菌種操作規(guī)程ppt課件-文庫吧資料
2025-01-16 10:18本頁面
【正文】 含量并填寫《 原材料搖瓶考察結(jié)果記錄 》 。 ? 將準(zhǔn)備好的不銹鋼筐放在消毒車上推入消毒柜內(nèi)，按蒸汽消毒柜使用方法用蒸汽消毒， 119～ 121℃ ，保溫 30分鐘，接種用具保溫 60分鐘并填寫 《 搖瓶配制記錄 》 和 《 培養(yǎng)基接種用具消毒記錄 》 。 搖瓶試驗(yàn) ? 發(fā)酵搖瓶配方 ? 發(fā)酵搖瓶配制 ? 發(fā)酵搖瓶接種操作 ? 發(fā)酵搖瓶配方 成分 葡萄糖 酵母粉 PH 配比 8% 2% ～ 規(guī)格 符合驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn) 符合驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn) 發(fā)酵搖瓶配制 ? 稱量時，一般將不溶或難溶物質(zhì)（如酵母粉等）和易溶解物分開稱，根據(jù)發(fā)酵搖瓶培養(yǎng)基配方稱取所需葡萄糖和酵母粉重量，葡萄糖用自來水溶解，酵母粉直接按配比分裝于三角瓶內(nèi)。首先準(zhǔn)備好無菌石棉手套、白工作服和帽，再準(zhǔn)備好工業(yè)酒精、火焰圈和打火機(jī)。 小罐接種操作 ? 本工藝采用菌絲進(jìn)罐和傾倒式接種法。 PH ～ 。 ? 菌濃 不小于 25%。 ? 在發(fā)酵水平出現(xiàn)連續(xù)異常時，應(yīng)對母瓶搖瓶進(jìn)行跟蹤實(shí)驗(yàn)。 ? 種瓶并好后，將瓶口包扎紗布和牛皮紙，等待進(jìn)罐，若母瓶不進(jìn)罐，并瓶后應(yīng)置于 2～ 8℃ 冰箱保存，期限不超過 2天。 ? 并瓶前應(yīng)按 5%的比例對母瓶進(jìn)行抽查，觀察菌絲的外觀，測定菌濃和 PH，并進(jìn)行鏡檢，合格后才可并瓶。 ? 用 10mL吸管吸取 5mL孢懸液接種于母瓶，接種后塞上棉塞，包扎紗布，置 180～ 220轉(zhuǎn) /分搖床上， 28177。 ? 將準(zhǔn)備好的不銹鋼筐放在消毒車上推入消毒柜內(nèi)，按蒸汽消毒柜使用方法用蒸汽消毒， 119～ 121℃ ，保溫 30分鐘，接種用具保溫 60分鐘并填寫 《 母瓶配制記錄 》 和 《 培養(yǎng)基接種用具消毒記錄 》 。 母瓶菌絲的制備 ? 母瓶培養(yǎng)基配方 成 份 葡萄糖 酵母粉 PH 配 比 3% % ～ 規(guī) 格 分析純 符合酵母粉驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn) ? 配制稱量時，一般將不溶或難溶物質(zhì)（如酵母粉等）和易溶解物分開稱，根據(jù)母瓶培養(yǎng)基配方稱取所需葡萄糖和酵母粉重量，葡萄糖用蒸餾水溶解，酵母粉直接按配比分裝于三角瓶內(nèi)。 ? 將接種后的子斜面放置培養(yǎng)間，溫度 28℃ ，濕度 50～70%，培養(yǎng) 7～ 9天，觀察生長情況，并填寫 《 子斜面生長記錄 》 和 《 溫度濕度原始記錄 》 。 ? 主操作用無菌鏟將母斜面上的孢子和菌絲刮下，接種于子斜面中，利用子斜面的冷凝水 ， 將孢子和菌絲打散，均勻涂布于子斜面表面，然后塞上棉塞，用雙層紗布扎口，并將接種鏟在肉湯培養(yǎng)基中蘸一下做無菌試驗(yàn)，將肉湯放置 36～ 38℃ 培養(yǎng)間培養(yǎng)。首先將子斜面和母斜面的雙層紗布解去，將繩子和紗布放在超凈臺左邊待用。 ? 母斜面生長成熟后，取下，無菌試驗(yàn)正常則用 %新潔而滅溶液滅菌后再用牛皮紙?jiān)诤蠓胖帽涞蜏乇２貍溆脺囟?2～ 8℃ ，保藏期不超過 15天；無菌試驗(yàn)不正常則按廢樣液處理辦法處理并填寫 《 廢樣液處理記錄 》 。 ? 用無菌鏟將種液在斜面上劃線，使之均勻分布，然后塞上棉塞，用雙層紗布扎口，并將接種鏟在肉湯培養(yǎng)基中蘸一下做無菌試驗(yàn)，將肉湯放置 37℃ 培養(yǎng)間培養(yǎng)。首先用消毒好的砂輪在安瓿管上端 1/4處劃痕，用紗布包住，掰開上端。 ? 消毒結(jié)束后，取出斜面待溫度降至 40～ 50℃ 時，將大試管或茄子瓶擺成斜面，空白斜面培養(yǎng) 1～ 2天，觀察無雜菌生長后，包裝好備用，并填寫 《 PDA斜面配制記錄 》 和 《 培養(yǎng)基接種用具消毒記錄 》 。 ? 母斜面用 30 200mm的大試管分裝，每支大試管約 20mL；子斜面用茄子瓶分裝，每支約 60mL，裝好后，塞好棉塞，用雙層紗布扎口后，再用牛皮紙?jiān)?，放置在不銹鋼筐中，蓋上牛皮紙，準(zhǔn)備消毒。 ? 用雙層紗布濾出馬鈴薯原液，
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