基本組成成分 目錄 ?利用特異性引物以 cDNA或基因組 DNA為模板獲得已知目的基因片段 , 或與逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)相結(jié)合 , 直接以組織和細(xì)胞的 mRNA為模板獲得目的片段; ?利用簡并引物從 cDNA文庫或基因組文庫中獲得序列相似的基因片段; ?利用隨機引物從 cDNA文庫或基因組文庫中克隆基因 。 用于蛋白質(zhì)定性定量及相互作用研究。 (二)探針技術(shù) 目錄 二、印跡技術(shù)的類別及應(yīng)用
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