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[農(nóng)學(xué)]第七章植物花藥和花粉培養(yǎng)及單倍體育種(參考版)

2025-03-25 06:54本頁面
  

【正文】 從中選出具有優(yōu)良性狀的個體,直接繁育成新品種;或選出具有單一優(yōu)良性狀的個體,作為雜交育種的原理材料。 選擇合適的供體植株( F1?) 倍性鑒定或染色體加倍 花藥和花粉培養(yǎng)基本流程: 一、花藥與花粉培養(yǎng) (略 ) 二、單倍體育種 單倍體 (haploid): 指細(xì)胞中含有正常體細(xì)胞的一半染色體數(shù),即具有配子染色體數(shù)目的個體。 DNA含量測定 核體積測量法 生化與分子標(biāo)記鑒定 一、花藥與花粉培養(yǎng) 單倍體植株的染色體加倍 為什么要進(jìn)行染色體加倍? 對單倍體植株進(jìn)行加倍主要采用化學(xué)誘變法,常用的誘導(dǎo)劑包括秋水仙素、 8羥基喹啉、對二氯苯等。 細(xì)胞形態(tài)學(xué)鑒定法: 葉片保衛(wèi)細(xì)胞大小、單位面積上的氣孔數(shù)及保衛(wèi)細(xì)胞中葉綠體的大小和數(shù)目與倍性具有高度的相關(guān)性。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 一、花藥與花粉培養(yǎng) 單倍體植株倍性鑒定 (為什么要進(jìn)行倍性鑒定? ) 誘導(dǎo)效率低,且獲得的花粉植株是混合群體 ! 1)直接 鑒定: 也叫染色體直接計數(shù)法, 通常取根尖、莖尖等分生組織區(qū)進(jìn)行制片,直接計數(shù)染色體數(shù)目。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 預(yù)處理: 花粉或花藥從植株上取下來直接培養(yǎng),往往誘導(dǎo)頻率極低,采用低溫、高溫、離心等預(yù)處理方法可以促進(jìn)花粉啟動,提高再生頻率?;ㄋ幗M織的存在對小孢子的胚性分裂具有明顯的促進(jìn)作用。 培養(yǎng)基: 基因型不同,所需培養(yǎng)基種類,蔗糖濃度以及添加激素種類和濃度不同。一般田間比溫室,幼齡比老齡植株易于培養(yǎng)。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 取花蕾(鏡檢) 預(yù)培養(yǎng)數(shù)天 取花藥 消毒 分離花粉 接種 培養(yǎng) 愈傷組織發(fā)生 一、花藥與花粉培養(yǎng) 基因型: 不同基因型的培養(yǎng)難易及植株再生有很大差別。 微室培養(yǎng) 利用小的蓋玻片和凹穴載玻片形成微室進(jìn)行花粉培養(yǎng) 條件培養(yǎng) 利用培養(yǎng)過花藥的液體培養(yǎng)基或含失活花藥提取物的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)基制作方法:先鋪一層瓊脂固體培養(yǎng)基,凝固后,在表面加入少量液體培養(yǎng)基。 液體培養(yǎng) 花粉懸浮在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),需震蕩,以利通氣。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 花粉分離收集 花粉純化:需經(jīng)過篩、梯度離心、收集等步驟。 磁攪拌法 :利用機(jī)械力使花藥壁破裂至花粉溢出的方法。 2)自然散落法: 將花藥接種于液體培養(yǎng)中,使花粉自然釋放,再進(jìn)行收集培養(yǎng)。方法: 1)機(jī)械擠壓法:主要有擠壓法和研磨過濾收集法 擠壓法: 是將花藥消毒后,加入少量的分離溶液,用鑷子或小玻璃棒將花粉從花藥中擠壓出來,通過不銹鋼網(wǎng)或尼龍網(wǎng)篩去組織碎片,收集懸浮液,然后用 30%蔗糖離心收取懸浮在蔗糖溶液上層的完整花粉粒,再
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