【正文】 1～3s（6）稍水洗 （4）流水洗去蘇木素液1～2s（3）蘇木素液染色（60℃）3～5min（27）中性樹膠封固注：①（12）和（13）項(xiàng)可省去，但（14）的沖水時間需延長至10～15min（細(xì)胞核顯示更清晰）。3～5min（26）二甲苯Ⅲ3～5min（25）二甲苯Ⅱ 3～5min（24）二甲苯Ⅰ 3～5min（23）石炭酸二甲苯2～3min （21）無水乙醇Ⅰ2～3min（20）95%乙醇Ⅱ 1～2s（19）95%乙醇Ⅰ 1～2s（18）80%乙醇（13）返藍(lán)（用溫水或1%氨水等） 5～10s1～3s（12）稍水洗1min（9）蘇木素液染色1min（8）蒸餾水1～3min（7）80%乙醇1～3min（6）95%乙醇Ⅱ1～3min（5）95%乙醇Ⅰ1～3min（4）無水乙醇Ⅱ5～10min（3）無水乙醇Ⅰ5～10min（2）二甲苯Ⅱ㈠染色程序1．石蠟切片HE染色（常規(guī)HE染色）（1）二甲苯Ⅰ5．微波處理可加速脫鈣過程。㈣注意事項(xiàng)1．骨片等脫鈣組織的厚度適宜。 按常規(guī)脫水。7． 將骨片置于5%硝酸（急需時可置于37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可入時為止，約需12~24h（小塊骨組織脫鈣僅需2~3h），其間可更新脫鈣液2～3次。3． 3～5滴五、脫鈣方法骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進(jìn)行切片。冰醋酸 100ml 95%乙醇 （2）乙醇冰醋酸液95%乙醇無水乙醚3．調(diào)節(jié)冷凍程度，試切合適時便迅速切片。使用氯乙烷時應(yīng)注意防火、防爆。（9）切片完畢后，先關(guān)閉電源，再關(guān)閉冷卻水，待冰霜融化后擦干機(jī)器，加罩。（6）將新鮮組織塊或已固定的組織放在冷凍臺中央，滴加水或OCT，或用水調(diào)成糊狀的甲基纖維素于組織塊周圍（將組織塊包埋）。（2）將組織冷凍臺安裝在半導(dǎo)體切片機(jī)上。也可用毛筆將切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進(jìn)行染色。 （1）將組織塊放在冷凍臺上，滴加OCT或羥甲基纖維素液于組織塊周圍（將組織塊包埋），使固定在切片機(jī)上的切片刀接近組織塊表面。恒冷箱切片機(jī)種類較多，應(yīng)嚴(yán)格按有關(guān)廠商的說明書操作。 （6）丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物，進(jìn)行上述各項(xiàng)流程時，2m距離內(nèi)不得存在明火。（2）全部制片過程一般在20~25min內(nèi)完成。（4）迅速切片，裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。4．包埋、切片和染色。2．脫水（1）將已經(jīng)煮沸固定的組織塊取出，用刀片將其厚度修切至，隨即置入盛有5~8 ml丙酮的試管中，煮沸2 min，然后將丙酮傾棄。②固定、脫水的環(huán)境溫度不得30℃。14．注意事項(xiàng)（1）必須按有關(guān)說明書的規(guī)定，使用和維護(hù)自動組織處理機(jī)、包埋機(jī)、磨刀機(jī)、封蓋玻片機(jī)等儀器等。（2）用組織包埋機(jī)時，按有關(guān)廠商說明書的規(guī)定操作。 ④切片人員應(yīng)細(xì)心操作，防范被切片刀具割傷。②切片機(jī)的質(zhì)量是制備優(yōu)質(zhì)切片的重要前提。［注意：必須確保載玻片上的病理號與相關(guān)組織石蠟包埋塊的病理號完全一致，不得錯寫或漏寫病理號。］（9）將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經(jīng)3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3aminopropyltriethoxy silane，APES)處理過的載玻片上（HE染色時酌情使用，可省略，必要時）。［注意：對于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進(jìn)行的深切片），應(yīng)盡量少修塊，以盡量好地獲得有關(guān)病變的連續(xù)性。夾角）。（2）載玻片必須潔凈、光亮。浸蠟Ⅰ用軟蠟（熔點(diǎn)為45~50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點(diǎn)為56~58℃）。發(fā)生包埋差錯時，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系，及時處置。（8）注意事項(xiàng)將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。5．包埋（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中；應(yīng)將組織塊平正地置放于包埋模具底面的中央處；包埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細(xì)小組織應(yīng)彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。②熔蠟的容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。 ②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并依不同種類組織及其大小而異；組織呈現(xiàn)棕黃或暗紅色透明即可。 ⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者，應(yīng)將兩者分開進(jìn)行脫水。 60min［注意事項(xiàng)］①未經(jīng)充分固定的組織不得進(jìn)入脫水程序。 60~120min（7）無水乙醇Ⅲ 60~120min（5）無水乙醇Ⅰ 60~120min（4）95%乙醇Ⅱ ㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。本液多用于固定淋巴組織。 100ml［說明］本液臨用時配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。B液：8%多聚甲醛水溶液() A液：賴氨酸 6．過碘酸－賴氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）組織塊置于Bouin液固定12～24小時即可（小塊組織只需固定數(shù)小時）。 使用前加入5ml冰醋酸，混合。 10ml［說明］組織化學(xué)染色的常用固定液，組織經(jīng)Carnoy液固定1～2小時后，即可移入無水乙醇中脫水。 冰醋酸 30ml 氯仿 60ml 無水乙醇 3．Carnoy固定液 ④室內(nèi)常溫（25℃左右）下的固定時間為3~24小時；低溫（4℃）下的固定時間應(yīng)延長。㈤多數(shù)固定液對人體有害，需要防護(hù)，必須在封閉的通風(fēng)條件下進(jìn)行操作。5．淋巴結(jié)：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數(shù)片（厚2 ~3mm），繼續(xù)固定。應(yīng)避免標(biāo)本彎曲和相互間的疊壓。㈢根據(jù)病理學(xué)特殊檢查（特殊染色和組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應(yīng)選用其他適宜的固定液進(jìn)行固定［參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”］。臨床科室切取的標(biāo)本置放于容器中固定后，應(yīng)盡快送交病理科繼續(xù)固定。六、病理學(xué)相關(guān)技術(shù)實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)施應(yīng)用特殊染色和組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、塑料包埋組織切片制備、電子顯微鏡超微病理診斷檢材制備、圖像分析、流式細(xì)胞分析（FCM）、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、細(xì)胞和分子細(xì)胞遺傳學(xué)、病理學(xué)攝影技術(shù)和其他新開發(fā)、引進(jìn)的病理學(xué)相關(guān)技術(shù)的病理科，應(yīng)個根據(jù)有關(guān)技術(shù)要求，建立具有必備基本設(shè)施的實(shí)驗(yàn)室。 腫物穿刺取材室：1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修2．室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備3．用于實(shí)施穿刺術(shù)的檢查床、椅4．穿刺用器械和器械柜5．穿刺用、急救用藥物和藥品柜6．其他相關(guān)設(shè)備(二)細(xì)胞學(xué)涂片制片室：1．用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和常規(guī)設(shè)備［參見本節(jié)的三(三)項(xiàng)：“常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)／快速制片室”］) 2．可調(diào)速離心機(jī)3．自動細(xì)胞病理學(xué)檢查系統(tǒng)（具有一定規(guī)模的病理科，酌情）4．其他相關(guān)設(shè)備 (三)細(xì)胞病理學(xué)診斷室：參見本節(jié)的三(五)項(xiàng)（病理組織學(xué)診斷室和病理會診室）。[* 2～4：具有一定規(guī)模的病理科配置]5．遠(yuǎn)程會診系統(tǒng)（酌情）6．其他相關(guān)設(shè)備(六)病理檔案資料室1．用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具2．計算機(jī)和打印機(jī)（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學(xué)檢查資料的儲存和調(diào)閱） 3．秘書辦公設(shè)施（具有一定規(guī)模的病理科）4．其他相關(guān)設(shè)備(七)必要的專業(yè)參考書和基本的專業(yè)期刊（具有一定規(guī)模的病理科應(yīng)設(shè)立圖書資料室）(八)病理大體標(biāo)本制作室和陳列室1．制作病理大體標(biāo)本的工具2．用于陳列病理大體標(biāo)本的展覽柜（配備照明裝置）3．其他相關(guān)設(shè)備(九)辦公室：必要的辦公設(shè)備(十)儲藏室：必要設(shè)施(十一)淋浴室：必備設(shè)施四、細(xì)胞病理學(xué)檢查工作的基本設(shè)施(一) ［ 11和12：兩項(xiàng)皆配備或配備一項(xiàng)］13．冰箱14．恒溫箱15．烤箱16．有關(guān)試劑和試劑柜17．天平18．染色用器具19．普通光學(xué)顯微鏡（用于染色質(zhì)量控制）20．其他相關(guān)設(shè)備(四)特殊染色和免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)室1．用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和染色的常規(guī)設(shè)備［參見上文：(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和制片室］2．微波爐或其他抗原修復(fù)設(shè)備3．有關(guān)試劑和試劑柜4．自動免疫組化染色儀（具有一定規(guī)模的病理科，酌情）5．其他相關(guān)設(shè)備(五)病理組織學(xué)診斷室和病理會診室1．雙筒顯微鏡（每名病理醫(yī)師配備一臺）*2．雙頭和／或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓(xùn)示教）*3．計算機(jī)和打印機(jī)（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學(xué)檢查資料的儲存和調(diào)閱） *4．顯微攝影設(shè)備，計算機(jī)圖像分析、電子圖像存儲和放映設(shè)備(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)/快速制片室1．排放有毒物質(zhì)的室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施（用于組織塊和石蠟切片的人工脫水流程）2．符合個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨(dú)立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）3．室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備4．封閉式高效能通風(fēng)柜廚（用于人工脫水流程）5．實(shí)驗(yàn)臺6．脫水設(shè)備：①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機(jī)7．組織塊石蠟包埋機(jī)8．石蠟切片機(jī)*9．恒溫冷凍切片機(jī)*10．石蠟快速切片機(jī) (二)保護(hù)病理工作人員免受污染。 八、有條件的病理科可開展遠(yuǎn)程病理會診。六、加做相關(guān)技術(shù)檢測方能作出診斷的會診病例，會診醫(yī)師應(yīng)在《意見書》中予以說明，并向患方進(jìn)行適當(dāng)解釋。 患方外借病理切片會診時，受理會診的病理科若確實(shí)需要有關(guān)病例病理檢材的蠟塊，可由有關(guān)病理科雙方協(xié)商解決。3． 借用手續(xù)參見上項(xiàng)(二)。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片；有條件的單位可酌情進(jìn)行遠(yuǎn)程病理會診。 復(fù)制切片借出（或售出）前，應(yīng)確認(rèn)該切片的病變與原切片相同或基本相同。 四、病理學(xué)檢查資料的借用 (二)住院患者為送檢后30年。(二)各種病理學(xué)檢查的文字資料應(yīng)裝訂成冊保存。病理科必須設(shè)立病理檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度（包括病理檢查資料的歸檔、借用和歸還手續(xù)等），并有專人管理。十、尸檢資料的管理報告書的正本隨同其他尸檢資料一并歸檔，報告書的副本發(fā)給委托尸檢方。疾病診斷力求使用國際醫(yī)學(xué)規(guī)范術(shù)語，并按各疾病的致死重要性和因果關(guān)系排序。 10. 其他資料。(2)主要疾?。∽冎g、主要疾病與繼發(fā)／伴發(fā)疾病之間的相互關(guān)系。7. 死亡原因。例如毒物、病原生物學(xué)等檢查（附有關(guān)檢查報告）。(2)體表檢查所見。5. 尸檢所見（附有必要的圖像資料）。3. 一般資料：包括死者的尸檢號、姓名、性別、年齡、籍貫、民族、出生地、住址、死亡時間、尸檢時間和地點(diǎn)、相關(guān)醫(yī)院（臨床科室、住院號／門診號／急癥號）、委托或申請尸檢單位及主持尸檢人員和助手等。 光鏡檢查切片，客觀地描述和記錄各系統(tǒng)、器官的病變要點(diǎn)； (二)在綜合鏡檢和巨檢（肉眼檢查）所見的基礎(chǔ)上，結(jié)合死者生前的臨床資料等形成尸檢的病理診斷。七、尸檢組織切片的光學(xué)顯微鏡檢查和病理學(xué)診斷(一)5．進(jìn)行上述各項(xiàng)衛(wèi)生處置過程中必須嚴(yán)防污染有關(guān)人員和尸檢室內(nèi)、外環(huán)境。(四)尸檢結(jié)束后衛(wèi)生處置1．認(rèn)真清洗尸檢臺和尸檢室，并進(jìn)行環(huán)境消毒。(八)尸檢過程現(xiàn)場文字（或語音）記錄、攝影或錄象工作的準(zhǔn)備。(四)將擬行剖驗(yàn)的尸體移送至尸檢室。(八)下列情況的尸檢可不受理：1．委托尸檢手續(xù)不完備者（包括未按規(guī)定交納尸檢費(fèi)用者）；2．拒簽《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》者（包括對于尸檢的術(shù)式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式等持有異義從而影響尸檢實(shí)施和尸檢結(jié)論形成者）；3．委托尸檢方與受理尸檢方就涉及尸檢的某些重要問題未能達(dá)成協(xié)議者； 4. 死者死亡超過48小時未經(jīng)冷凍、或冷凍超過7日者；5．疑因或確因烈性傳染病死亡的病例，尸檢方不具備相應(yīng)尸檢設(shè)施條件者；6．因其他情況不能受理者。 4．明確新生兒和圍生期胎兒尸檢后的尸體處理方式。2．授權(quán)主持尸檢人員根據(jù)實(shí)際需要確定尸檢的術(shù)式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式。 (三)受理尸檢部門：具備獨(dú)立尸檢能力的①醫(yī)院病理科，②醫(yī)學(xué)院校的病理學(xué)教研室，③經(jīng)醫(yī)政部門注冊的病理診斷中心。 第四節(jié) 四、資料管理3．病理科應(yīng)有專人發(fā)送細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書。(六)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的書寫要求1. 參照本章第一節(jié)（“常規(guī)活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)”）中“八（二）”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。，可酌情就細(xì)胞病理學(xué)診斷及其相關(guān)問題附加：①某些建議（例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、病理科外病理學(xué)會診、密切隨查/隨訪等）；②注釋／討論。因此，細(xì)胞病理學(xué)檢查的陰性結(jié)果并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察的實(shí)際情況，對于某種疾病／病變做出肯定性（Ⅰ類）、不同程度意向性（Ⅱ類）細(xì)胞學(xué)診斷，或是提供形態(tài)描述性（Ⅲ類）細(xì)胞學(xué)診斷，或是告知