chapter2蛋白質(zhì)-3-蛋白質(zhì)分離技術(shù)介紹-文庫吧資料
2025-01-18 07:51本頁面
【正文】 合的只能是單體 。 (4) 影響因素 影響 SDS復(fù)合物形成的主要因素 。 450 1mR lgMr 兔肌動蛋白 牛血清白蛋白 兔磷酸化酶 牛碳酸酐酶 胰蛋白酶抑制劑 雞蛋清溶菌酶 ： 將未知蛋白的 Rf值查到 log(M)值 ， 便可知其分子量 。不同分子量的亞基受阻程度不同，表現(xiàn)出不同的電泳速度，這樣就把同一樣品中不同大小分子量的亞基分開。 d. 聚丙烯酰胺凝膠分子篩作用 不同濃度的凝膠和交聯(lián)度，形成不同大小的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，它對蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物具有阻滯作用。 蛋白質(zhì)分子解聚后形成的氨基酸側(cè)鏈與 SDS結(jié)合 ， 在 SDS的重量達到蛋白重量的 34倍時蛋白質(zhì)分子表面完全被 SDS包裹 ， 形成 帶負電荷的蛋白質(zhì)亞基分子 ，稱之為蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物 ( proteinSDS micelles)。 蛋白質(zhì)分子在還原劑作用下二硫鍵被還原 ， 將多聚體或單鏈折疊的蛋白質(zhì)分子的二硫鍵打開 ， 形成長短不一的單鏈亞基 。 在電場下向自身電荷相反的方向移動 。主要用于蛋白質(zhì)亞基分子量的測定。 常用的電泳方法有 聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳 等。 ③親和層析 2．蛋白質(zhì)的純化方法 + C C C 配基 蛋白質(zhì) 固體載體 在外電場的作用下，帶電顆粒將向著與其電性相反的電極移動，這種現(xiàn)象稱為 電泳 。 將這種 連接有配基的載體 裝入層析柱中，當(dāng)含有待純化的蛋白質(zhì)溶液通過層析柱時，該蛋白質(zhì)即與配基發(fā)生特異性結(jié)合而被吸附在層析柱上，而其它蛋白質(zhì)則流出柱外。其原理 是不同的蛋白質(zhì)分子 對于固定化在載體上的 特殊配基 具有不同的識別 和 結(jié)合能力 。 用不同濃度的 陽離子洗脫液 ，如 NaCl溶液進行梯度洗脫，通過 Na+的離子交換作用，或是改變流動相的 PH值 ，或是同時采用這兩種方法，可以將帶有不同正電荷的蛋白質(zhì)進行分離。 離子交換樹脂可以分為 陽離子 交換樹脂（如羧甲基纖維素等）， 陰離子 交換樹脂（如二乙基氨基乙基纖維素等）。 因此
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