爬山虎葉中黃酮類化合物提取條件初探及含量測(cè)定畢業(yè)論文(參考版)
2024-08-31 05:03本頁(yè)面
【正文】 同時(shí)感謝化學(xué)與生命科學(xué)系為我提供了良好的實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)設(shè)備；感謝在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中給予我?guī)椭欣蠋熀透魑煌瑢W(xué)；感謝我親愛(ài)的母校 楚雄師范學(xué)院四年來(lái)對(duì)我的大力栽培。本論文從選題到完成，都是在導(dǎo)師的精心幫助下完成 的。提取條件優(yōu)組合為：提取溫度為 80℃ 、料液比 為 1:乙醇濃 度為75%、提取時(shí)間為 ，此條件下測(cè)得爬山虎葉中黃酮含量為 %。由正交表可以看出，以黃酮類化合物含量為目標(biāo)，最優(yōu)試驗(yàn)條件的組合是 A1B2C2D2，即提取濃度為提 75%，提取時(shí)間為 3h，提取溫度為 80℃ ，料液比為 1:20， 此條件下測(cè)得爬山虎葉中 黃酮類化合物的含量為%。因素水平見(jiàn)表 26，正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表 27。 表 25 提取溫度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 溫度（ ℃ ） 70 75 80 85 90 吸光度 黃酮含量（ %） 由表 25 可知，在 70～ 80℃ 之間，黃酮含量隨著溫度的升高而增加，而在 80～ 90℃ 之間，黃酮含量隨著溫度的升高而降低，因此溫度宜控制在 80℃ 。 吸光度A蘆 丁 溶 液 濃 度 (mg/ml)楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 6 表 23 回流時(shí)間對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 回流時(shí)間（ h） 吸光度 黃酮含量（ %） 料液 比對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 據(jù) ， 在不同 乙醇體積 下 提取爬山虎葉中黃酮類化合物，并計(jì)算其含量，所得結(jié)果如下： 表 24 料液 比對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 料液比 （ g/mL） 1:10 1:15 1:20 1:25 1:30 吸光度 黃酮含量（ %） 由表 24 可知 ， 隨著 料液比 的增大，黃酮含量增大，到 1:20 時(shí) 達(dá)到最大， 1:20 以后隨著 料液比的增大，黃酮含量 逐漸 減小，故較適宜的物料比為 1:20。 由表 23 可知，在 ～ 范圍，黃酮含量隨著回流時(shí)間的增加不斷的增大 ；在 ～ 范圍內(nèi)，黃酮含量隨回流時(shí)間的增加而逐漸減?。?回流時(shí)間為 ，黃酮含量最高。 黃酮含量計(jì)算公式 420 440 460 480 500 520 540 5600 .1 00 .1 20 .1 40 .1 60 .1 80 .2 0吸光度波長(zhǎng)楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 5 CV1 總黃酮含量 = 100103100% V2 V1=10mL V2=1mL C— 測(cè)量液中黃酮的濃度 圖 22 吸光度與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液濃度的關(guān)系 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 乙醇濃度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 據(jù) ，改變乙醇濃度，所得提取液的吸光度及 黃酮 含量 如下： 表 22 乙醇濃度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 乙醇濃度（ %） 70 75 80 85 90 吸光度 黃酮含量（ %） 由表 22 可知 ，隨著乙醇濃度的增大，吸光度不斷增大，當(dāng)乙醇濃度為 80%時(shí)吸光度達(dá)到最大，隨后依次減小，故較適宜乙醇濃度為 80%。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制結(jié)果與分析 及黃酮含量計(jì)算公式 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制結(jié)果與分析 以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo) ， 吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果 見(jiàn)圖 22。 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 4 2 結(jié)果與分析 定性 檢驗(yàn) 結(jié)果 提取液定性 檢驗(yàn) 結(jié)果如下 ： 表 21 黃酮類化合物的定性鑒定 試劑 Al(NO3)3 NaOH Fe3+ 濃氨水 HClZn 現(xiàn)象 黃色 亮黃色 墨綠色 黃色 橙紅色 通過(guò) 5 種顯色反應(yīng)， 提取液 顯色均與黃酮類化合物顯色相同，說(shuō)明 提取液中的提取物 含 黃酮類化合物。 提取溫度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 按照 ，用 、 和 分別在 70℃ ， 75℃ ， 80℃ ， 85℃ ，90℃ 下， 回流提取爬山虎葉中的黃酮類化合物 ，測(cè)定黃酮含量，以確定較適宜的提取溫度。 回流時(shí)間對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 按照 ，用 體積 分?jǐn)?shù)的乙醇，分別回流提取 ， ， ， ， ，測(cè)定黃酮含量，以確定較適宜的回流時(shí)間。 黃酮含量的測(cè)定 準(zhǔn)確移取 10mL 比色管中，加入 %亞硝酸鈉溶液，放置 6 分鐘后，加入 %硝酸鋁溶液，放置 6 分鐘后，加入 4mL4%氫氧化鈉溶液，用相應(yīng)濃度的乙醇溶液稀釋至刻度， 再 放置 10 分鐘，以試劑為 參比 ，在一定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，平行測(cè)定三次，結(jié)果取平均值，并計(jì)算含量。 最大吸收波長(zhǎng)的選擇 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 3 準(zhǔn)確移取 液于 10mL 比色管中， 加入 5%亞硝酸鈉溶液，放置 6分鐘后，加入 %硝酸鋁溶液，放置 6 分鐘后，加入 %氫氧化鈉溶液，用 95%乙醇溶液稀釋至刻度，再放置 10 分鐘，以試劑為 參比 ，在 430～ 550nm 波長(zhǎng)范圍測(cè)定吸光度。 若溶液呈橙黃色，說(shuō)明含有黃酮。 若溶液呈黃色，說(shuō)明 含 黃酮。 若溶 液呈墨綠色，說(shuō)明含 黃酮。 若溶液呈亮黃色，說(shuō)明含 黃酮。 若溶液呈黃色，說(shuō)明
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