第二章核酸的化學(xué)(參考版)
2024-10-28 14:26本頁(yè)面
【正文】 主要特征 ： ； 3′端有 CCAOH的共有結(jié)構(gòu)； 二氫尿嘧啶（ D）； 密碼環(huán)上的反密碼子與mRNA相互作用； 環(huán)上的核苷酸數(shù)目可以變動(dòng)； T和ψ； 變核苷酸。要特別注意核酸的二、三級(jí)結(jié)構(gòu)中堿基的配對(duì)規(guī)律。結(jié)合有機(jī)化學(xué)把嘌呤和嘧啶的基本結(jié)構(gòu)搞清楚，同時(shí)把核酸中存在的 A、 T、 U、 C、 G的結(jié)構(gòu)記熟。 認(rèn)識(shí)核酸在生物科學(xué)上的重要性及其實(shí)踐意義。 、嘧啶、核苷、核苷酸和核酸在分子結(jié)構(gòu)上的關(guān)系。 提要 本章主要介紹核酸的化學(xué)本質(zhì)、結(jié)構(gòu)和功能。 不利： 引起某些疾病的廣泛流行和使某些細(xì)菌失去對(duì)抗菌素的敏感性，或者使某些酶或激素失去應(yīng)有的生物活性等。 實(shí)驗(yàn)室中將細(xì)菌作材料研究遺傳工程過(guò)程可分為： （ 1）重組 DNA分子（基因重組）；（ 2）將重組 DNA引入受體細(xì)胞（轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)）。流感、肝炎、帶狀皰疹、脊髓灰質(zhì)炎、白血病、煙草斑紋病。 鐮刀型紅細(xì)胞貧血 和 白化病 (albinism)。 （四） DNA與細(xì)菌轉(zhuǎn)化 一種細(xì)菌的遺傳性狀因吸收了另一種細(xì)菌的 DNA而發(fā)生改變的現(xiàn)象，稱為細(xì)菌的轉(zhuǎn)化。 生物遺傳的變異起源于 DNA堿基配對(duì)的改變，有的由于DNA堿基的顛倒（如 TA被顛倒為 AT）或被調(diào)換（如 GC被換為 TA）；有的由于在 DNA復(fù)制過(guò)程中被遺漏了一對(duì)或多了一對(duì)核苷酸，或者在轉(zhuǎn)譯時(shí)發(fā)生了差誤，如氨酰 tRNA合成酶錯(cuò)將一個(gè)結(jié)構(gòu)與正常氨基酸十分相似的物質(zhì)交給tRNA。 （二）核酸與蛋白質(zhì)的生物合成 DNA轉(zhuǎn)錄為 mRNA是有選擇的， tRNA和 rRNA也是 DNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。在遺傳過(guò)程中 DNA的具體作用 ：（ 1） 在細(xì)胞分裂時(shí)按照自己的結(jié)構(gòu)精確復(fù)制傳給后代； （ 2） 作為模板將所貯遺傳信息傳給 mRNA。 七、核酸的序列測(cè)定 目前多采用 Sanger的酶法和 Gilbert的化學(xué)法 O HOH2C H H OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N N N H H H H 9 腺嘌呤 ddATP P P P 八、核酸的生物學(xué)功能和實(shí)踐意義 核酸是基本遺傳物質(zhì)，在蛋白質(zhì)的生物合成上又占有重要位置，因而在個(gè)體的生長(zhǎng)、生殖、遺傳、變異和轉(zhuǎn)化等一系列生命現(xiàn)象中起決定性作用。 Southern印跡法 ：將電泳分離后的 DNA片段從凝膠轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，再進(jìn)行雜交。 原位雜交技術(shù) ：直接用探針與菌落或組織細(xì)胞中的核酸雜交，未改變核酸所在的位置。 影響復(fù)性速度的因素： （ 1）單鏈片段濃度 （ 2）單鏈片段的大小 （ 3）片段內(nèi)重復(fù)序列的多少 （ 4）溶液離子強(qiáng)度的大小 （ 5）溶液溫度的高低 （ T – 25℃ ） （六）分子雜交 ：在退火條件下，不同來(lái)源的 DNA互補(bǔ)區(qū)形成氫鍵，或 DNA單鏈和 RNA鏈的互補(bǔ)區(qū)形成 DNARNA雜合雙鏈的過(guò)程。 （ 4）變性劑如甲酰胺、尿素、甲醛等破壞氫鍵，妨礙堿基堆積，使 Tm下降。 70 75 80 85 90T /℃A /260nmTm Tm 影響 Tm的因素： （ 1） GC的相對(duì)含量 （ G+C） % =（ Tm — ） （ 2）介質(zhì)離子強(qiáng)度低， Tm低。 DNA變性是個(gè)突變過(guò)程，類似結(jié)晶的熔解。 0220 240 260 280 300波長(zhǎng) /nm光吸收（三）核酸結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性 ； ； 。 （二）核酸的紫外吸收性質(zhì) 核酸 的堿基具有共扼雙鍵，因而有紫外吸收性質(zhì)，吸收峰在 260nm（ 蛋白質(zhì) 的紫外吸收峰在 280nm）。 DNA對(duì)堿穩(wěn)定。 ， RNA為白色粉末，不溶于有機(jī)溶劑。 RNA在 DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯中均有一定的調(diào)控作用，與某寫(xiě)物質(zhì)的運(yùn)輸
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