食品質(zhì)量與安全實驗技術(shù)6食品安全現(xiàn)代生物檢測技術(shù)武漢工業(yè)學(xué)院(參考版)
2025-01-11 12:28本頁面
【正文】 依據(jù)核酸雜交的原理檢測樣品中的特定基因序列；蛋白質(zhì)芯片以蛋白質(zhì)為探針，依據(jù)抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)原理檢測樣品中的特定蛋白質(zhì)。而目前正在研究的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品所涉及的基因數(shù)量有上萬種，今后都有可能進(jìn)入商品化生產(chǎn)，顯而易見對進(jìn)出口產(chǎn)品的檢測，需要有更有效的、快速、特別是高通量的檢測方法，最近幾年出現(xiàn)的生物芯片技術(shù)能較好地解決這一問題。 ? （ 三）生物芯片與轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 ? 就目前轉(zhuǎn)基因食品檢測中常用的 ELISA和 PCR技術(shù)而言，最大的缺點是檢測范圍窄，效率低，無法高通量大規(guī)模地同時檢測多種樣品，尤其是對轉(zhuǎn)基因背景一無所知的情況下。 ? DNA的質(zhì)量分析 ? ? CaMV35S啟動子的定量 PCR反應(yīng) ? （ 2）定量競爭 PCR法 PCR反應(yīng)實質(zhì)是對特定模板 DNA的指數(shù)擴(kuò)增放大，而在相同的條件下，獲得 DNA的量與最初模板DNA的濃度成正相關(guān)，競爭定量 PCR就是依據(jù)這種擴(kuò)增 DNA與模板 DNA之間的濃度相關(guān)性設(shè)計的。例如，一般700mg的玉米粉可提取 lμg DNA。 ? （ 1）半定量 PCR法 ? ①樣品 DNA的提取和定量。為此，研究者在定性篩選 PCR方法的基礎(chǔ)上發(fā)展了不同的定量 GMO的 PCR檢測方法。 PCR擴(kuò)增待檢樣品中的靶標(biāo) DNA； ? ③觀測 PCR產(chǎn)物：通過凝膠電泳分析將PCR產(chǎn)物展現(xiàn)； ? ④確定結(jié)果：有時為了避免假阻性，還需要對 PCR產(chǎn)物進(jìn)行限制性酶切分析進(jìn)行質(zhì)量控制。 ? (二） PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品的檢測 ? ? （ 1） PCR基本原理 PCR技術(shù)由美國 Centus公司Kary Mullis發(fā)明， 20世紀(jì) 90年代逐漸成熟應(yīng)用。 ? ? ? 特異性高，獲得結(jié)果快，儀器簡單，易于操作，對人員要求不高。 ? ELISA分析法必須具備待檢測的固定相抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體、酶作用的底物三種試劑，且滿足兩個前提條件： ? 待檢測的抗原或抗體能夠結(jié)合到不
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