重組人干擾素生產工藝(精品ppt)(參考版)
2024-11-19 22:01本頁面
【正文】 ,。檢查: 緩沖液的pH值和電導值。接種：接入50L種子罐，接種量10%。)特點：發(fā)酵過程，隨后變性、復性過程。此外還能增強巨噬細胞外表表達Fc受體，促進巨噬細胞吞噬免疫復合物、抗體包被的病原體和腫瘤細胞。)。ir243。i)、剩余DNA 干擾素結構鑒定：紫外光譜，肽譜，N端序列 其他：熱原，內毒素，殘留抗生素,第四十四頁，共四十五頁。)工程,干擾素鑒別試驗 干擾素效價測定 蛋白質含量，純度測定，分子量 宿主剩余蛋白(d224。,第四十三頁，共四十五頁。lǜ)分裝,0.22 μm濾膜過濾干擾素溶液 分裝 －20℃以下(yǐxi224。 合并干擾素局部,第四十二頁，共四十五頁。,(5)凝膠過濾(gu242。 濃縮：10 ku超濾膜進行。 上樣，相同緩沖液沖洗(chōngxǐ)。,〔4)陽離子交換層析(c233。 濃縮：調整溶液和電導，10 ku超濾膜，醋酸緩沖液〔〕中透析。zhī)。,(3)陰離子交換(jiāohu224。 透析除鹽：調整溶液，電導值，10 ku超濾膜，0.005 M緩沖液?！▂232。,第三十八頁，共四十五頁。 疏水層析：干擾素吸附(xīf249。ndi224。,第三十七頁，共四十五頁。 檢查: 緩沖液的pH值和電導值。)純化緩沖液： 超純水，磷酸緩沖液，0.45 μm濾器和10 ku超濾系統(tǒng)，百級層流下收集。ngjiě)粗干擾素,配制(p232。nɡ suō) 陽離子交換層析與濃縮 凝膠過濾層析 無菌過濾分裝,第三十六頁，共四十五頁。,、干擾素純化工藝(gōngy236。)沉淀，粗干擾素，4℃保存。)別離,鹽析: 4M硫酸銨，2℃～10℃，攪勻,靜置過夜。,第三十四頁，共四十五頁。ndi224。,(3)離心(l237。 加凝聚劑醋酸鈣溶液: 2℃～10℃,攪拌15min，對菌體碎片、DNA等進行沉淀。 pi224。ndi224。,第三十二頁，共四十五頁。li232。 jiě),裂解緩沖液：純化水配制，2℃～10℃〔〕 使用保護劑：EDTA，PMSF。 jiě) 預處理 初級別離,第三十一頁，共四十五頁。l237。)過程 、干擾素的純化工藝過程,第三十頁，共四十五頁。l237。,第二十九頁，共四十五頁。nli224。nli224。 菌體保存：－20℃冰柜，不超過12個月。,．菌體收集(shōuj237。 檢測(jiǎn c232。 4h后：20℃，DO為60%，5～。 控制：級聯調節(jié)通氣量和攪拌轉速。,3.3 發(fā)酵罐培養(yǎng)(p233。 檢測：顯微鏡和LB培養(yǎng)基劃線檢查，控制雜菌。 培養(yǎng)：30℃。,3.2 種子(zhǒng zi)罐培養(yǎng),接種(jiēzh242。2h 檢測：OD值和發(fā)酵液雜菌檢查。iyǎng),取保存工作(gōngzu242。)過程,第二十五頁，共四十五頁。,第二十四頁，共四十五頁。x236。nl236。,第二十三頁，共四十五頁。 菌落：直徑2.53.0 mm，灰綠色半透明狀,粘稠。ng)菌的特性,〔1〕具有宿主菌的特征： 細菌：革蘭氏陰性菌，有莢膜，無芽孢(y225。n)的工程菌 獲得原始菌種,第二十二頁，共四十五頁。n),轉化假單胞桿 篩選高表達、穩(wěn)定遺傳(y237。,第三步：工程菌構建(ɡ242。)載體構建,? IFN基因與表達載體連接 ? 轉化(zhu
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