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多重不對(duì)稱擴(kuò)增介紹(參考版)

2025-05-19 01:38本頁(yè)面
  

【正文】 ? PP5/Oligo 6+ OMP 6(目前芯片組設(shè)計(jì)多重不對(duì)稱擴(kuò)增采用的軟件) 多重不對(duì)稱 PCR步驟 引物設(shè)計(jì)( PP5/OLIGO6) BLAST驗(yàn)證引物特異性 OMP軟件驗(yàn)證引物二聚體評(píng)價(jià) 每對(duì)引物進(jìn)行單擴(kuò)并驗(yàn)證不對(duì)稱擴(kuò)增引物最佳比例 將所有引物并入一貫體系進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 選出出現(xiàn)問題的引物進(jìn)行重新設(shè)計(jì) 。 多重不對(duì)稱 PCR設(shè)計(jì)軟件 ? PrimerPlex(付費(fèi)) —— 一款設(shè)計(jì)特征寡核苷酸片斷、用于同時(shí)分析 100種核酸序列的工具。通過金納米顆粒介導(dǎo)進(jìn)行的不對(duì)稱 PCR,可以獲得與普通不對(duì)稱 PCR更好的效果。 ? 設(shè)臵限制性引物量后,再通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證限制性引物濃度和非限制性引物濃度的比例,目前常用比例 1:1: 1: 1:1 1:20進(jìn)行優(yōu)化,一般情況下, 1:1:20比例情況下效果可能更佳。 ? 不對(duì)稱 PCR設(shè)計(jì)在于控制限制性引物(低濃度引物)的絕對(duì)量,限制性引物過多或過少,均不利于SSDNA的制備。 不對(duì)稱 PCR設(shè)計(jì) ? 設(shè)計(jì)不對(duì)稱 PCR引物時(shí),限制性引物的 Tm值較非限制性引物 Tm值高 4~6176。 缺點(diǎn) ?
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