生物化學(xué)試驗(yàn)基礎(chǔ)ppt課件(參考版)
2025-05-04 13:17本頁面
【正文】 蒸餾水 是經(jīng)過多次蒸餾得到的，有一次、二次之分，一般的有機(jī)雜質(zhì)可以去除，但是無機(jī)離子還是存在。 比色法的定量方法： ① 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 : 將一系列濃度不同的 標(biāo)準(zhǔn)溶液 按照一定操作過程顯色后 ， 分別測(cè)吸光度 (A)， 以 A為縱坐標(biāo) ， 濃度為橫坐標(biāo)制標(biāo)準(zhǔn)曲線 (至少要 5點(diǎn) )。 現(xiàn)今使用的分光光度計(jì)大多采用光電管或光電倍增管作為檢測(cè)器。 3 吸收池 吸收池的種類很多，其光徑可在~10cm之間，其中以 1cm光徑吸收池最為常用。色散元件常用 棱鏡和光柵 。 紫外光源 氘燈 (180400 nm) (氣體放電光源 ) 可見光源 鎢燈 (3502500nm) (熱輻射光源 ) ? 光 源 氘燈 氫燈 鎢燈 單色器的主要組成：入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準(zhǔn)直鏡等部分。 光源： 提供符合要求的入射光。 在紫外光區(qū)只能用石英比色皿 。 熱輻射光源 用于可見光區(qū)，如鎢絲燈和鹵鎢燈 ,鎢燈和碘鎢燈可使用的范圍在 350 ~ 2500 nm； 氣體放電光源 用于紫外光區(qū)，如氫燈和氘燈。 紫外 可見分光光度計(jì) 基本結(jié)構(gòu) : 光源 → 單色器 → 吸收池 → 檢測(cè)器 → 信號(hào)顯示系統(tǒng) ↑ 樣品 光源 單色器 吸收池 檢測(cè)器 信號(hào)顯示系統(tǒng) ? 組 成 部件 光源 單色器 檢測(cè)器 顯示 主要部件 光源： 用于提供足夠強(qiáng)度和穩(wěn)定的連續(xù)光譜。 （ 2）溶液的不均性。 偏離朗伯 比耳定律的因素 （ 1）入射光為非單色光 （ 3）光程的不一致性。 c為吸光物質(zhì)濃度， l為透光液層厚度。 5 )紫外 可見吸收光譜的應(yīng)用 紫外 可見吸收光譜除主要可用于物質(zhì)的 定量分析 外，還可以用于物質(zhì)的 定性分析、純度鑒定 。 ?溫度 在室溫范圍內(nèi)，溫度對(duì)吸收光譜的影響不大。 4) 影響紫外 可見吸收光譜的因素 ?物質(zhì)的吸收光譜與測(cè)定條件有密切的關(guān)系。 （ 2）同一種物質(zhì)濃度不同，其吸收曲線形狀相似λ max不變。吸光度最大處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)稱為最大吸收波長(zhǎng)λ max 。 在吸收曲線中，通常選用最大吸收波長(zhǎng)λmax進(jìn)行物質(zhì)含量的測(cè)定。 3) 紫外 可見吸收光譜 ?物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收 物質(zhì)對(duì) 光 的吸收是 選擇性 的，利用被測(cè)物質(zhì)對(duì)某波長(zhǎng)的光的吸收來了解物質(zhì)的特性，這就是 光譜法的基礎(chǔ) 。 (4 ) 精密度和準(zhǔn)確度較高 。 (2) 靈敏度高 。 ? 分光光度法 ：使用分光光度計(jì)進(jìn)行吸收光譜分析的方法。溶液中物質(zhì)選擇性的吸收可見光中某種顏色的光，溶液就會(huì)呈現(xiàn)出一
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