遺傳學(xué)---第四章遺傳圖的制作和基因定位(參考版)
2024-12-11 12:32本頁面
【正文】 ? 頭部滿裝機(jī)制 。 ③溫度敏感 用 h＋ r和 hr＋ 共感染 噬菌體染色體在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制 噬菌體染色體間發(fā)生重組 噬菌體組裝、細(xì)菌裂解、子噬菌體釋放 噬菌體遺傳重組原理示意圖 二、噬菌體的遺傳重組與作圖 接種在 合培養(yǎng)物上 h ＋ r ＋ ＋ h r重 組值 ＝總 噬菌斑 數(shù) 100 ％ 三基因之間的距離 可能的排列順序 再作雜交： rbrc+ rc+rb 結(jié)果表明： rcrb的重組值 rbh 所以 h位于 rb及 rc之間，排列順序為 rbhrc T2 噬菌體的連鎖圖是環(huán)狀的，所以 2， 3排列都對。 噬菌體的重組作圖 一、常用的表型特征 ①宿主范圍 (host range) 野生型 h＋ ：能感染 ,不能感染 B/2,噬菌斑半透明； 突變型 h：二者均可感染，噬菌斑透明。 三個基因間的排列順序 ② 重組值的計算 a+b+供體 → ab受體 (局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) ) (1)產(chǎn)生機(jī)制 (2)低頻轉(zhuǎn)導(dǎo) (lowfrequency transduction, LFT) 由于不正常環(huán)化現(xiàn)象發(fā)生的頻率較低，在釋放出的 106個噬菌體中只有 1個 gal＋ 轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體感染受體，因此轉(zhuǎn)導(dǎo)的頻率很低，稱為 低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)。 判斷細(xì)菌基因間的位置關(guān)系 以普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體 P1為例，測定大腸桿菌的 leu、 thr、azi三個基因的順序。 ②特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)：噬菌體只能轉(zhuǎn)移細(xì)菌染色體的特定部分，如 ?噬菌體。 后來發(fā)現(xiàn)這種過濾因子是一種溫和噬菌體 P22。 ? 附加體： ?噬菌體 既可整合在細(xì)菌染色體上，又可游離于細(xì)胞質(zhì)中。 ? 原噬菌體：整合到宿主染色體中的噬菌體基因組。 ? 溫和噬菌體的增殖周期： ①溶菌周期：細(xì)菌受到感染后，噬菌體迅速增殖，菌體被裂解，噬菌體釋放。 ? 類型： ①烈性噬菌體：使宿主發(fā)生裂解的噬菌體。 性導(dǎo)：利用 F’因子將供體細(xì)胞的基因?qū)胧荏w形成部分二倍體 的過程。 ? 例如 ： 根據(jù)中斷雜交試驗 已 知 lac 和 ade 基因是緊密連鎖的，而且 lac 比 ade 先進(jìn)入受體。 表明大腸桿菌的染色體是環(huán)狀的。 五、中斷雜交作圖 ? 根據(jù)供體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的順序和時間繪制連鎖圖的技術(shù)。 ： (1)染色體重組頻率高，比 F+ F 高 1000倍； (2)F因子轉(zhuǎn)移頻率低， F→ F+ 很少或沒有。 因此， F+品系又稱為 低頻重組品系 (low frequency rebination， Lfr)。 (2) 染色體重組頻率低； 106 。 未攜帶 F因子的菌株為受體菌或雌性，用 F－ 表示。 Davis(1950) U型管實驗 結(jié)論：接合過程是一種單向轉(zhuǎn)移，從供體到受體。 ? 培養(yǎng)基中含有某些代謝產(chǎn)物，混合后這些產(chǎn)物互相補(bǔ)充了對方的不足而得以在基本培養(yǎng)基上生長 。 ② 觀察轉(zhuǎn)化頻率： AB共轉(zhuǎn)化頻率與 A、 B各自轉(zhuǎn)化的頻率相近，表明 ；相差很遠(yuǎn)，表明 。 ② 工程轉(zhuǎn)化 （ engineered transformation） 通過某種處理使細(xì)菌能夠攝入外源 DNA，如大腸桿菌 的轉(zhuǎn)化。 ? 轉(zhuǎn)導(dǎo) ：由噬菌體所介導(dǎo)的 DNA從供體菌到受體菌的 轉(zhuǎn)移 。 ? 世代周期短： 20分鐘一代 ? 容易獲得各種突變型 ① 合成代謝 缺陷型 (營養(yǎng)缺陷型 ) ② 分解代謝 缺陷型 ③ 抗性突變型 ? 易培養(yǎng)，可長期保藏 細(xì)菌之間遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)移方式 ? 轉(zhuǎn)化 ：細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收裸露的 DNA。 ？ 根據(jù) MII期的子囊數(shù)目， ? PD＝ NPD，兩個基因位于著絲點的異側(cè)； ? PDNPD，兩個基因位于著絲點的同側(cè)。 T NPD + PD + T 100% 兩基因間的距離 = 重組子數(shù)目 總后代數(shù) 100% 進(jìn)行分類； ； ； ； ； 。 例： ab ++的雜交： ? PD型子囊是由 無交換 或 二線雙交換 產(chǎn)生； ? NPD型子囊是由 四線雙交換 產(chǎn)生； ? T型子囊是由 單交換 或 三線雙交換 產(chǎn)生。 ? 四型 (T) ：四個孢子中有四種基因型，兩種與兩
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