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質粒dna的提取和鑒定(參考版)

2024-10-21 10:27本頁面
  

【正文】 倒去上清夜,把Eppendorf管倒扣在吸水紙上,吸干液體 1ml 70%乙醇洗滌質粒 DNA沉淀,振蕩并離心,倒去上清夜,真空抽干或空氣中干燥 TE 緩沖液,使 DNA完全溶解( 20℃ 保存) 酶切鑒定 10μL 溶液 + 10 內切酶緩沖液 2μL + 5~ 10U酶 到一 Eppendorf管 37 ℃ , 12h 加 2μL 的反應中止液。因此, 凝膠電泳 不僅可分離 不同相對分子質量 的 DNA,也可以 分離相對分子質量相同,但構型不同的 DNA分子 :其中超螺旋結構泳動最快,其次為線性結構,最慢的可能是 復制中間體 (沒有復制完的兩個質粒連在一起), 而不是 開環(huán)結構 (用 EcoRI來線性化質粒后
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