【正文】 2/4 色譜分析 1 93 B．固定液的最高使用溫度和最低使用溫度 固定液雖是高沸點(diǎn)有機(jī)物 ， 但也不能在太高的溫度下使用 。因此 ， 此類固定液在使用前必須予以精制 。 2022/2/4 色譜分析 1 92 5) 固定液使用中的有關(guān)問題 A． 固定液的純度和精制 固定液是一種高沸點(diǎn)的有機(jī)物 ， 由于固定液的生產(chǎn)過程 、 包裝 、 貯存和供應(yīng)等方面的問題 ， 有時(shí)會(huì)使得固定液中含有影響色譜分析的雜質(zhì) ， 即達(dá)不到要求的純度 。 被分離的樣品為極性物質(zhì)，則一般先用極性固定液。 組合恰當(dāng)，可得很好的分離效果。 2022/2/4 色譜分析 1 86 混合固定相配比選擇 可用窗口法求出合適的固定液比 2022/2/4 色譜分析 1 87 混合固定相配比選擇 2022/2/4 色譜分析 1 88 程序柱 按預(yù)先設(shè)置的程序，按一定方式裝填固定相而制成的柱子。 2022/2/4 色譜分析 1 85 混合固定相 單一固定液不能滿足分離需要時(shí)可考慮用混合柱。 主要的鍵和體系是以 PEG系列為對(duì)象。 推薦用固定相主要有： 2022/2/4 色譜分析 1 83 名 稱 縮寫 麥?zhǔn)? 常數(shù)和 D值 最高使 用溫度 1 角鯊?fù)? SQ 0 0 150 2 甲基硅油 SE30,OV101 205229 100 350 3 苯基 (10%)甲基聚硅氧烷 OV3 423 194 350 4 苯基 (20%)甲基聚硅氧烷 OV7 592 271 350 5 苯基 (50%)甲基聚硅氧烷 DC710,OV17 827884 377 375 6 苯基 (60%)甲基聚硅氧烷 OV22 1075 488 350 7 三氟丙基 (50%)甲基聚硅氧烷 OV10,QF1 15002550 709 275 8 ?－氰乙基 (25%)甲基聚硅氧烷 XE60 1785 821 250 9 聚乙二醇 20220 PEG20M 2308 1052 225 10 聚乙二醇二乙二酸酯 DEGA 2764 1295 200 11 聚丁二醇二乙二酸酯 DEGS 3504 1612 200 12 1,2,3三 (2氰乙氧基 )丙烷 TCEP 4145 1885 175 2022/2/4 色譜分析 1 84 鍵合固定相 以分子鍵的形式將固定液鍵合到適當(dāng)?shù)妮d體上，減少流失損失。 5) 用于合理選擇固定相 (根據(jù)樣品中不同組分的主要性質(zhì)差異，合理選擇相應(yīng)參數(shù)差值大的固定液 )。 3) 判斷峰形好壞 (在某固定相上已拖尾，則在常數(shù)值大的柱上拖尾將更嚴(yán)重 )。 2022/2/4 色譜分析 1 80 3)部分固定液的 McReynods常數(shù)值 固定液 X Y Z U S SE30 16 55 44 66 42 Apiezon L 32 22 15 32 42 XE60 204 381 340 493 367 XF1125 204 381 340 493 367 OV101 17 57 45 67 43 SP2100 17 57 45 67 43 QF1 144 233 355 463 305 PEG 20M 322 536 368 572 510 2022/2/4 色譜分析 1 81 4) 特征常數(shù)的應(yīng)用 1) 判斷固定液性質(zhì) (極性大小、對(duì)哪類樣品保留大 )。麥?zhǔn)险轻槍?duì)該不足而提出，現(xiàn)廣泛采用麥?zhǔn)铣?shù)。 由 Rohrschneider于 1966年首先提出，后由 McReynods修正。l o gitqt??? ????苯環(huán)己烷2022/2/4 色譜分析 1 76 按極性分類的考慮 計(jì)算相對(duì)極性 按 20為一級(jí)分類 1121 0 0 1 xxqqPqq?? ??? ?????2022/2/4 色譜分析 1 77 B. 固定液特征常數(shù)概述 以不同性質(zhì)的多種物質(zhì)分別考察某固定液，將得到不同結(jié)果。 2022/2/4 色譜分析 1 73 2) 選擇性分子間力 2022/2/4 色譜分析 1 74 固定液分類 按極性分 ：可根據(jù)被測(cè)物極性的大小來查閱，方便地尋找極性相似的固定液作替代品 按官能團(tuán)分 ：便于了解固定液的類別，可由結(jié)構(gòu)考慮來選擇固定相 2022/2/4 色譜分析 1 75 A. 按極性分類的考慮 方法： 選 3根柱子： β,β’氧二丙腈，角鯊?fù)?，待測(cè)柱 選兩個(gè)評(píng)價(jià)物：苯 —— 環(huán)己烷測(cè)相對(duì)保留值 計(jì)算相對(duì)極性： 39。 換言之，分子間引力存在某種選擇性。當(dāng)它們互相適應(yīng)時(shí)就能相互耦合，發(fā)生較強(qiáng)作用，宏觀體現(xiàn)為后出峰。 2022/2/4 色譜分析 1 72 1) 集團(tuán)結(jié)構(gòu)適應(yīng)理論 在色譜分離中，有許多反常例子，出峰順序與常規(guī)分子間作用力大小有違（ 20種典型化合物在 12種固定相上 201個(gè)相對(duì)保留數(shù)據(jù)中有 66個(gè)與預(yù)測(cè)值不相符）。 主要有 色散力 (非極性或弱極性分子之間的一種作用力 ) 誘導(dǎo)力 (極性分子與非極性分子之間使非極性分子極化而產(chǎn)生的力 ) 2022/2/4 色譜分析 1 71 分子間作用力 定向力 (極性分子間的永久偶極矩所引起分子間的一種作用力 ) 氫鍵作用力 (特殊的定向作用力 ) 選擇性分子間作用力 的研究有很好前景。 用于分離強(qiáng)腐蝕性和強(qiáng)極性化合物 2022/2/4 色譜分析 1 69 2. 氣液色譜固定液 為高分子有機(jī)化合物，在操作溫度下必須呈液態(tài)，基本要求為： 1) 對(duì)組分有良好的選擇性 ：使樣品中各組分能彼此分離 2) 蒸氣壓低 ：減少色譜柱固定液的流失 3) 熱穩(wěn)定性和潤濕性好好 ：保證柱效 4) 化學(xué)惰性好 ： 不與組分、載體、載氣發(fā)生不可逆的化學(xué)反應(yīng) 5) 凝固點(diǎn)低，粘度適當(dāng)，成分穩(wěn)定 ： 2022/2/4 色譜分析 1 70 分子間作用力 各組分之所以能在色譜柱中被分離，決定于分子間作用力的大小。 2022/2/4 色譜分析 1 68 載體名稱 硅藻土載體 玻璃球 石英球 氟 塑 料 化學(xué)組成 多孔的硅藻土顆粒內(nèi)含 SiO2(60～90%) Fe2O3﹤ 10%,Al2O339～ 50%,MgO少量。 2022/2/4 色譜分析 1 67 2. 非硅藻土載體 有多種類型，主要有： 1) 高分子小球 ：（如前述） 2) 氟載體：可分析腐蝕性氣體或強(qiáng)極性物質(zhì)，但柱效不高，且裝填困難。 2022/2/4 色譜分析 1 66 3) 吸附作用的消除 酸洗 ：目的是除去載體表面上鐵等金屬氧化物 堿洗 ：目的是除去載體表面 Al2O3等酸性雜質(zhì) 硅烷化 ：目的是消附載體表面的硅醇基團(tuán)，減弱生成氫鍵作用力 。 3)熱穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度好 ：保證柱效 4)粒度均勻：便于填充 2022/2/4 色譜分析 1 63 硅藻土 載體 (Diatomite Suport) 由具有一定氣孔的單細(xì)胞海藻殘骸堆積而成，因此硅藻土保持了海藻的多孔結(jié)構(gòu) . 2022/2/4 色譜分析 1 64 1) 硅藻土 載體性質(zhì) 兩種硅藻土載體的化學(xué)組成、內(nèi)部結(jié)構(gòu)基本相似，但表面結(jié)構(gòu)大不相同，性能也不同。 惰性固體 —— 載體 有機(jī)化合物 —— 固定液 2022/2/4 色譜分析 1 62 1. 氣液色譜載體 分為硅藻土和非硅藻土兩大類，基本要求為： 1) 表面積大，孔徑均勻 ：承載更多固定液，并使液膜薄而均勻。 2022/2/4 色譜分析 1 57 Poropak 固定相結(jié)構(gòu) 苯乙烯 二乙烯苯共聚體小球 2022/2/4 色譜分析 1 58 碳分子篩分離含硫化合物 2. 硫化氫 3. 氧硫化碳 4. 三氧化硫 5. 甲基硫醇 6. 二硫化碳 2022/2/4 色譜分析 1 59 上試 402有機(jī)載體 (1)水 (2)甲酸 (3)乙酸 (4)丙酸 (5)丁酸 粒度： 20/80目， 柱長： 2米 Ф4mm， 柱溫： 160℃ 載氣： H2 25ml/分 2022/2/4 色譜分析 1 60 Poropak Q 測(cè)溶劑中水 英寸 (0D)SS. Porapak Q(150200目 ) TC=220℃ , He 37ml/min, TCD 2022/2/4 色譜分析 1 61 167。 多孔硅膠 (Porasil系列等 )：分離性能提高。 2022/2/4 色譜分析 1 55 2022/2/4 色譜分析 1 56 新型氣固色譜固定相 石墨化炭黑 (Cabopack系列， GCB系列 )：加熱使炭黑成片狀石墨化結(jié)構(gòu)，選擇性提高，色譜峰形改善。 2022/2/4 色譜分析 1 48 167。 浙江省關(guān)于色譜方面的網(wǎng)站有： sepu . 色譜柱系統(tǒng) Chromatographic Column System 2022/2/4 色譜分析 1 47 色譜柱是色譜分析的心臟 色譜分析是分離方法，完成分離任務(wù)的色譜柱十分重要。 全國色譜學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)和浙江省色譜學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)均每?jī)赡昱e辦一次 ， 全國會(huì)議每次能征集到論文 500篇以上 ， 省會(huì)議也能征集到60篇以上 。 2022/2/4 色譜分析 1 43 手冊(cè) 手冊(cè)是最方便地查閱相關(guān)文獻(xiàn)的工具 ， 盡管所列數(shù)據(jù)并非最新的 。 2022/2/4 色譜分析 1 42 雜志 《 色譜 》 ， 1984年創(chuàng)刊 ， 刊登各種原始論文和綜述 ， 為雙月刊 。 液 相 色 譜 雜 志 （ J, of Liquid Chromatography） , 1978年創(chuàng)刊 ,主要發(fā)表HPLC的研究報(bào)告 。 2022/2/4 色譜分析 1 41 雜志 色層法 （ Chromatographia） ， 1968年創(chuàng)刊 ，多科性國際雜志 ， 亦稱色譜快報(bào) ， 文章以英文 、法文 、 或德文發(fā)表 ， 并附有三種文字的摘要 。MPLfS S dLppM M S MMMBDA d HuudkkH q u H t uDkkdd kH u H uDD k???? ? ? ?????? ? ?? ? ?? ? ?2022/2/4 色譜分析 1 35 色譜理論 —— 速率理論 可圖示為： 2022/2/4 色譜分析 1 36 色譜理論 —— 速率理論 最低板高： 最佳流速： m in 2H A B C??/optU B C?色譜參考資料 2022/2/4 色譜分析 1 38 專著 ? 史堅(jiān)編， 《 現(xiàn)代柱色譜分析 》 ，上海科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社， . ? 達(dá)世祿編 《 色譜學(xué)導(dǎo)論 》 武漢大學(xué)出版社，. ? 周良模等編著， 《 氣相色譜新技術(shù) 》 ，科學(xué)出版社， . ? 盧佩章等 《 色譜理論基礎(chǔ) 》 科學(xué)出版社，1989年第一版， 1997年第二版 . 專著 ? 任惠敏主編的 《 色譜技術(shù)叢書 》 化學(xué)工業(yè)出版社，一套 13本，涵蓋所有色譜技術(shù)： 色譜分析概論 離子色譜方法及應(yīng)用 色譜定性和定量 毛細(xì)管電泳技術(shù)及應(yīng)用 氣相色譜檢測(cè)方法 色譜分析樣品處理 液相色譜檢測(cè)方法 色譜聯(lián)用技術(shù) 氣相色譜方法及應(yīng)用 色譜柱技術(shù) 高效液相色譜方法及應(yīng)用 色譜儀器維護(hù)與故障排除 平面色譜方法及應(yīng)用 2022/2/4 色譜分析 1 40 雜志 色譜科學(xué)雜志 （ J， Chromatography Sci）1963 年創(chuàng)刊 , 原 名 氣 相 色 譜 雜 志 （ J,Gas Chromat） ,1969年改為現(xiàn)名 ,主要發(fā)表氣相 、液相原始論文和總結(jié)性文章 （ 英文 ） 和色譜標(biāo)準(zhǔn)圖譜 。 1139。239。 也可把 Van Deemter方程描述為： 2222 2 22 0 . 0 1 82( 1 ) ( 1 )fPPgLdD k d kH d U UU k D k D???? ? ? ? ? ? ???/H A B U C U? ? ?2022/2/4 色譜分析 1 33 色譜理論 —— 速率理論 與氣相色譜不同 ， 液相色譜有其特點(diǎn) ， 因而其速率理論的表述方式也有區(qū)別： E L S M M SMH H H H H H? ? ? ? ?各