動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備(參考版)
2025-05-16 09:14本頁面
【正文】 目前以油菜小孢子作為轉(zhuǎn)基因受體已得到轉(zhuǎn)基因植株。有些植物可以產(chǎn)生多胚種子，即 2～ 3個(gè)胚共處于一個(gè)種皮中，這樣的種子可以形成單倍體植株； （ 4）花藥或花粉培養(yǎng)。由于遠(yuǎn)緣雜交，雖然不能受精，但在遠(yuǎn)緣物種的花粉誘導(dǎo)下，卵細(xì)胞可以在未受精情況下發(fā)育成胚，這種情況在馬鈴薯、大麥、小麥、玉米中都可以發(fā)生； （ 2）物理和化學(xué)誘變。植物上自發(fā)產(chǎn)生單倍體的植物很多，如番茄、棉花、咖啡、甜菜、大麥、小麥、油菜等，共有約 10個(gè)科 26個(gè)屬 36個(gè)種的植物可以自發(fā)產(chǎn)生單倍體。單倍體可以自發(fā)產(chǎn)生，也可以誘發(fā)產(chǎn)生。該過程即為雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。然后檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體（常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法），那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用 “ 有限稀釋法 ” 來選擇。我們知道，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬種以上，但是每一個(gè) B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個(gè)脾細(xì)胞（含 B淋巴細(xì)胞）和一個(gè)瘤細(xì)胞雜交，我們不能確定該脾細(xì)胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；若用大量的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，就可以從融合細(xì)胞中篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。目前動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用就是單克隆抗體的制備。僅用兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不一定能得到融合細(xì)胞。 因此，把一種 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生 雜交瘤細(xì)胞，它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性 ── 在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過程中，每一種 B淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗體，必須使能分泌該單一抗體的 B淋巴細(xì)胞大量增殖。 誘導(dǎo)融合方法不同：動(dòng)物細(xì)胞誘導(dǎo)融合所用的方法比植物體細(xì)胞雜交多一類滅活的病毒誘導(dǎo)；結(jié)果不同：植物體細(xì)胞雜交培養(yǎng)成了雜種植株，而動(dòng)物細(xì)胞融合只培養(yǎng)出了雜交細(xì)胞。 雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體。 植物體細(xì)胞雜交、 動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 三 .細(xì)胞工程比較 主要用于制備 單克隆抗體 獲得雜種植株 用途 物理、化學(xué)法 （同左） 滅活的病毒 物理（離心、振蕩、電刺激） 化學(xué)（聚乙二醇） 誘導(dǎo)方法 使細(xì)胞分散后 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 去除細(xì)胞壁后誘 導(dǎo)原生質(zhì)體融合 細(xì)胞融合的方法 細(xì)胞膜流動(dòng)性 細(xì)胞增殖 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、 植物細(xì)胞全能性 原理 動(dòng)物細(xì)胞融合 植物體細(xì)胞雜交 比較項(xiàng)目 克服遠(yuǎn)緣雜交不 親和性的障礙 動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較， 在動(dòng)物細(xì)胞融合中有特殊性的是（ ） A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點(diǎn)
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