20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細(xì)胞術(shù)檢測人和小鼠細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子方法的建立-資料下載頁
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【正文】 wrence DA. Differential modulation of surface and intracellular protein expression by T cells after stimulation in the presence of monensin or brefeldin A. Clin Diagn Lab Immunol. 2002 Mar。9(2):24350.7. Nagy G, Pallinger E, AntalSzalmas P, Aleksza M, Marschalko M, Brozik M, Falus A, Gergely P. Measurement of intracellular interferongamma and interleukin4 in whole blood T lymphocytes from patients with systemic lupus erythematosus. Immunol Lett , 2000 Nov 1。74(3):20710 BCA圖1 10ng、20ng、50ng PMA和500ng/ml Ionomycin共同刺激4h后人外周血T淋巴細(xì)胞CDCD8和CD3的表達(dá)。圖中A、B、C系列分別是10ng、20ng、50ng PMA刺激后CDCD8和CD3的表達(dá)。各種濃度的PMA刺激后均不能有效的區(qū)分CD4陰性和CD4陽性細(xì)胞，而CD3和CD8的表達(dá)受影響很小，可以有效的區(qū)分陰性和陽性細(xì)胞。8h12h圖2 不同時(shí)間的PMA刺激對(duì)小鼠外周血T淋巴細(xì)胞抗原表達(dá)的影響。PMA刺激8h后T淋巴細(xì)胞CD4的表達(dá)有輕度下降，但是仍能有效的區(qū)分CD4陰性和CD4陽性細(xì)胞。PMA刺激12h后，CD4陽性的表達(dá)明顯下降。而CD8表達(dá)在8h和12h均沒有明顯下降。ABCD圖3 流式細(xì)胞儀檢測人外周血Th1和Th2細(xì)胞。A為FSC和SSC的散點(diǎn)圖，R1區(qū)為淋巴細(xì)胞區(qū)；B為CD3和CD8的散點(diǎn)圖，R2區(qū)為Th細(xì)胞（CD3＋CD8－），R3區(qū)為Tc細(xì)胞（CD3＋CD8＋）。C為以“R1 and R2”設(shè)門，IL4和IFNγ的散點(diǎn)圖， IFNγ＋和IL4＋細(xì)胞分別為Th1和Th2細(xì)胞。D為以“R1 and R3”設(shè)門，IL4和IFNγ的散點(diǎn)圖。BA圖4 小鼠外周血ThTh2細(xì)胞。A為CD4直方圖，R2為CD4＋細(xì)胞，B為IL4和IFNγ的散點(diǎn)圖。內(nèi)容總結(jié)
（1）流式細(xì)胞術(shù)檢測人和小鼠Th細(xì)胞亞群
早在1986年Mosmann等[1]依據(jù)小鼠分泌的細(xì)胞因子譜不同首次將Th細(xì)胞分為Th1和Th2兩個(gè)功能不同的獨(dú)立亞群
（2）采用FACS軟件及CD3APC、CD8PercP 、IFNγFITC、IL4 – PE抗體單雙標(biāo)記的淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)儀器的補(bǔ)償，采用Cellquest軟件獲取分析細(xì)胞
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