遺傳工程ppt課件(2)(參考版)
2024-09-22 20:25本頁(yè)面
【正文】 其優(yōu)點(diǎn)是該方法無(wú)宿主限制，可以對(duì)任何基因型材料進(jìn)行轉(zhuǎn)化研究 第四節(jié) 轉(zhuǎn)基因生物的檢測(cè)與鑒定 PCR Southern blot Northern blot Western blot 性狀 （表型）鑒定 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 PCR Southern blot 第五節(jié) 基因工程的應(yīng)用 一、基因工程的應(yīng)用 轉(zhuǎn)基因植物 抗除草劑、抗蟲(chóng)、抗病、 抗逆的優(yōu)良品系或品種， 很多已經(jīng)大面積種植推 廣。 圖 1215 棉花轉(zhuǎn)基因植株生產(chǎn)過(guò)程 F 1. 共培養(yǎng) 2. 在選擇培養(yǎng)基上篩選 3. 篩選獲得的抗性愈傷 5. 胚萌發(fā)成苗 6. 轉(zhuǎn)基因植株移栽大田 4. 抗性愈傷分化成胚狀體 二 、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化 基因槍法 \生物彈法 \微粒槍法 \微粒轟擊法 依賴高速的金屬微粒將外源基因?qū)牖罴?xì)胞的一種轉(zhuǎn)化技術(shù)。② TLDNA區(qū) 。人工合成基因可以由 DNA自動(dòng)合成儀來(lái)完成 四、重組 DNA分子 第三節(jié) 外源基因的導(dǎo)入 一、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化 根癌農(nóng)桿菌 (Ti質(zhì)粒 ) 致毒區(qū) Ti 質(zhì)粒復(fù)制起始點(diǎn) 冠癭堿代謝 酶編碼基因 與 Ti 質(zhì)粒轉(zhuǎn)移功能 有關(guān)的遺傳座位 冠癭堿合成基因 T DN A 區(qū) 右邊界 生長(zhǎng)素合成基因 細(xì)胞分裂素合成基因 左邊界 發(fā)根農(nóng)桿菌 (Ri質(zhì)粒 ) 發(fā)根農(nóng)桿菌侵染后植物細(xì)胞產(chǎn)生許多不定根，這種不定根生長(zhǎng)迅速，不斷分枝成毛狀，故稱之為毛狀根 (發(fā)狀根 ) Ri質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)與 Ti質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)很相似，可以分為 T區(qū)、 vir區(qū)、 ori區(qū)和其它區(qū)域等幾個(gè)部分。其原理是根據(jù)待擴(kuò)增基因的序列合成引物，使兩個(gè)引物序列之間的基因序列獲得大量擴(kuò)增，產(chǎn)生大量的基因拷貝用于研究 基因的人工合成 對(duì)于已知核苷酸序列、分子量較小的基因可以通過(guò)化學(xué)合成法制備基因。從基因庫(kù)中分離基因，首先要構(gòu)建基因文庫(kù) （ 1）構(gòu)建基因文庫(kù) 基因組文庫(kù)： 使用與切割質(zhì)粒相同的限制性內(nèi)切酶，將供體生物體的基因組 DNA切成許多片段，然后將其連接到載體上構(gòu)成的一個(gè)重組 DNA群體 cDNA文庫(kù)： 以 mRNA為模板，在反轉(zhuǎn)錄酶作用下，合成 cDNA，將其與適當(dāng)載體連接并轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增構(gòu)建成的基因庫(kù)。分離與鑒定基因是 DNA重組中的關(guān)鍵步驟之一。 可插入達(dá) 300kb 左右的 DNA片段 酵母 人工染色體 （ YAC） YAC載體可以插入 大片段的 DNA （ 12Mb），成為 人類基因組計(jì)劃（ HGP）的一種重要 工具 三、基因分離方法 一個(gè)基因就是編碼一條多肽鏈的一個(gè) DNA片段，包括啟動(dòng)子、終止子及內(nèi)含子。 Ti質(zhì)粒是約 150200kb
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