發(fā)酵條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)ppt課件(參考版)
2025-05-09 18:05本頁(yè)面
【正文】 。 洗滌與純化： 12022rpm(擬為 4000)離心10min,獲取沉淀 ， 用 2M尿素洗滌 2次 (擬刪 )，得到包涵體的粗提物； 稱取包涵體的重量 ， 以此初步判斷每組培養(yǎng)條件下重組大腸桿菌的蛋白表達(dá)量； 采用正交實(shí)驗(yàn)直觀分析法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 ， 確定較優(yōu)的培養(yǎng)基濃度 。 五 、 實(shí)驗(yàn)步驟 １ 、 將重組大腸桿菌接種于 LB液體培養(yǎng)基中 ，37℃ 振蕩培養(yǎng)過夜 ， 做為液體種子備用；（ 老師已準(zhǔn)備好 ） ２ 、 根據(jù)文獻(xiàn)和初步研究結(jié)果 ， 確定基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分：蛋白胨 、 酵母提取物 、 氯化鈉 ，其基礎(chǔ)濃度為１ %、 %、 1%； ３ 、 采用三因素 、 三水平正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) ， 配制 9組不同培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng) ， 每組 3個(gè)重復(fù)； （ 5ml/支 ） 配 PBS、 裂解液 、 2M尿素 培養(yǎng)基 、 PBS 121℃ 、 20min高壓蒸氣滅菌 ， 待冷卻后 ， 按 5%接種量接種 ， 放入 37℃ 液體搖床 250rpm， IPTG誘導(dǎo)后繼續(xù)震蕩培養(yǎng)
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