【正文】 常規(guī)標(biāo)本對待 反饋結(jié)果 結(jié)果分析 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 無室間質(zhì)評的檢測項目應(yīng)進行實驗室間比對或用其他方法驗證其檢測結(jié)果的可靠性 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 謝 謝 。 3SD、組均值 177。藥物是否能徹底清除病毒還要根據(jù)肝臟酶學(xué)、病毒血清學(xué)標(biāo)志物及核酸結(jié)果綜合考慮，僅有核酸陰轉(zhuǎn)而其他指標(biāo)不改變并不能證明臨床痊愈。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 結(jié)果解釋 臨床可以肺結(jié)核患者痰涂片陰性，而 TB菌 PCR陽性或時陰時陽，可能患者為初起病間斷排菌且排菌量不大所致；或經(jīng)抗結(jié)核治療后，常有矛盾報告 [培養(yǎng)（ ）、 PCR（ +）較多 ]，因為只要有 TB靶片段存在， PCR即可陽性，而測得陽性，不一定有活菌，加之病情與菌量不一定成正比。如果低于檢測下限，但又有擴增曲線，則應(yīng)重新檢測，仍低于檢測下限，則報告為 “ 低于檢測下限 ” 。 定量檢測 1）結(jié)果在檢測范圍內(nèi)，則按檢測的結(jié)果直接發(fā)報告。如重復(fù)試驗 Ct值 40判為陽性，否則判為陰性 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 結(jié)果報告 定性檢測 定性檢測的結(jié)果報 “ 陰性 ” 或 “ 陽性 ” 。如重復(fù)試驗 Ct值 30判為陽性，否則判為陰性。如果檢測結(jié)果至少 1次為 Ct40判斷為陽性，否則判為陰性。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 實驗灰區(qū)標(biāo)本的處理 定性測定中處于實驗灰區(qū)的標(biāo)本應(yīng)重復(fù)檢測一次，灰區(qū)范圍的確定及結(jié)果報告應(yīng)遵從各試劑制造商推薦的要求。 以上幾項標(biāo)準(zhǔn)均達到要求后，當(dāng)日實驗有效，可以發(fā)放報告。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 實驗結(jié)果有效性判斷標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)準(zhǔn)曲線平滑均勻，斜率、截距和相關(guān)系數(shù)等參數(shù)的數(shù)值允許變化范圍均應(yīng)在試劑制造商推薦的范圍內(nèi)。而擴增效率相近與否，反應(yīng)在擴增曲線圖上就是曲線的平行性。如果有上揚趨勢，有可能造成陰性標(biāo)本誤判。擴增效率越高，試劑靈敏度表現(xiàn)會越好。 基線值（閾值）設(shè)定：遵從廠商規(guī)定 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 如羅氏 LightCycler儀器基線設(shè)定 在陰性對照線上 與所有擴增曲線相交 相交點在曲線的平滑區(qū) 位置盡可能 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 總體看曲線拐點清楚，指數(shù)期明顯，擴增曲線整體平行性極好，基線平無上揚現(xiàn)象，低濃度樣本擴增曲線指數(shù)期明顯。 擴增條件一致的不同檢測項目同時擴增時不得使用同一套標(biāo)準(zhǔn)品。 標(biāo)本處理嚴格按照試劑說明書進行操作，應(yīng)做到處理時間充分，保證標(biāo)本中的 DNA或 RNA完全釋放； 將提取的核酸加到反應(yīng)體系中后，應(yīng)將純化好的剩余核酸樣本凍存，以免在擴增檢測時出現(xiàn)意外需要重新檢測。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 失控原因分析 —陰性質(zhì)控樣本的失控原因 擴增產(chǎn)物的 “ 污染 ” 臨床標(biāo)本的核酸提取過程中發(fā)生的標(biāo)本間的交叉 “ 污染 ” . 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 避免基因擴增檢驗假陽性結(jié)果的措施 嚴格的實驗室分區(qū) 使用帶 “ 濾芯 ” 的吸頭 設(shè)立 “ 陰性 ” 質(zhì)控（與標(biāo)本同時處理） 使用防 “ 污染 ” （含 UNG）的 PCR試劑 臨床 “ 假陽性 ” 問題：病原微生物如結(jié)核桿菌經(jīng)藥物治療后已死亡，但 PCR仍可為陽性，故治療結(jié)束后至少兩周內(nèi)不宜做 PCR檢測。 試劑的問題。 儀器的問題。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 臨床基因擴增檢驗室內(nèi)質(zhì)量控制操作 前 20個數(shù)據(jù)使用即刻法，可對第 3－ 20個數(shù)據(jù)進行質(zhì)控判斷 第 21個數(shù)據(jù)開始使用常規(guī)質(zhì)控方法進行質(zhì)控判斷 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 失控原因分析 —陽性質(zhì)控樣本常見的失控原因 核酸提取中的隨機誤差。 當(dāng) SI上限 和 SI下限 值之一 n3s對應(yīng)的值時 ， 說明該質(zhì)控測定值的變化已超出 3s， 屬 “ 失控 ” 。 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory SI值表 n n3s n2s n n3s n2s 3 12 4 13 5 14 6 15 7 16 8 17 9 18 10 19 11 20 上 海 市 臨 床 檢 驗 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 質(zhì)控結(jié)果的判斷 SI上限 和 SI下限 值均 表中 n2s對