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專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)(參考版)

2025-05-10 18:16本頁面
  

【正文】 這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。 ? 植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相同之處是:培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。 ? 花藥出現(xiàn)污染的原因 : ? ( 1)消毒不徹底;( 2)接種室污染;( 3)人為因素的交叉污染等。 實驗操作 ? 二、材料的消毒 ? 三、接種和培養(yǎng) ? 四、結(jié)果分析與評價 ? 能夠通過鏡檢找到處于適宜的發(fā)育期的花粉。通過染色,可以確定細(xì)胞核為單核期還是雙核期,是單核居中期還是單核靠邊期。 ? 確定花粉發(fā)育時期最常用方法:醋酸洋紅法;焙花青-鉻礬法。 ? ( 2)此外,親本植株的生長條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度對誘導(dǎo)成功率都有一定的影響。 ? ( 1)接種的花藥時期:一般來說,在 單核期 ,細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)時,花藥培養(yǎng)成功率最高。 ③兩個精子和一個營養(yǎng)核的基因型相同。 注意 : ①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。 外植體為體細(xì)胞,染色體數(shù)無需加倍。(主要原因是 營養(yǎng)核和生殖核融合 造成的。 如果花藥開裂釋放出胚狀體,則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株,必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培養(yǎng)基上,否則這些植株將很難分開。 一般經(jīng)過 2030天培養(yǎng)后,會發(fā)現(xiàn)花藥開裂,長出愈傷組織或釋放出胚狀體。 通常每瓶接種花藥 710個,溫度控制在25℃ 左右,不需要光照。 (三)接種和培養(yǎng) 滅菌后花蕾,要在無菌條件下除去萼片和花瓣,并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。但是,某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,需采用焙花青 鉻礬法 ,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成 藍(lán)黑色 。 實驗操作 一、材料的選取 二、材料的消毒 三、接種和培養(yǎng)
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